钙离子调控50Hz工频磁场诱导FL细胞鞘氨醇激酶1活化的机制研究
发布时间:2022-02-13 04:37
电力业的发展导致50 Hz工频磁场(magnetic field,MF)广泛存在于人们的生活和工作环境中。研究表明,暴露于50 Hz工频磁场会产生许多潜在的健康风险。2002年,国际癌症研究署(IARC)甚至将极低频电磁场(extremely low frequency electromagnetic fields,ELF-EMF)列为“可疑致癌物”(2B)。然而,到目前为止,ELF-EMF的生物学效应及其机制尚不明确。鞘脂类物质代谢在细胞的生命活动中发挥重要作用。本课题组前期研究发现,鞘氨醇激酶(Sphingosine kinase,SK)参与介导 50 Hz MF(magnetic field)诱导的人羊膜上皮(human amnion epithelial,FL)细胞的增殖效应,但工频磁场通过何种途径活化SK1尚不清楚。相关研究表明,细胞内ERK(extracellular regulated protein kinase),Ca2+,PKCα(protein kinase C α)以及 Akt(protein kinase B)等信号分子不仅可以响应MF暴露,而且与SK1的活化...
【文章来源】:浙江大学浙江省211工程院校985工程院校教育部直属院校
【文章页数】:75 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图1.1鞘脂类物质合成和代谢通路1211??
称取90.885?8丁148七35H苡冢矗癌枺保保保比ダ胱铀??门ǎ?蓿钡髭啵保粗粒福?福?崳?定容至500?ml,?4°C保存。??2.6工频磁场辐照系统??实验中使用的暴露系统(sXc-ELF)由放置在培养箱内的两个辐照腔(图2.1?A)??和一个外部控制系统(图2.1?B)组成。每个辐照腔由一组Helmholtz线圈组成,??受控的电流向线圈提供50?Hz正弦交变电流。其中一个辐照腔的线圈同相连接,??产生加强磁场,用于磁场暴露组;另一个辐照腔的线圈反相连接,产生对消磁场,??用于假辐照组。辐照腔的线圈放置在钼金属盒内,以屏蔽外界的电磁场。钼金属??盒壁底部安装两只风扇,以确保辐照腔内的温湿度及C02浓度与外界(孵箱内)??一致。线圈中的电流是由计算机软件控制,磁场强度在0.04-3.55?mT范围内连续??可调。辐照腔内磁场分布的非均一性<1%;假辐照磁场隔离率>43?dB;寄生电场??<1?V/m。实验开始前2小时打开辐照系统,以确保辐照系统各向参数的稳定。实??验过程中
实验结果??.1?Ca2+参与调控工频磁场诱导的FL细胞增殖??我们前期研究发现50?Hz?MF通过活化SKI促进FL细胞增殖,另有文献胞内Ca2+浓度与SK1的活化相关。为探索Ca2+是否参与50?Hz?MF诱导的殖效应,我们首先采用免疫焚光的方法检测MF分别暴露5?min,?10?min,?15?miin,?60?min后细胞内的Ca-—浓度水平。结果显示,MF分别暴露5?min.?10?min胞内Ca2—浓度明显升高;但MF暴露15?min,?30?min,?60?min后,细胞内度不再升高(图4.1?A),表明Ca2+是FL细胞对MF影响的早期效应分子。析了以细胞内Ca2+螯合剂BAPTA处理对细胞增殖的影响,结果发现BAPT效抑制MF诱导的FL细胞增殖(图4.1?B),提示Ca2+参与调控MF诱导胞增殖效应。??A?2-°-—B
【参考文献】:
期刊论文
[1]Sphingosine kinase 1 is upregulated with lysophosphatidic acid receptor 2 in human colorectal cancer[J]. Dai Shida,Satoru Inoue,Yuki Yoshida,Atsushi Kodaka,Tsutomu Tsuji,Makoto Tsuiji. World Journal of Gastroenterology. 2016(08)
[2]脂筏在工频磁场诱导受体聚簇效应中的作用及机制初探[J]. 王勇,陈苘,鲁德强,许正平,姜槐,孙文均. 浙江大学学报(医学版). 2008(01)
本文编号:3622691
【文章来源】:浙江大学浙江省211工程院校985工程院校教育部直属院校
【文章页数】:75 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图1.1鞘脂类物质合成和代谢通路1211??
称取90.885?8丁148七35H苡冢矗癌枺保保保比ダ胱铀??门ǎ?蓿钡髭啵保粗粒福?福?崳?定容至500?ml,?4°C保存。??2.6工频磁场辐照系统??实验中使用的暴露系统(sXc-ELF)由放置在培养箱内的两个辐照腔(图2.1?A)??和一个外部控制系统(图2.1?B)组成。每个辐照腔由一组Helmholtz线圈组成,??受控的电流向线圈提供50?Hz正弦交变电流。其中一个辐照腔的线圈同相连接,??产生加强磁场,用于磁场暴露组;另一个辐照腔的线圈反相连接,产生对消磁场,??用于假辐照组。辐照腔的线圈放置在钼金属盒内,以屏蔽外界的电磁场。钼金属??盒壁底部安装两只风扇,以确保辐照腔内的温湿度及C02浓度与外界(孵箱内)??一致。线圈中的电流是由计算机软件控制,磁场强度在0.04-3.55?mT范围内连续??可调。辐照腔内磁场分布的非均一性<1%;假辐照磁场隔离率>43?dB;寄生电场??<1?V/m。实验开始前2小时打开辐照系统,以确保辐照系统各向参数的稳定。实??验过程中
实验结果??.1?Ca2+参与调控工频磁场诱导的FL细胞增殖??我们前期研究发现50?Hz?MF通过活化SKI促进FL细胞增殖,另有文献胞内Ca2+浓度与SK1的活化相关。为探索Ca2+是否参与50?Hz?MF诱导的殖效应,我们首先采用免疫焚光的方法检测MF分别暴露5?min,?10?min,?15?miin,?60?min后细胞内的Ca-—浓度水平。结果显示,MF分别暴露5?min.?10?min胞内Ca2—浓度明显升高;但MF暴露15?min,?30?min,?60?min后,细胞内度不再升高(图4.1?A),表明Ca2+是FL细胞对MF影响的早期效应分子。析了以细胞内Ca2+螯合剂BAPTA处理对细胞增殖的影响,结果发现BAPT效抑制MF诱导的FL细胞增殖(图4.1?B),提示Ca2+参与调控MF诱导胞增殖效应。??A?2-°-—B
【参考文献】:
期刊论文
[1]Sphingosine kinase 1 is upregulated with lysophosphatidic acid receptor 2 in human colorectal cancer[J]. Dai Shida,Satoru Inoue,Yuki Yoshida,Atsushi Kodaka,Tsutomu Tsuji,Makoto Tsuiji. World Journal of Gastroenterology. 2016(08)
[2]脂筏在工频磁场诱导受体聚簇效应中的作用及机制初探[J]. 王勇,陈苘,鲁德强,许正平,姜槐,孙文均. 浙江大学学报(医学版). 2008(01)
本文编号:3622691
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