基于杂交链式反应的DNA荧光传感器阵列的研究

发布时间：2023-03-03 21:04

　　荧光生物传感器阵列在临床疾病诊断和治疗、基因分析、环境监测等方面有较好的应用潜能,它能够经济、快速、灵敏、特异性地检测生物分子。大部分核酸分子之间的相似度较高,区分困难,是分析化学需要解决的重要问题;另外,一些荧光传感器阵列的构建过程比较复杂,耗费大量的人力和物力。针对这些问题,本论文构建了三种DNA荧光传感器阵列,运用无酶的熵驱动放大反应,实现了多类核酸类似物的有效区分,且该方法具有通用性强、灵敏度高等特点。在这些传感器阵列中,我们考察了杂交链式反应的交叉性,实现了DNA、RNA以及基因表达谱等的区分和识别。其研究内容如下:(1)DNA荧光传感器阵列在耐药基因中的应用:本章设计了一种基于交叉反应的DNA传感器阵列,利用杂交链式反应和熵驱动信号放大反应,用于6种乙肝病毒耐药基因的区分。该DNA传感器阵列具有较高的灵敏度,对耐药基因的响应范围为1 nM-20 nM。通过凝胶电泳和荧光检测,我们验证了该传感器阵列具有丰富的交叉反应性,并验证了杂交链式反应和熵驱动信号放大联用的可行性。经过对传感器阵列的优选,该DNA传感器阵列可以减少至由4组传感元件组成,但仍可以区分6种靶DNA,表明了该传...

【文章页数】：83 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第1章 绪论
    1.1 荧光分析技术
        1.1.1 荧光共振能量转移(FRET)
        1.1.2 荧光生物传感器
    1.2 杂交链式反应(HCR)
        1.2.1 杂交链式反应(HCR)的原理
        1.2.2 杂交链式反应(HCR)的应用
        1.2.3 杂交链式反应(HCR)的发展前景
    1.3 链置换技术
        1.3.1 链置换技术的机理
        1.3.2 链置换技术的应用
    1.4 传感器阵列
        1.4.1 光学传感器阵列
    1.5 选题思路及研究内容
第2章 DNA荧光传感器阵列在耐药基因中的应用
    2.1 前言
    2.2 实验部分
        2.2.1 仪器与试剂
        2.2.2 荧光检测
        2.2.3 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
    2.3 结论与讨论
        2.3.1 基于交叉反应的DNA传感器阵列
        2.3.2 传感器阵列的优选
        2.3.3 传感器阵列对两种不同比率靶DNA混合液的区分和识别
        2.3.4 传感器阵列对不同浓度YMDD的区分和识别
        2.3.5 复杂体系中靶DNA的区分和识别
    2.4 小结
第3章 DNA荧光传感器阵列在RNA中的应用
    3.1 前言
    3.2 实验部分
        3.2.1 仪器与试剂
        3.2.2 荧光检测
        3.2.3 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
    3.3 结论与讨论
        3.3.1 基于交叉反应的DNA传感器阵列
        3.3.2 传感器阵列对两种不同比率靶RNA混合液的区分和识别
        3.3.3 传感器阵列对不同浓度Let-7c的区分和识别
        3.3.4 复杂体系中靶RNA的区分
        3.3.5 靶RNA基因表达谱的区分和识别
    3.4 小结
第4章 基于协同杂交的多维荧光传感器阵列的应用
    4.1 前言
    4.2 实验部分
        4.2.1 仪器与试剂
        4.2.2 荧光检测
        4.2.3 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
    4.3 结论与讨论
        4.3.1 基于交叉反应的DNA传感器阵列
        4.3.2 杂交链式反应的正交性
    4.4 小结
结论
参考文献
致谢
个人简历及在校期间发表的论文



本文编号：3753106