几种生物活性物质荧光探针的合成及应用
发布时间：2021-03-12 22:43
小分子荧光探针因结构可调控、特异性好、毒性小和可视化检测等独特的性能,已广泛应用于生物学、医学、药理学和环境科学等各个领域。目前,已报道了各种荧光探针用于生物学或环境科学中某些物质的检测。但是,在复杂的生物系统中,基于单个发射波长荧光强度信号的测量容易受到探针浓度、固有荧光、仪器和环境因素的影响,从而导致定量分析不准确;生物体系中不可避免的自吸收和自发荧光,使短波长发射的荧光探针不适合在组织和活体中进行深层成像,从而限制了它们在生物系统中的进一步应用。因此,本文通过设计比率或近红外（640-900 nm）的荧光探针,最大程度上减小自发荧光、自吸收等背景干扰,以实现复杂生物样品中活性物质的检测,并分别以常见生物活性物质碱性磷酸酶（ALP）、过氧化氢（H2O2）和半胱氨酸（Cys）为研究对象,设计合成了三种不同类型的荧光探针,具体内容如下:（1）基于ALP可催化水解各种底物上磷酸基团的特异性,设计合成了一种可见光发射的比率型荧光探针2,4-双（苯并[d]噻唑-2-基）苯基磷酸二氢盐（PDP）用于ALP检测。当加入ALP溶液时,PDP分子中的磷酸基...
【文章来源】：湖南师范大学湖南省 211工程院校
【文章页数】：137 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
1.1 引言
1.2 小分子荧光探针
1.3 小分子荧光探针的响应机制
1.4 小分子荧光探针的分类
1.4.1 紫外-可见光激发/发射小分子荧光探针
1.4.2 可见光激发/近红外发射小分子荧光探针
1.4.3 近红外激发/发射小分子荧光探针
1.5 小分子荧光探针在生物活性物质检测中的应用
1.5.1 碱性磷酸酶荧光探针的研究进展
1.5.2 过氧化氢荧光探针研究进展
1.5.3 半胱氨酸荧光探针的研究进展
1.6 本论文构思
第二章 一种可见光发射的比率型荧光探针用于碱性磷酸酶的检测
2.1 引言
2.2 实验部分
2.2.1 仪器与试剂
2.2.2 探针PDP的合成及表征
2.2.3 分析液的配置与检测
2.2.4 血清中ALP的检测
2.3 结果与讨论
2.3.1 探针的光谱性质及可行性研究
2.3.2 检测机理研究
2.3.3 检测条件优化
2.3.4 探针对ALP响应性能
2.3.5 酶动力学考察
2.3.6 选择性考察
2.3.7 ALP抑制剂考察
2.3.8 实际样品检测
2.4 本章小结
第三章 一种近红外发射的荧光探针用于细胞及斑马鱼中过氧化氢的成像
3.1 引言
3.2 实验部分
3.2.1 试剂与仪器
3.2.2 探针DRP-B的合成及表征
3.2.3 样品的配置与检测
3.2.4 细胞毒性实验
3.2.5 细胞培养和荧光成像
3.2.6 斑马鱼荧光成像
3.3 结果与讨论
3.3.1 探针的光谱性质及可行性研究
3.3.2 探针对H2O2检测机理
3.3.3 检测条件优化
3.3.4 探针对H2O2的响应性能
3.3.5 选择性考察
3.3.6 活细胞荧光成像
3.3.7 斑马鱼的荧光成像
3.4 本章小结
第四章 一种近红外激发/发射的荧光探针用于细胞和斑马鱼中半胱氨酸的成像
4.1 引言
4.2 实验部分
4.2.1 试剂与仪器
4.2.2 探针DXM的合成与表征
4.2.3 检测溶液的配置与检测
4.2.4 血清中Cys的检测
4.2.5 细胞毒性实验
4.2.6 细胞培养和荧光成像
4.2.7 斑马鱼荧光成像
4.3 结果与讨论
4.3.1 探针的光谱性质和可行性研究
4.3.2 探针对Cys检测机理
4.3.3 检测条件优化
4.3.4 探针对Cys的响应性能
4.3.5 选择性考察
4.3.6 实际样品检测
4.3.7 活细胞荧光成像
4.3.8 斑马鱼的荧光成像
4.4 本章小结
第五章 结语
5.1 结论
5.2 展望
参考文献
附录
附录1 攻读硕士学位期间发表的学术论文
附录2 常用缩写一览表
附录3 表格和相关化合物的图谱
致谢
本文编号：3079113
【文章来源】：湖南师范大学湖南省 211工程院校
【文章页数】：137 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
1.1 引言
1.2 小分子荧光探针
1.3 小分子荧光探针的响应机制
1.4 小分子荧光探针的分类
1.4.1 紫外-可见光激发/发射小分子荧光探针
1.4.2 可见光激发/近红外发射小分子荧光探针
1.4.3 近红外激发/发射小分子荧光探针
1.5 小分子荧光探针在生物活性物质检测中的应用
1.5.1 碱性磷酸酶荧光探针的研究进展
1.5.2 过氧化氢荧光探针研究进展
1.5.3 半胱氨酸荧光探针的研究进展
1.6 本论文构思
第二章 一种可见光发射的比率型荧光探针用于碱性磷酸酶的检测
2.1 引言
2.2 实验部分
2.2.1 仪器与试剂
2.2.2 探针PDP的合成及表征
2.2.3 分析液的配置与检测
2.2.4 血清中ALP的检测
2.3 结果与讨论
2.3.1 探针的光谱性质及可行性研究
2.3.2 检测机理研究
2.3.3 检测条件优化
2.3.4 探针对ALP响应性能
2.3.5 酶动力学考察
2.3.6 选择性考察
2.3.7 ALP抑制剂考察
2.3.8 实际样品检测
2.4 本章小结
第三章 一种近红外发射的荧光探针用于细胞及斑马鱼中过氧化氢的成像
3.1 引言
3.2 实验部分
3.2.1 试剂与仪器
3.2.2 探针DRP-B的合成及表征
3.2.3 样品的配置与检测
3.2.4 细胞毒性实验
3.2.5 细胞培养和荧光成像
3.2.6 斑马鱼荧光成像
3.3 结果与讨论
3.3.1 探针的光谱性质及可行性研究
3.3.2 探针对H2O2检测机理
3.3.3 检测条件优化
3.3.4 探针对H2O2的响应性能
3.3.5 选择性考察
3.3.6 活细胞荧光成像
3.3.7 斑马鱼的荧光成像
3.4 本章小结
第四章 一种近红外激发/发射的荧光探针用于细胞和斑马鱼中半胱氨酸的成像
4.1 引言
4.2 实验部分
4.2.1 试剂与仪器
4.2.2 探针DXM的合成与表征
4.2.3 检测溶液的配置与检测
4.2.4 血清中Cys的检测
4.2.5 细胞毒性实验
4.2.6 细胞培养和荧光成像
4.2.7 斑马鱼荧光成像
4.3 结果与讨论
4.3.1 探针的光谱性质和可行性研究
4.3.2 探针对Cys检测机理
4.3.3 检测条件优化
4.3.4 探针对Cys的响应性能
4.3.5 选择性考察
4.3.6 实际样品检测
4.3.7 活细胞荧光成像
4.3.8 斑马鱼的荧光成像
4.4 本章小结
第五章 结语
5.1 结论
5.2 展望
参考文献
附录
附录1 攻读硕士学位期间发表的学术论文
附录2 常用缩写一览表
附录3 表格和相关化合物的图谱
致谢
本文编号：3079113
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