乙型脑炎病毒的分离及减毒乙脑疫苗株的全长克隆构建

发布时间：2022-02-26 21:45

　　[目 的]乙型脑炎为常见的蚊媒传播人兽共患病疾病,由乙脑病毒引起;病死率高,后遗症严重,近年来乙脑流行区域呈扩散趋势,对人类健康有着严重威胁。目前尚不完全了解乙脑病毒的毒力决定因素,因此对乙脑病毒基因组及蛋白分析是十分有必要的。本研究从一位重症乙型脑炎病毒感染患者的血清及脑脊液样本中分离得到一株乙型脑炎病毒,对其全基因组序列进行分析,并对其蛋白结构和功能以及蛋白的理化性质和分子功能等方面进行预测。为方便进一步鉴定预测的毒力相关位点是否真的会对乙脑病毒的毒力产生影响,我们以减毒乙脑病毒疫苗株SA14-14-2为模板构建了乙脑病毒疫苗株的全长感染性克隆,以助于后续对乙脑全长克隆质粒进行定点突变,观察突变株与疫苗株的复制能力及毒力差异,以研究及鉴定毒力位点。[方 法]在云南省西双版纳收集得到一位乙脑感染患者血清及脑脊液,将样品接种Vero细胞分离野毒株,对其进行了病毒RNA的提取、RT-PCR、测序,拼接获得其完整序列,并通过DNAMAN和MEGA6.0软件对其全基因组核苷酸及氨基酸序列进行分析,后通过ProtParam、PSIPRED、Phyre2和SWISS-MODEL软件对NS3和NS... 

【文章来源】：昆明医科大学云南省

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
ABSTRACT
前言
材料与方法
结果
讨论
材料与方法
结果
讨论
参考文献
综述 乙型脑炎的诊断及治疗
    综述参考文献
攻读学位期间获得的学术成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]PD1+CCR2+CD8+T Cells Infiltrate the Central Nervous System during Acute Japanese Encephalitis Virus Infection[J]. Fang Zhang,Linlin Qi,Tong Li,Xiaojing Li,Dan Yang,Shengbo Cao,Jing Ye,Bin Wei.  Virologica Sinica. 2019(05)
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[3]Japanese Encephalitis Virus NS1’ Protein Antagonizes Interferon Beta Production[J]. Dengyuan Zhou,Fan Jia,Qiuyan Li,Luping Zhang,Zheng Chen,Zikai Zhao,Min Cui,Yunfeng Song,Huanchun Chen,Shengbo Cao,Jing Ye.  Virologica Sinica. 2018(06)
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本文编号：3645034