果蝇Kc细胞对溴氰菊酯应激响应的机理研究

发布时间：2022-01-17 16:11

　　溴氰菊酯（DM）被广泛应用于农业、公共卫生和兽医学等领域,由于使用量大、范围广,导致了全球性的抗药性,因此,深入研究DM的抗性机理具有非常重要的意义。有研究报道DM能引起昆虫细胞氧化应激,而Nrf2-Keap1信号通路是细胞中重要的抗氧化通路,在预防外源性物质损伤方面发挥着关键作用。Nrf2基因通过调节多种抗氧化和解毒酶的表达来调控抗氧化反应和异生质代谢,从而保护细胞免受包括内源性物质、活性氧（ROS）、辐射和环境毒素在内的刺激导致的损伤。因此我们推断转录因子Nrf2可能在DM应激和耐受中发挥作用。为探究Nrf2通路与昆虫DM耐受性之间的关系,我们以果蝇Kc细胞为模式细胞,分析Nrf2对DM的应激响应及细胞DM耐受水平的影响,结果如下:1、DM刺激后细胞内ROS含量迅速增加。应激细胞中ROS的生成量与DM剂量和应激时间相关,在一定DM剂量内ROS量随着剂量增加不断增加并达到峰值;在同一剂量下,ROS量随着应激时间增加不断增加并达到峰值。2、DM刺激可以使细胞中Nrf2基因的表达显著上调并发生核聚集。qPCR检测显示,20 ppm DM诱导24 h时,细胞中Nrf2基因的转录水平达到最大... 

【文章来源】：南京师范大学江苏省 211工程院校

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

DM刺激下细胞中的氧化应激水平

20图 2.2 DM 刺激下细胞中 Nrf2 基因的表达水平A:时间梯度；B：浓度梯度；n=3, *代表 p < 0.05.Fig. 2.2 mRNAexpression of Nrf2 gene in cells stimulated by DMA: Time gradient; B: concentration gradient;n=3; (*) represents p < 0.05 compared with the control.

图 2.3 DM 刺激下细胞中 Nrf2 蛋白的核质分布情况A:时间梯度；B：浓度梯度Fig. 2.3 Distribution of Nrf2 protein in cells stimulated by DMA: Time gradient; B: concentration gradient3.3 DM 胁迫对细胞活性的影响为了探讨 DM 处理对细胞活性的影响，且考虑到 Nrf2 在细胞凋亡中起用，运用流式细胞仪检测了细胞凋亡率，用来表示细胞的存活状况。如图示，DM 的刺激会导致细胞整体凋亡率显著升高，但结果显示随着 Nrf2 增加，细胞凋亡率降低。在 20 ppm DM 处理 24 h 后细胞凋亡率(约 13%)他实验组要低。

【参考文献】：
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本文编号：3595035