一个来源于稻平脐蠕孢的α-阿拉伯呋喃糖苷酶

发布时间：2024-07-06 04:23

　　旨在获得能降解玉米糠木聚糖的阿拉伯呋喃糖苷酶,并对其进行异源表达和酶学性质分析。稻平脐蠕孢(Bipolaris oryzae)是重要的植物病原菌,它编码、分泌糖苷水解酶降解植物的木质纤维素利于侵袭感染。从稻平脐蠕孢中克隆得到一个新的GH43家族阿拉伯呋喃糖苷酶基因BoAra43A并将其在大肠杆菌中成功表达。分析发现重组酶BoAra43A的最适温度为50℃,在40℃处理2 h后活力还剩90.6%活性;最适pH为5.0,在pH 3.0-9.0比较稳定,可保持80%以上的酶活力。BoAra43A可降解富含侧链的异质性木聚糖如小麦阿拉伯木聚糖(WAX)、玉米糠(CX)及其碱提物(CX-NaOH)和寡糖如A^2,3XX、XA^2,3XX、AA^2,3AA/AAA³A中的阿拉伯糖,推断其能降解阿拉伯糖双取代的木聚糖中α-(1→3)连接的阿拉伯糖。PsAra43A是来源于Paenibacillus sp.E18的GH43阿拉伯呋喃糖苷酶,降解异质性木聚糖上的单取代阿拉伯糖侧链。使用BoAra43A预先处理CX、再和阿拉...

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图1BoAra43A和特异腐质霉阿拉伯呋喃糖苷酶HiAXHd3的氨基酸序列比对

2.4BoAra43A的作用模式分析图2重组蛋白BoAra43A的纯化

图2重组蛋白BoAra43A的纯化

图1BoAra43A和特异腐质霉阿拉伯呋喃糖苷酶HiAXHd3的氨基酸序列比对图3离子色谱分析BoAra43A降解多糖的反应产物

图3离子色谱分析BoAra43A降解多糖的反应产物

图2重组蛋白BoAra43A的纯化图4温度及pH对BoAra43A的影响测定

图4温度及pH对BoAra43A的影响测定

图3离子色谱分析BoAra43A降解多糖的反应产物从上述对多糖的离子色谱分析表明,BoAra43A特异的从多糖中释放出阿拉伯糖。为了进一步分析其作用模式,选取了9种含阿拉伯糖的寡糖作为底物同BoAra43A进行孵育,并以离子色谱进行分析(图5)。表2是这9种含阿拉伯糖的寡糖的结....

本文编号：4002058