溶酶体功能变化对3T3L1脂肪前体细胞外泌体调控作用研究

发布时间：2021-11-23 22:40

　　目的探讨体外培养的3T3L1脂肪前体细胞溶酶体损伤对其外泌体分泌的影响。方法将在DMEM培养基中培养24 h的3T3L1细胞设为对照组;采用Lamp2 shRNA沉默3T3L1细胞中的Lamp2基因表达（Lamp2敲除组）,并同时给与NH₄Cl（NH₄Cl组）刺激破坏溶酶体功能。Western blotting、免疫荧光染色检测沉默效应;Lysotracker染色检测溶酶体功能;外泌体定量检测试剂盒进行外泌体定量计数分析;Western blotting检测细胞外泌体相关蛋白表达。结果 NH₄Cl组细胞酸性溶酶体数量少于对照组（P<0.05）。与对照组比较,NH₄Cl组细胞培养基中外泌体数量无明显变化,细胞中外泌体发生相关蛋白Annexin A2、CD63、CD81的转录水平和翻译水平均无明显改变（P>0.05）。Lamp2敲除组细胞酸性溶酶体数量及Lamp2蛋白水平、荧光数量和强度均明显低于对照组（P<0.05）。与对照组比较,Lamp2敲除组细胞培养基中外泌体数量无明显变化,细... 

【文章来源】：临床军医杂志. 2020,48(05)

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

对照组与NH4Cl组细胞溶酶体Lysotracker染色结果比较(a.对照组;b.NH4Cl组)

2.4 对照组与Lamp2敲除组细胞外泌体分泌情况比较 电镜下,外泌体形态良好。与对照组比较,Lamp2敲除组细胞培养基中外泌体数量无明显变化,细胞中外泌体发生相关蛋白Annexin A2、CD63、CD81的转录水平和翻译水平均无明显改变(P>0.05)。见图4。图3 对照组与Lamp2敲除组蛋白敲除效率及细胞酸性溶酶体数量、荧光数量和强度比较

对照组与Lamp2敲除组蛋白敲除效率及细胞酸性溶酶体数量、荧光数量和强度比较

【参考文献】：
期刊论文
[1]外泌体提取方法及鉴定分析研究进展[J]. 贺娇,许泼实.  中华实用诊断与治疗杂志. 2018(07)



本文编号：3514769