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拟南芥RBS1基因RNAi载体构建及遗传转化子的筛选

发布时间:2023-01-09 13:09
  植物通过多个基因协同作用响应活性氧的氧化胁迫.鸟苷酸解离抑制因子RBS1作为小G蛋白活性调节分子,参与了活性氧响应的生理过程,但其详细机制尚不清楚.利用RNAi技术,分别构建了以RBS1基因的特异区和保守区为靶序列的RNAi双元载体,并进行了拟南芥的遗传转化,通过除草剂抗性筛选分别获得125株及90株遗传转化株系,为运用反向遗传学的方法深入研究RBS1基因的生物学功能提供基础. 

【文章页数】:6 页

【文章目录】:
0 引言
1 材料和方法
    1.1 实验材料
    1.2 试验方法
        1.2.1 拟南芥的种植
        1.2.2 拟南芥总RNA的提取及cDNA的合成
        1.2.3 PCR产物的检测和载体的构建
        1.2.4 农杆菌介导的拟南芥遗传转化及转基因苗的筛选
2 结果与分析
    2.1 RBS1蛋白质氨基酸序列保守性分析
    2.2 RBS1基因序列特异区RNAi载体p FGC5941-RBS1S的构建
    2.3 RBS1氨基酸序列保守区RNAi载体p FGC5941-RBS1C的构建
    2.4 p FGC5941-RBS1-RNAi转基因植株的筛选
3 讨论


【参考文献】:
期刊论文
[1]拟南芥活性氧响应基因GDI功能初步分析[J]. 刘凌云,孟飒飒.  河南大学学报(自然科学版). 2013(06)



本文编号:3729241

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