水稻转录因子OsWRKY68蛋白质的表达特征及其功能研究
发布时间：2022-02-13 14:45
水稻（Oryza sativa L.）是人类最主要的粮食作物之一,WRKY转录因子是水稻中最大的转录因子家族之一。水稻中有近百个WRKY转录因子家族成员,每个WRKY转录因子都有其特定的编号和功能。本实验室前期发现OsWRKY68蛋白质在水稻接种白叶枯病菌后诱导表达,在叶片中组成型表达。温度、干旱和盐等非生物逆境严重危害水稻的生长和产量,研究水稻WRKY转录因子的功能对了解水稻生长发育、抗病抗逆机理等具有重要的理论意义和应用价值。本研究利用OsWRKY68蛋白质特异抗体,通过免疫印迹技术调查了OsWRKY68蛋白质在水稻正常生长发育、非生物胁迫和激素处理条件下的表达特征,发现OsWRKY68蛋白质在水稻正常生长发育过程中基本呈组成型表达,分子量约为32 kD,和预测理论值大小相符。在盐胁迫和恒暗处理后OsWRKY68蛋白质的表达丰度随时间延长持续下降。恒光、茉莉酸甲酯和乙烯利处理后,诱导了分子量较大的OsWRKY68+的表达,且表达丰度随时间延长逐渐增加。对OsWRKY68 RNAi转基因水稻进行PCR和WB鉴定,观察转基因水稻的表型并分析其农艺性状。通过鉴定,获...
【文章来源】：河北农业大学河北省
【文章页数】：49 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
OsWRKY68蛋白质在水稻离体叶片恒暗、恒光和H2O2（10mmol/L）处理下的表达特征
RKY68 蛋白质在水稻苗期 NaCl（200 mmol/L）和 PEG6000（20%ession profiling of rice OsWRKY68 protein at seedling stage under 20PEG6000 treatment，经 4℃、44℃和 48℃胁迫处理后，随着时间的延长，没有明显改变。水淹胁迫处理后（图 4b），OsWRKY表明，OsWRKY68 蛋白质在盐胁迫和恒暗胁迫应答过OsWRKY68+）在恒光胁迫中发挥作用。
ABA：脱落酸；ET：乙烯利；MeJA：茉莉酸甲酯；SA：水杨酸ABA: Abscisic acid; ET: Ethephon; MeJA: Methyl jasmonate; SA: Salicy图 5 水稻 OsWRKY68 蛋白质受激素处理后的表达特征Fig. 5 The expression profilling of OsWRKY68 protein were treated with hsWRKY68 RNAi 转基因株系的鉴定介导法将 OsWRKY68 基因 RNAi 质粒导入水稻受体 TP309，号为 G309-G319 和 G325-G337。对这 24 个转基因株系进行株系 G310、G316、G317、G326、G330 和 G337，将 PCR中，并通过 PCR 和 WB 技术对后代继续进行鉴定。6 个阳性株系的 T3代各 5 株转基因水稻分别进行检测，PCR317、Y326 和 Y337 中均出现了大小为 1000 bp 的条带，而在6a），表明 OsWRKY68 基因 RNAi 质粒导入成功，并且稳定遗转基因株系中 OsWRKY68 蛋白质的表达丰度均比 TP309 低性的 OsWRKY68 蛋白质下调的转基因株系即 Y316、Y317、
【参考文献】：
期刊论文
[1]水稻蛋白质样品资源库RiceS-A300的建立与应用[J]. 张剑硕,马金姣,张彤,陈悦,魏健,张柳,史佳楠,徐珊,燕高伟,杜铁民,窦世娟,李莉云,刘丽娟,刘国振. 中国农业科学. 2018(19)
[2]植物WRKY转录因子及其生物学功能研究进展[J]. 谢政文,王连军,陈锦洋,王娇,苏一钧,杨新笋,曹清河. 中国农业科技导报. 2016(03)
[3]基于转录特征的水稻WRKY转录因子功能注释[J]. 李莉云,史佳楠,杨烁,孙财强,刘国振. 遗传. 2016(02)
[4]水稻OsWRKY转录因子对非生物胁迫响应的重叠表达特性分析[J]. 孙利军,黄磊,李大勇,张慧娟,宋凤鸣. 植物生理学报. 2014(11)
[5]水稻转录因子WRKY42的转录、表达及其与W-box的结合特征分析[J]. 缪刘杨,周亮,杨烁,李莉云,李雪姣,范伟,兰金苹,史佳楠,刘丽娟,刘国振. 生物化学与生物物理进展. 2014(07)
[6]茉莉酸和真菌病原诱导的水稻WRKY30转录因子基因的分离及表达特征[J]. 彭喜旭,胡耀军,唐新科,周平兰,邓小波,王海华. 中国农业科学. 2011(12)
[7]基于抗体的水稻蛋白质组学——开端与展望[J]. 刘国振,刘斯奇,吴琳,徐宁志. 中国科学:生命科学. 2011(03)
[8]高表达水稻WRKY72基因影响拟南芥生长素信号传导[J]. 宋钰,刘冬梅,余迪求. 云南植物研究. 2008(06)
[9]水稻WRKY19基因启动子功能研究初报[J]. 郝中娜,王海华,吴学龙,郭泽建. 中国农学通报. 2007(06)
[10]OsWRKY03, a rice transcriptional activator that functions in defense signaling pathway upstream of OsNPR1[J]. Xiao Qiang LIU1,2, Xian Quan BAI1,2, Qian QIAN3, Xiu Jie WANG1, Ming Sheng CHEN1, Cheng Cai CHU1,* 1National Key Laboratory of Plant Genomics, Institute of Genetics and Developmental Biology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China 2Graduate School of the Chinese Academy of Sciences, Yuquan Road, Beijing 100039, China 3China National Rice Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Hangzhou 310006, China. Cell Research. 2005(08)
