利用分子环化技术提高瘤胃微生物木聚糖酶热稳定性

发布时间：2021-12-29 04:50

　　在高温下保持催化活性是工业酶的重要性质。近年来,采用基因工程、蛋白质工程技术提高野生酶进行催化活性或耐热等性质取得了重要进展。文中利用新近建立起来的异肽键介导的SpyTag/SpyCatcher系统对瘤胃微生物来源的木聚糖酶XYN11-6进行分子环化,获得稳定的环化酶C-XYN11-6。在60℃、70℃和80℃下处理10 min,C-XYN11-6的残余活性为81.53%、73.98%和64.41%,分别是相同条件下线性蛋白L-XYN11-6残余活性的1.48、2.92、3.98倍。经60–90℃热处理10 min后,C-XYN11-6仍保持可溶状态,而L-XYN11-6几乎完全聚沉。内源荧光和8-苯胺-1-萘磺酸（8-anilino-1-naphthalenesulfonic acid,ANS）结合荧光光谱分析显示,较之L-XYN11-6,热处理环境中C-XYN11-6更能够维持其构象稳定。值得注意的是,分子环化提高了C-XYN11-6对0.1–50 mmol/L Ca²⁺或0.1 mmol/L Cu²⁺的耐受能力。综上所述,文中利用Spy... 

【文章来源】：生物工程学报. 2020,36(05)北大核心CSCD

【文章页数】：12 页

【部分图文】：

木聚糖酶系统发育树分析

XYN11-6的分子环化

XYN11-6最适pH和pH耐受

【参考文献】：
期刊论文
[1]可基因编码的多肽-蛋白质化学反应对[J]. 方晶,张文彬.  高分子学报. 2018(04)
[2]反刍动物生理代谢与瘤胃微生物关系的研究[J]. 田丽萍,张才,汪纪仓,赵红先,杜伯强,李爱强,王业鑫,杨自军.  黑龙江畜牧兽医. 2016(15)
[3]蛋白质环化的研究进展[J]. 王心哲,张光亚.  生物工程学报. 2016(04)

博士论文
[1]糖苷水解酶与酯水解酶稳定性和底物选择性调控的结构基础[D]. 安娇.吉林大学 2015

硕士论文
[1]通过N-端置换及定点突变提高木聚糖酶AoXyn11A耐热性的研究[D]. 何瑶.江南大学 2016



本文编号：3555433