鞘氨醇激酶1在小鼠早期妊娠子宫中的表达

发布时间：2022-02-13 13:15

　　鞘氨醇类代谢产物,在调节细胞活动中发挥重要作用,维持鞘脂代谢的平衡,对细胞的生长和发育具有至关重要的作用。鞘氨醇激酶（Sphingosine kinase;SK）是保持鞘脂平衡的重要调节因子,在细胞的增殖、迁移、侵袭以及血管生成中起着重要作用。SK1具有促进细胞生存和增殖的功能。胚胎着床过程中主要涉及细胞增殖、迁移和血管生成,因此SK1可能参与胚胎着床过程。本研究通过建立小鼠早期正常妊娠模型、假孕模型、人工蜕膜化模型、延迟着床和激活着床模型,采用免疫荧光的方法检测SK1在小鼠各模型子宫组织中的定位表达情况,应用Western blot的方法检测小鼠正常妊娠模型中SK1的表达量。在体外诱导小鼠子宫基质细胞发生蜕膜化,通过实时定量PCR的方法,检测SK1 mRNA在体外蜕膜化细胞中的表达量,进一步确定SK1的表达与蜕膜化的相关性。免疫荧光结果显示,在小鼠早期妊娠模型中,妊娠1～4天时SK1主要在基质区域表达,而子宫腔上皮和腺上皮无表达,妊娠5～8天时SK1主要表达在次级蜕膜区域。亚细胞定位显示SK1在蜕膜细胞的细胞质中表达。在小鼠假孕妊娠模型中,SK1主要表达在基质区域,假孕第5天的表达低... 

【文章来源】：东北林业大学黑龙江省211工程院校教育部直属院校

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２－１正常妊娠模型制?

２．３．２小鼠假孕模型的建立??获得结扎公鼠后，与发情期雌鼠合笼，观察到阴道栓后第３天，取出子宫组织，以??生理盐水冲洗输卵管，无桑葚胚，而是获得成熟卵母细胞（图２－３，?Ａ），表明公鼠结扎??成功，同时成功制取假孕第３天模型。假孕模型第１天与正常妊娠第１天一致，均以见??到阴道栓为妊娠成功标志。假孕第５天，子宫组织无蓝色着床位点（图２－３，?Ｂ）。假孕??第１、３天子宫组织在形态学上与正常妊娠子宫组织无差别。??Ａ?—?Ｂ?—??图中Ａ为假孕小鼠输卵管中检测到的成熟卵母细胞；Ｂ为假孕第５天的子宫组织，无蓝色着床??位点，标尺为１?ｃｍ??图２－３假孕妊娠模型制备结果??２．３．３小鼠人工蜕膜化模型的建立??将发情期小鼠与结扎公鼠合笼，以见到阴道栓为妊娠第１天。待妊娠第４天，对妊??娠小鼠单侧子宫角注射芝麻油，饲养至妊娠第８天，取出子宫组织，在注射过芝麻油的??一侧子宫有明显突起（图２－４），表明人工蜕膜化模型诱导成功，未注射芝麻油一侧子宫??角为对照组。此模型重复３组。??＇＇丨

图３－５定性表达共定位表达数据分析??３．３．１．２小鼠假孕模型中ＳＫ１的表达??ＳＫ１在小鼠假孕妊娠子宫组织中的检测结果如图３－６所示，统计结果见表３－７，与??正常妊娠第１、３、５天表达量的荧光分析见图３－８。与正常妊娠模型不同，假孕妊娠小??鼠无胚胎，且妊娠第５天无着床现象。由图３－６可知，在假孕妊娠模型中，ＳＫ１主要在??基质区域表达。ＳＫ１的表达量在假孕妊娠第５天明显低于正常妊娠第５天，结果具有统??计学意义（＊Ｐ＜ａ〇５）（图３－８），结果显示ＳＫ１的表达与活化胚胎可能相关。??－２４－??

【参考文献】：
期刊论文
[1]发芽蚕豆左旋多巴超声强化提取及其动力学过程[J]. 宋江峰,李大婧,刘春泉.  农业工程学报. 2012(19)
[2]胚胎着床的分子调控网络[J]. 雷伟,杨增明.  生理科学进展. 2010(06)



本文编号：3623259