核酸染色剂对DNA在琼脂糖凝胶电泳中迁移速度的影响

发布时间：2023-02-08 21:06

　　核酸染色应用在许多DNA检测相关的技术领域,然而染色剂结合DNA会造成电泳迟滞。为研究溴化乙锭(ethidium bromide,EB)和GelRed这2种核酸染色剂对DNA在琼脂糖凝胶电泳中迁移速度的影响,分别用这2种染色剂采用前、后染色的方法对DNA进行染色,以琼脂糖凝胶电泳作为检测方法,凝胶成像系统拍照观察,用Reptation理论分析数据。研究结果表明EB和GelRed染色均使DNA迁移发生了滞后,但EB对于目的基因片段大小的判读未受电泳滞后的影响,而GelRed对目的基因判读略有影响。然而,与EB相比,GelRed具有荧光效果强、安全、环保等诸多优点。总之,需要精确鉴定目的基因片段大小可以选择后染色或EB前染色,对于鉴定目的基因片段大小要求不高且需要荧光效果好、环保的染色剂可以选择GelRed。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 质粒与菌株。
        1.1.2 主要试剂。
    1.2 方法
        1.2.1 前染色1%凝胶配制。
        1.2.2 后染色。
        1.2.3 电泳。
        1.2.4 目的基因的扩增纯化。
2 结果与分析
    2.1 EB与GelRed染色特点
    2.2 EB与GelRed均使DNA产生迁移滞后
    2.3 EB与GelRed染色剂使DNA迁移滞后对目的基因判读的影响
    2.4 用Reptation理论解释EB和GelRed结合DNA对目的基因判读的影响
3 讨论



本文编号：3738372