dNTP水解酶SAMHD1蛋白的乙酰化修饰调控及其对DNA损伤修复反应的影响

发布时间：2023-08-29 22:27

　　目的:在生命进程中,细胞稳态时刻承受着来自机体内外有害因素、遗传因素和病理因素的威胁,从而引发DNA损伤,导致基因组完整性和稳定性“平衡失调”。生命个体在发展进程中获得了一系列包括DNA损伤修复反应(DNA damage response,DDR)、细胞周期检查点、细胞凋亡与坏死、细胞衰老与细胞自噬等细胞稳态维护机制,承担着维持细胞稳态的重要使命。DNA损伤修复反应体系的“动态平衡”是维系基因组完整性和稳定性的重要保障,其“平衡失调”将导致疾病的发生。近年研究发现,蛋白质的翻译后修饰能够调控DNA损伤修复反应从而影响基因组的完整性和稳定性。蛋白质的翻译后修饰有多种方式,主要包括甲基化、糖基化、乙酰化、磷酸化等。探索蛋白质的翻译后修饰对DNA损伤修复反应的调控是该领域目前研究的热点。SAMHD1基因最初在人树突状细胞的cDNA文库中被发现,其蛋白质结构包括SAM结构域和HD结构域。近几年关于SAMHD1研究的热点主要在其抗病毒感染功能上。SAMHD1是目前在真核细胞中发现的第一个脱氧核糖核苷三磷酸水解酶(dNTPase),可将细胞内的脱氧核糖核苷三磷酸(dNTP)水解为核苷和三磷酸,在调...

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语
1前言
2 材料与方法
    2.1 主要试剂和仪器
        2.1.1 细胞及相关质粒
        2.1.2 实验试剂及培养基
        2.1.3 常用抗体
        2.1.4 设备及仪器
    2.2 主要实验方法
        2.2.1 重组质粒构建
        2.2.2 突变质粒构建
        2.2.3 脂质体转染法转染
        2.2.4 稳转细胞系构建
        2.2.5 蛋白质免疫印迹
        2.2.6 免疫共沉淀
        2.2.7 蛋白质体外结合实验
        2.2.8 免疫荧光实验
3 结果
    3.1 SAMHD1是可以被乙酰化修饰的,其乙酰基转移酶是GCN
        3.1.1 SAMHD1蛋白可被乙酰化修饰
        3.1.2 SAMHD1 的乙酰基转移酶是GCN
        3.1.3 DNA损伤压力下,SAMHD1 的乙酰化修饰水平降低
    3.2 SAMHD1蛋白的乙酰化修饰影响其磷酸化修饰及DNA损伤修复
        3.2.1 HDAC抑制剂影响SAMHD1的磷酸化修饰
        3.2.2 SAMHD1的乙酰化位点突变影响其磷酸化修饰和DNA损伤修复
    3.3 去乙酰化酶SIRT2调控SAMHD1蛋白的乙酰化修饰
        3.3.1 体内SIRT2与SAMHD1结合
        3.3.2 体外SIRT2与SAMHD1直接结合
        3.3.3 DNA损伤压力下,SIRT2与SAMHD1 结合增强
        3.3.4 SIRT2 特异性抑制剂AGK2 影响SAMHD1 的磷酸化修饰
        3.3.5 DNA损伤压力下,沉默SIRT2 抑制DNA损伤修复
        3.3.6 DNA损伤压力下,过表达SIRT2 促进DNA损伤修复
4 讨论
5 结论
本研究创新性自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3844406