无纤维素酶系果胶酶产生菌的筛选鉴定及产酶条件的研究
本文关键词:无纤维素酶系果胶酶产生菌的筛选鉴定及产酶条件的研究
【摘要】:伴随着科技的进步与人们环保意识的提高,果胶酶凭借其自身优势在食品、药品、造纸和纺织等领域发挥重要作用,果胶酶的需求量持续上升。但是,目前国内的果胶酶产生力不足,酶活力不高,整体质量偏低,市场呈现供不应求的状况。所以筛选出一株高效高活性的果胶酶产生菌显得尤为重要,发酵条件也亟待优化。本研究采用平板分离结合刚果红染色法从野生苎麻土壤中,分离得到1株的果胶酶产生菌LYS-5304。经形态观察和16S rRNA测序鉴定,该菌株鉴定为欧文氏菌(Erwinia amylovora)。通过单因素实验和响应曲面法分析,该菌产果胶酶的最优条件为:葡萄糖3.0%,菜籽粕0.2%,接种量1.5%,培养基初始pH 8.0,摇床转速180 r/min,发酵周期为4 d,培养温度为37℃.在此条件下,该菌的果胶酶活力达到1021.33U/mL,具有一定应用潜力。酶学特性的试验结果表明,该酶的最适反应pH范围在8-9之间,属于碱性果胶酶。酶的最适反应温度为50℃,反应最佳的时间为30min,金属离子中Cu2+和Ca2+对酶蛋白有激活作用。同时,该菌株在保持较高降解果胶能力的基础上,并不具备纤维素酶活力,这对于纺织业中苎麻脱胶有着极为重要意义,因为它不仅可以完成传统的脱胶工作,并且还能不破坏苎麻中的纤维成分,保持纤维的柔韧性,因此具有较大的研发推广价值,可以考虑进一步深入研究。
【学位授予单位】:湖南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:Q936
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,本文编号:1213030
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