肺脏上皮细胞外泌体对BCG诱导的巨噬细胞免疫调控作用研究

发布时间：2022-10-09 15:42

　　结核病是由结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,Mtb）感染引起的一种慢性传染病。巨噬细胞是Mtb的主要靶细胞,可通过自噬、凋亡等途径清除Mtb,而Mtb也会通过多种机制逃避宿主细胞的杀伤作用。外泌体在细胞间信息交流中起着至关重要的作用,外泌体来源的因子可以直接影响基因的转录和翻译,通过影响信号传递改变蛋白修饰,调节蛋白定位和关键的酶催化反应,进而调控受体细胞的生理活动。为了探究上皮细胞来源的外泌体对BCG感染巨噬细胞后免疫反应的调控作用及机制,本研究通过提取BCG感染和未感染的上皮细胞来源的外泌体并进行鉴定,再将其作用于BCG感染的巨噬细胞,利用蛋白免疫印迹、免疫荧光、流式细胞术等技术,从形态学及分子水平对巨噬细胞炎症、凋亡及自噬进行检测,来揭示外泌体在巨噬细胞感染结核分枝杆菌中的调控作用,并且进一步用雷帕霉素（Rapamycin,rapa）来探究外泌体对自噬的调控作用是否依赖于mTOR通路。实验结果如下:1.纯化获得的上皮细胞的外泌体在透射电镜下呈圆盘状,大小在30～150nm;表达外泌体表面分子标志CD81、CD63、HSP70;DIR红色染料标记的... 

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
中英文缩略词表
第一章 文献综述
    1.1 炎症反应与结核分枝杆菌
    1.2 细胞自噬与结核分枝杆菌
    1.3 细胞凋亡与结核分枝杆菌
    1.4 外泌体
    1.5 研究目的及意义
第二章 外泌体的提取与鉴定
    2.1 实验材料
    2.2 实验步骤与方法
    2.3 结果与分析
    2.4 讨论
    2.5 小结
第三章 上皮细胞来源外泌体对BCG感染的巨噬细胞炎症反应的调控作用
    3.1 实验材料
    3.2 实验步骤与方法
    3.3 结果与分析
    3.4 讨论
    3.5 小结
第四章 上皮细胞来源外泌体对BCG感染巨噬细胞凋亡的调控作用
    4.1 实验材料
    4.2 实验步骤与方法
    4.3 结果与分析
    4.4 讨论
    4.5 小结
第五章 外泌体通过mTOR信号通路调控BCG诱导的巨噬细胞自噬
    5.1 实验材料
    5.2 实验步骤与方法
    5.3 结果与分析
    5.4 讨论
    5.5 小结
第六章 结论
    6.1 肺脏上皮细胞来源的外泌体提取成功
    6.2 上皮细胞来源的外泌体可促进BCG诱导的巨噬细胞的炎症反应
    6.3 上皮细胞来源的外泌体可促进BCG诱导的巨噬细胞的凋亡
    6.4 上皮细胞来源的外泌体可通过mTOR信号途径调控BCG感染后巨噬细胞的自噬作用
参考文献
附录
致谢
个人简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]外泌体与结核分枝杆菌相互作用的研究进展[J]. 陈偲,王建军,汤立军.  免疫学杂志. 2013(02)



本文编号：3688909