小鼠支气管肺泡干细胞的分离、鉴定与三维培养体系的构建
发布时间:2024-02-23 17:47
目的:探讨C57BL6小鼠支气管肺泡干细胞(BASCSs)体外分离、鉴定及其三维培养体系的构建方法,为进一步研究BASCSs的相关特性奠定实验基础。方法:选用C57BL6成年雄鼠,完整分离肺组织,1×PBS灌洗后,经支气管分次灌注Elastase酶进行消化,以锐器切碎肺组织,加入DNA酶使细胞更好地分散开。用75μm细胞筛去除未消化的组织块,所得细胞悬液以荧光标记的CD31、CD34、CD45、SCA-1、 EpCAM抗体染色,流式细胞仪分选CD31-CD34-CD45-SCA-1+EpCAM+细胞,细胞与Mlg2908细胞(小鼠肺成纤维细胞株)按(1×103)∶(1×106)的比例混合,以Matrigel为基质构建三维培养体系。结果:通过Elastase酶消化肺组织,每只成年小鼠可得到有核细胞总数(1.6~1.8)×107个,流式细胞技术结果显示,CD34- CD45-
【文章页数】:4 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.2 实验方法
1.2.1 小鼠支气管干细胞的体外分离与鉴定[11-15]
1.2.2 小鼠支气管干细胞的三维培养[12,16-17]
2 结果
2.1 BASCs分离结果
2.2 支气管肺泡干细胞培养结果
3 讨论
3.1 关于消化方法的选择
3.2 细胞分离技巧
3.3 关于红细胞的去除
3.4 细胞三维培养技巧
本文编号:3907735
【文章页数】:4 页
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1 材料与方法
1.1 实验材料
1.2 实验方法
1.2.1 小鼠支气管干细胞的体外分离与鉴定[11-15]
1.2.2 小鼠支气管干细胞的三维培养[12,16-17]
2 结果
2.1 BASCs分离结果
2.2 支气管肺泡干细胞培养结果
3 讨论
3.1 关于消化方法的选择
3.2 细胞分离技巧
3.3 关于红细胞的去除
3.4 细胞三维培养技巧
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