LncRNA SNHG20通过抑制c-Fos转录调控认知功能

发布时间：2021-01-17 05:22

　　目的研究lncRNA SNHG20在神经元活化过程中的作用。方法通过对KCl激活的神经元数据库进行分析,筛选出变化明显的lncRNA;使用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）对在体外培养的KCl活化的神经元以及学习记忆模式刺激的实验动物的海马脑区进行结果验证;RT-qPCR以及Western blot检测过表达SNHG20的神经元中相关基因的表达;使用4-Thiouridine（4sU）标记新生成的RNA并通过RT-qPCR检测新生成的c-Fos mRNA水平;海马脑区AAV病毒脑注射后,对小鼠进行相关的行为学检测。结果 SNHG20的表达水平在神经元活化后快速并且明显下降。SNHG20过表达后,抑制了早期响应基因c-Fos的RNA以及蛋白质水平,且新生成的c-Fos的mRNA水平较对照组明显下降。SNHG20也抑制了c-Fos通路下游靶基因,特别是Annexin A2（ANXA2）的水平。在体的海马脑区SNHG20过表达的小鼠表现出明显的学习记忆功能障碍。结论 SNHG20能够通过抑制c-Fos的表达参与调控学习记忆过程。 

【文章来源】：中国药理学通报. 2020,36(11)北大核心

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 原代神经元的培养
    1.2 RNA提取和RT-qPCR
    1.3 蛋白质免疫印迹分析
    1.4 质粒构建
    1.5 慢病毒制取
    1.6 AAV病毒制取及海马注射
    1.7 4-Thiouridine pulldown
    1.8 行为学实验
    1.9 统计学方法
2 结果
    2.1 神经元活化后SNHG20明显下调
    2.2 SNHG20通过抑制c-Fos的转录影响c-Fos的水平
    2.3 SNHG20抑制c-Fos下游基因表达
    2.4 SNHG20损伤小鼠的学习记忆功能
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]钙信号在糖尿病周围神经病变中感觉神经元和神经胶质细胞功能异常的研究进展[J]. 薛芸,梁尚栋.  中国药理学通报. 2017(03)



本文编号：2982283