一株晚花和镉敏感拟南芥突变体的分离与鉴定

发布时间：2025-01-15 16:24

　　 为了进一步挖掘拟南芥响应Cd胁迫的分子机制,从化学诱导型拟南芥突变体库(约6 000株系)中筛选获得Cd敏感突变体,通过测量经Cd处理后拟南芥植株的根长变化获得Cd响应突株系,然后单株收种并鉴定,最终获得一株对Cd胁迫敏感的突变体。Thermal asymmetric interlaced-PCR(TAIL-PCR)发现这株突变体T-DNA的插入定位于基因At1g35820和At1g35830之间。进一步分析表明这个突变体也是FLC(Flowering locus C)依赖的晚花突变体,将这株突变体命名为fcr(flowering and cadmium related gene)。FLC在拟南芥开花调控网络中起枢纽作用,并且是开花正调控基因Suppressor of overexpression of co 1 (SOCI)的抑制因子。在该突变体中FLC的表达明显高于野生型植株,而FLC下游基因SOCI的表达明显低于野生型植株,但FLC上游基因的表达变化不明显。进一步实验发现,突变体fcr中调节环境因素和春化作用的基因High expression of osmotically re...

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【部分图文】：

图1 不同浓度CdCl2对拟南芥Col-0根长的影响

5′-GTGCGGTCCTTGTCAGTGTCT-3′2结果

图2 fcr突变体的表型及其T-DNA插入位点

Cd胁迫可延缓根的生长并诱导叶的褪绿病(图1B),根生长随培养基中Cd浓度的增加而显著减缓(图1A)。在90μmol/LCdCl2下,植株生长部分受阻,但仍可观察到生长。因此选择含90μmol/LCdCl2作为Cd的处理浓度。2.2突变体筛选及fcr突变体的表型

图3 相关基因在野生型和fcr突变体中表达量的比较

通过TAIL-PCR扩增T-DNA侧翼序列,并在TAIR数据库中进行BLAST发现,突变体fcr的T-DNA插入在At1g35820和At1g35830之间(图2E)。通过RT-PCR检测T-DNA插入片段附近基因At1g35820,At1g35830和At1g35840的表达模....

图4 fcr突变体中调节响应Cd胁迫和开花时间的可能机制

重金属可能对动植物产生毒害。然而植物如何识别和抵御重金属毒性的潜在分子机制尚未全部发掘[22]。通过对Cd敏感突变体的研究发现,植物可通过多种分子机制来应对重金属胁迫[23],但很少有Cd敏感的拟南芥突变体报道。本研究通过筛选对Cd响应的拟南芥突变体,获得了一个突变体,表现出Cd....

本文编号：4027558