燃料油水溶液及溢油分散剂对牙鲆幼鱼的细胞毒性及DNA损伤

发布时间：2017-04-21 08:15

  本文关键词：燃料油水溶液及溢油分散剂对牙鲆幼鱼的细胞毒性及DNA损伤，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：海洋溢油污染是当前世界各国普遍关注的环境问题之一,本文在实验室条件下对180CST燃料油成分进行了测定,将牙鲆(Paralichthys olivaceus)幼鱼置于不同浓度燃料油水溶液、溢油分散剂和燃料油-溢油分散剂混合溶液中,在暴露第0、3、7、15 d取样,15d暴露实验后进行6d的恢复实验,取样,研究燃料油及溢油分散剂暴露对牙鲆幼鱼肝脏和鳃组织中抗氧化酶活性、脂质过氧化水平(Lipid peroxidation, LPO)、血细胞溶酶体膜的稳定性的影响以及暴露第15 d与恢复第6d对牙鲆幼鱼血细胞造成的DNA损伤,以探讨燃料油、溢油分散剂对牙鲆的毒性效应以及溢油分散剂的使用是否会降低燃料油对牙鲆的损伤。抗氧化酶包括超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase, CAT)、过氧化物酶(Peroxidase,POD)、谷胱甘肽转硫酶(Glutathione S-transferase, GST),脂质过氧化水平和溶酶体膜稳定性分别通过测定组织中丙二醛(Malondialdehyde, MDA)含量和血细胞中性红保留时间(Neutra red retention time, NRRT)来判定。结果如下：1.180CST燃料油成分的测定180CST燃料油主要正构烷烃含量为83.46%,主要多环芳烃含量为4.35%。2.燃料油水溶液对牙鲆幼鱼的细胞毒性及DNA损伤牙鲆幼鱼抗氧化酶活性及脂质过氧化水平对不同浓度燃料油暴露的响应存在明显的组织差异,且同一种酶活性在不同的时间对燃料油暴露的响应也不同,基于整合生物标志物法评价燃料油水溶液对牙鲆的毒性效应,结果表明随着燃料油水溶液浓度增大,牙鲆幼鱼受到的影响增大：血细胞溶酶体稳定性随着燃料油水溶液浓度增大降低(P0.05),解除污染后低(0.001mg/L)浓度组中性红保留时间略低于对照组且与对照组无显著差异(P0.05),中(0.010mg/L)、高(0.100mg/L)浓度组仍显著低于对照组(P0.05)；当燃料油水浓度为0.001mg/L时即可对牙鲆血细胞造成明显DNA损伤,暴露第15d,低浓度组和中浓度组血细胞DNA损伤为中度损伤,高浓度组为重度损伤,恢复6d后,低浓度组和中浓度组组恢复至轻度损伤,高浓度组恢复至中度损伤。3.溢油分散剂对牙鲆幼鱼的细胞毒性及DNA损伤牙鲆幼鱼抗氧化酶活性及脂质过氧化水平对不同浓度燃料油暴露的响应存在明显的组织差异,基于整合生物标志物法评价溢油分散剂及燃料油对牙鲆幼鱼毒性效应,结果表明燃料油水溶液对牙鲆幼鱼影响最大；溢油分散剂对牙鲆幼鱼有一定的细胞毒性,降低血细胞溶酶体膜稳定性,但毒性远小于燃料油本身,向燃料油水溶液中加入溢油分散剂会在一定程度上减小燃料油对牙鲆的细胞毒性。溢油分散剂能够减小燃料油对牙鲆幼鱼造成的DNA损伤,但有可能影响牙鲆幼鱼DNA自身的修复功能。
【关键词】：燃料油 溢油分散剂 牙鲆幼鱼 抗氧化酶 脂质过氧化 溶酶体膜稳定性 DNA损伤
【学位授予单位】：中国海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：X55;S917.4
【目录】：

