敲低Krüppel样因子4（KLF4）促进RAW264.7巨噬细胞向M1型极化

发布时间：2021-12-23 06:17

　　目的研究敲低Krüppel样因子4（KLF4）基因对RAW264.7巨噬细胞极化的影响。方法采用RNA干涉技术（RNAi）构建敲低KLF4的慢病毒载体,转染RAW264.7巨噬细胞获得KLF4基因沉默的稳定细胞株。采用白细胞介素4（IL-4）刺激野生型、 KLF4敲低组和阴性对照组巨噬细胞,反转录PCR检测细胞诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、 IL-1β、肿瘤坏死因子α（TNF-α）及精氨酸酶1（Arg1）、 IL-10、转化生长因子β（TGF-β）的mRNA水平,免疫细胞化学染色检测和定位巨噬细胞iNOS及Arg1蛋白。结果敲低KLF4基因后, RAW264.7细胞的iNOS、 IL-1β的mRNA含量明显增高,而TNF-α、Arg1、 IL-10及TGF-β的mRNA含量则明显降低; IL-4处理野生型RAW264.7细胞后KLF4、 Arg1、 IL-10及TGF-β的mRNA的表达增加, iNOS、 IL-1β及TNF-αmRNA的表达减少; IL-4处理敲低KLF4的细胞,其iNOS、 IL-1β及TNF-αmRNA含量低于野生型组,但高于阴性对照组,而Arg1、 IL-10... 

【文章来源】：细胞与分子免疫学杂志. 2020,36(09)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

实时定量PCR检测细胞培养12 h后巨噬细胞iNOS、 IL-1β、 TNF-α、 Arg1、 IL-10及TGF-β的 mRNA表达

实时定量PCR结果显示, IL-4处理 RAW264.7 细胞12 h后, IL-4组细胞的KLF4 mRNA 相对表达量比WT组细胞明显增加, 差异具有统计学意义(P<0.05, 图2)。2.3 IL-4处理野生型RAW264.7 细胞后, M1型标志物 iNOS、 IL-1β及TNF-α mRNA的表达量降低, M2型标志物 Arg1、 IL-10及TGF-β mRNA的表达量增加

实时定量PCR结果显示, 与WT对照组相比, IL-4处理野生型 RAW264.7细胞12 h后, iNOS、 IL-1β 及TNF-α基因的mRNA相对表达量明显降低, Arg1、 IL-10及TGF-β基因的mRNA的相对表达量明显增加, 差异具有统计学意义(P<0.01, 图3)。2.4 IL-4处理shKLF4-RAW264.7 细胞后, M1型细胞标志物 iNOS、 IL-1β及TNF-α mRNA表达量降低, M2型细胞标志物 Arg1、 IL-10及TGF-β mRNA表达量增加

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3547951