本文编号：3623382
【文章来源】：河北农业大学河北省
【文章页数】：49 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
OsWRKY68蛋白质在水稻离体叶片恒暗、恒光和H2O2（10mmol/L）处理下的表达特征
RKY68 蛋白质在水稻苗期 NaCl（200 mmol/L）和 PEG6000（20%ession profiling of rice OsWRKY68 protein at seedling stage under 20PEG6000 treatment，经 4℃、44℃和 48℃胁迫处理后，随着时间的延长，没有明显改变。水淹胁迫处理后（图 4b），OsWRKY表明，OsWRKY68 蛋白质在盐胁迫和恒暗胁迫应答过OsWRKY68+）在恒光胁迫中发挥作用。
ABA：脱落酸；ET：乙烯利；MeJA：茉莉酸甲酯；SA：水杨酸ABA: Abscisic acid; ET: Ethephon; MeJA: Methyl jasmonate; SA: Salicy图 5 水稻 OsWRKY68 蛋白质受激素处理后的表达特征Fig. 5 The expression profilling of OsWRKY68 protein were treated with hsWRKY68 RNAi 转基因株系的鉴定介导法将 OsWRKY68 基因 RNAi 质粒导入水稻受体 TP309，号为 G309-G319 和 G325-G337。对这 24 个转基因株系进行株系 G310、G316、G317、G326、G330 和 G337，将 PCR中，并通过 PCR 和 WB 技术对后代继续进行鉴定。6 个阳性株系的 T3代各 5 株转基因水稻分别进行检测，PCR317、Y326 和 Y337 中均出现了大小为 1000 bp 的条带，而在6a），表明 OsWRKY68 基因 RNAi 质粒导入成功，并且稳定遗转基因株系中 OsWRKY68 蛋白质的表达丰度均比 TP309 低性的 OsWRKY68 蛋白质下调的转基因株系即 Y316、Y317、
【参考文献】：
期刊论文
[1]水稻蛋白质样品资源库RiceS-A300的建立与应用[J]. 张剑硕,马金姣,张彤,陈悦,魏健,张柳,史佳楠,徐珊,燕高伟,杜铁民,窦世娟,李莉云,刘丽娟,刘国振. 中国农业科学. 2018(19)
[2]植物WRKY转录因子及其生物学功能研究进展[J]. 谢政文,王连军,陈锦洋,王娇,苏一钧,杨新笋,曹清河. 中国农业科技导报. 2016(03)
[3]基于转录特征的水稻WRKY转录因子功能注释[J]. 李莉云,史佳楠,杨烁,孙财强,刘国振. 遗传. 2016(02)
[4]水稻OsWRKY转录因子对非生物胁迫响应的重叠表达特性分析[J]. 孙利军,黄磊,李大勇,张慧娟,宋凤鸣. 植物生理学报. 2014(11)
[5]水稻转录因子WRKY42的转录、表达及其与W-box的结合特征分析[J]. 缪刘杨,周亮,杨烁,李莉云,李雪姣,范伟,兰金苹,史佳楠,刘丽娟,刘国振. 生物化学与生物物理进展. 2014(07)
[6]茉莉酸和真菌病原诱导的水稻WRKY30转录因子基因的分离及表达特征[J]. 彭喜旭,胡耀军,唐新科,周平兰,邓小波,王海华. 中国农业科学. 2011(12)
[7]基于抗体的水稻蛋白质组学——开端与展望[J]. 刘国振,刘斯奇,吴琳,徐宁志. 中国科学:生命科学. 2011(03)
[8]高表达水稻WRKY72基因影响拟南芥生长素信号传导[J]. 宋钰,刘冬梅,余迪求. 云南植物研究. 2008(06)
[9]水稻WRKY19基因启动子功能研究初报[J]. 郝中娜,王海华,吴学龙,郭泽建. 中国农学通报. 2007(06)
[10]OsWRKY03, a rice transcriptional activator that functions in defense signaling pathway upstream of OsNPR1[J]. Xiao Qiang LIU1,2, Xian Quan BAI1,2, Qian QIAN3, Xiu Jie WANG1, Ming Sheng CHEN1, Cheng Cai CHU1,* 1National Key Laboratory of Plant Genomics, Institute of Genetics and Developmental Biology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China 2Graduate School of the Chinese Academy of Sciences, Yuquan Road, Beijing 100039, China 3China National Rice Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Hangzhou 310006, China. Cell Research. 2005(08)
本文编号：3623382
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