小叶杨TMM基因启动子克隆及表达模式分析

发布时间：2021-12-29 03:12

　　气孔作为植物与外界进行气体交换的通道,对植物自身的生长发育至关重要。研究表明植物TMM蛋白与植物气孔的形成发育密切相关。本研究利用PCR技术克隆了小叶杨(Populus simonii Carr.) TMM基因5’端上游的调控序列pPsTMM,长度为2 336 bp。生物信息学分析结果表明:小叶杨启动子pPsTMM除了含有TATA-box、CAAT-box等核心启动子元件之外,还含有多种光响应元件、植物激素响应元件、抗逆胁迫相关元件以及生理代谢和生长发育相关元件等,说明转录活性还可能受到光、植物激素、逆境胁迫等因素诱导。利用双酶切法构建植物表达载体pBI121-pPsTMM-GUS,叶盘法稳定遗传转化烟草,GUS化学组织染色显示GUS主要集中在叶芽起始发育部位表达,说明pPsTMM启动活性具有组织特异性。对非生物胁迫的转基因烟草进行GUS化学染色以及进行荧光定量PCR,结果显示pPsTMM对不同因素的非生物胁迫响应程度存在差异性,干旱和盐胁迫下启动活性很低,高温和低温对其调控作用也不明显,但对外在施加的植物激素(GA, NAA, ABA)和水杨酸(SA)响应程度很高,说明pPsTMM启...

【文章来源】： 分子植物育种. 2020,18(01)北大核心CSCD

【文章页数】：9 页

【文章目录】：
1 结果与分析
    1.1 TMM基因启动子克隆
    1.2 pPsTMM顺式作用元件分析
    1.3 pPsTMM表达模式分析
        1.3.1 pPsTMM组织特异性分析
        1.3.2 非生物胁迫下小叶杨pPsTMM基因启动子表达模式
2 讨论
3 材料与方法
    3.1 试验材料
    3.2 小叶杨基因组DNA提取
    3.3 小叶杨TMM基因启动子克隆
    3.4 生物信息学分析
    3.5 小叶杨TMM基因启动子植物表达载体构建
    3.6 叶盘法烟草遗传转化
    3.7 转基因烟草非生物胁迫处理
    3.8 胁迫植株GUS化学组织染色
    3.9 胁迫植株荧光定量PCR
作者贡献


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3555286