家蚕自噬受体蛋白p62及Ref(2)P的核质穿梭和翻译后修饰研究

发布时间：2024-06-28 20:41

　　家蚕p62蛋白(又名sequestosome-1,SilkDB:BGIBMGA002620-PA)具有多个功能结构域,在细胞自噬、凋亡等生命过程中起着十分重要的作用。家蚕p62的一个旁系同源蛋白(paralog)Ref(2)P比p62缺少一个PB1结构域,其他结构域完全相同。本论文主要研究了家蚕p62及Ref(2)P蛋白的核质穿梭特性及对BmNPV多角体蛋白亚细胞定位的影响,初步探讨了病毒与宿主之间的“博弈”关系。主要结果如下:1.家蚕自噬受体蛋白p62及Ref(2)P核质穿梭特性分析⑴参考人类p62蛋白的核质穿梭特性,构建eGFP与p62、Ref(2)P的融合表达载体,转染BmN细胞后,激光共聚焦显微镜分析发现p62和Ref(2)P在细胞质中呈斑点状分布;加入出核转运抑制剂来普霉素B(Leptomycin B,LMB),p62及Ref(2)P被转运到细胞核内。这些结果表明家蚕p62和Ref(2)P蛋白是CRM1依赖的核质穿梭蛋白。另外,p62(K8A/D59A)入核时间远快于野生型p62蛋白,表明PB1结构域对p62蛋白滞留在细胞质中起到重要作用。⑵以结构相对简单的Ref(2)P为研...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.1核孔复合体的结构特征

图1.1核孔复合体的结构特征[19]Figure1.1Structuralcharacteristicsofthenuclearporecomplex1.1.2.2核定位信号序列和出核信号序列核定位信号序列（nuclearlocalizationsign....

图1.2蛋白质的核质转运过程简化图

家蚕自噬受体蛋白p62及Ref(2)P的核质穿梭和翻译后修饰研究节复合物通过NPC，当复合物运送到细胞核后，RanGTP与Importin-β结合并改变其构象，解离复合物，将货物蛋白释放到细胞核中（图1.2a）[41]。另一种是含有非典型NLS的蛋白质，可以与....

图1.3p62的结构域及相互作用蛋白[62]

家蚕自噬受体蛋白p62及Ref(2)P的核质穿梭和翻译后修饰研究身通过PB1结构域相互作用，形成二聚体，进而促进自噬[59]。LIR基序可以促进p62蛋白分子与LC3的结合，从而有利于蛋白质通过自噬途径降解[60]。UBA结构域有利于p62与被泛素化链标....

图1.4p62在DNA损伤修复中的图示

江苏大学硕士学位论文蛋白进行修复[70]，p62蛋白入核后，能与DNA修复相关蛋白形成聚集体，包括FLNA和RAD51，进而直接在细胞核内通过泛素-蛋白酶体途径降解聚集体，导致DNA损伤修复的效率降低。因此细胞核内p62蛋白的水平会影响DNA损伤修复的效率。....

本文编号：3996655