• 摘要5-7
• abstract7-11
• 1 绪论11-22
• 1.1 研究背景11-14
• 1.1.1 海洋溢油污染的现状11-12
• 1.1.2 海洋溢油污染的危害12-13
• 1.1.3 溢油分散剂的发展历史及作用机理13-14
• 1.2 研究现状14-18
• 1.2.1 溢油污染对海洋生物毒性的研究现状14-17
• 1.2.2 溢油分散剂对海洋生物影响的研究现状17-18
• 1.3 整合生物标志物法概述18-19
• 1.4 研究目的、意义、内容和技术路线19-20
• 1.4.1 研究目的与意义19
• 1.4.2 研究内容19-20
• 1.4.3 技术路线20
• 1.5 受试生物概述20-22
• 2 180CST燃料油成分的测定22-27
• 2.1 材料与方法22-23
• 2.2 样品前处理23
• 2.3 GC-MS条件23
• 2.4 测定结果与分析23-26
• 2.5 小结26-27
• 3 燃料油水溶液对牙鲆的细胞毒性及DNA损伤27-41
• 3.1 材料与方法27-29
• 3.1.1 仪器与试剂27
• 3.1.2 实验生物及培养条件27
• 3.1.3 燃料油水溶液的制备与测定27
• 3.1.4 实验设计及样品预处理27-28
• 3.1.5 数据测定与处理方法28-29
• 3.2 结果与分析29-37
• 3.2.1 燃料油水溶液对牙鲆幼鱼抗氧化酶活性的影响29-33
• 3.2.2 燃料油水溶液对牙鲆幼鱼脂质过氧化水平的影响33-35
• 3.2.3 燃料油水溶液对牙鲆幼鱼溶酶体膜稳定性的影响35
• 3.2.4 燃料油水溶液对牙鲆血细胞的DNA损伤35-37
• 3.3 讨论37-39
• 3.3.1 燃料油水溶液对牙鲆幼鱼抗氧化酶活性的影响37-38
• 3.3.2 燃料油水溶液对牙鲆幼鱼脂质过氧化水平的影响38
• 3.3.3 燃料油水溶液对牙鲆幼鱼血细胞溶酶体膜稳定性的影响38-39
• 3.3.4 燃料油水溶液对牙鲆幼鱼血细胞的DNA损伤39
• 3.4 基于整合生物标志物法研究燃料油水溶液对牙鲆幼鱼的毒性效应39-40
• 3.5 小结40-41
• 4 溢油分散剂对牙鲆的细胞毒性及DNA损伤41-53
• 4.1 材料与方法41-42
• 4.1.1 仪器与试剂41
• 4.1.2 实验生物及培养条件41
• 4.1.3 燃料油水溶液的制备与测定41
• 4.1.4 实验设计及样品预处理41
• 4.1.5 数据测定与处理方法41-42
• 4.2 结果与分析42-49
• 4.2.1 溢油分散剂对牙鲆抗氧化酶活性的影响42-46
• 4.2.2 溢油分散剂对牙鲆幼鱼脂质过氧化水平的影响46-47
• 4.2.3 溢油分散剂对牙鲆幼鱼血细胞溶酶体膜稳定性的影响47-48
• 4.2.4 溢油分散剂对牙鲆幼鱼血细胞的DNA损伤48-49
• 4.3 讨论49-52
• 4.3.1 溢油分散剂对牙鲆幼鱼抗氧化酶活性的影响49-50
• 4.3.2 溢油分散剂对牙鲆幼鱼脂质过氧化水平的影响50-51
• 4.3.3 溢油分散剂对牙鲆幼鱼血细胞溶酶体稳定性的影响51
• 4.3.4 溢油分散剂对牙鲆幼鱼血细胞的DNA损伤51-52
• 4.4 基于整合生物标志物法研究燃料油水溶液及溢油分散剂对牙鲆幼鱼的毒性效应52
• 4.5 小结52-53
• 5 总结53-55
• 5.1 180CST燃料油成分的测定53
• 5.2 燃料油水溶液对牙鲆幼鱼的细胞毒性及DNA损伤53
• 5.3 溢油分散剂对牙鲆幼鱼的细胞毒性及DNA损伤53-55
• 参考文献55-63
• 致谢63-64
• 个人简历64
• 发表论文情况64

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