生姜根际促生菌的促生效应

发布时间：2021-10-15 18:02

　　我国是世界上生姜种植面积最大且生产总量最多的国家,其中北方则主要以山东省种植面积最大。但是随着种植的推广许多问题也就逐渐凸显,主要是防治过程中的过量施肥或者其他不当防治所带来的环境污染和土质下降等问题日益显著,所以需要找一种新的低污染的科学方法来取代传统方法。微生物菌剂在提高农产品产量的同时防止环境污染,改善环境和土壤质量,实现农业生产的可持续发展。开发生姜专用微生物菌剂有利于生姜的绿色高效生产。本研究主要围绕对四株不同的生姜根际促生菌的菌株鉴定和功能筛选开展工作,研究了不同菌剂处理对生姜的促生效果,探讨了菌剂对生姜根际微生物群落结构的影响。经过形态观察,生理生化特征分析以及16S rDNA序列分析,鉴定四株菌分别为地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）LCDD6、苏云金芽孢杆菌（B.thuringiensis）TA-201、苏云金芽孢杆菌（B.thuringiensis）TA-202和蕈状芽孢杆菌（B.mycoides）TA-203。对四株菌株的解蛋白、产铁载体等功能进行检测,其中LCDD6、TA-201、TA-202、TA-203有产IAA、解蛋白、产铁载体和... 

【文章来源】：山东农业大学山东省

【文章页数】：98 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
1 引言
    1.1 莒县生姜生产现状
    1.2 植物根际促生细菌
        1.2.1 植物根际促生细菌概念
        1.2.2 植物根际促生细菌作用机制
        1.2.3 植物根际促生细菌的应用
    1.3 微生物肥料
        1.3.1 概念
        1.3.2 微生物肥料分类
    1.4 微生物多样性
        1.4.1 微生物多样性的重要性
        1.4.2 评估微生物多样性的技术
    1.5 全基因组测序技术
        1.5.1 概述
        1.5.2 基因组测序技术的发展
        1.5.3 基因组数据分析
    1.6 研究意义、研究内容和技术路线
        1.6.1 研究意义
        1.6.2 研究内容
        1.6.3 技术路线
2 材料与方法
    2.1 试验菌株
    2.2 主要仪器和设备
    2.3 主要药品试剂
    2.4 培养基
    2.5 菌株鉴定
        2.5.1 菌株形态学观察
        2.5.2 DNA提取
        2.5.3 16SrDNA序列PCR扩增
        2.5.4 系统发育树构建
    2.6 菌株生理生化特征的测定
    2.7 菌株促生功能鉴定
        2.7.1 细菌分泌IAA定性测定
        2.7.2 细菌产蛋白酶的鉴定
        2.7.3 细菌产铁载体的鉴定
        2.7.4 细菌解磷能力鉴定
    2.8 抗生素合成基因检测
    2.9 盆栽实验
        2.9.1 菌株准备
        2.9.2 菌株对姜苗的影响
        2.9.3 指标测定及方法
    2.10 大田实验
        2.10.1 大田试验设计
        2.10.2 指标测定及方法
    2.11 全基因组测序分析
        2.11.1 实验流程
        2.11.2 信息分析流程
    2.12 培养基成分优化
        2.12.1 生长曲线测定
        2.12.2 碳源优化
        2.12.3 氮源优化
        2.12.4 无机盐的优化
        2.12.5 pH值的优化
3 结果与分析
    3.1 菌株鉴定
        3.1.1 菌株形态学观察
        3.1.2 系统发育树
    3.2 菌株生理生化特征
    3.3 菌株功能性代谢产物研究
        3.3.1 生长素
        3.3.2 蛋白酶
        3.3.3 解磷能力
        3.3.4 铁载体
    3.4 抗生素合成基因PCR检测结果
        3.4.1 Surfactin合成基因
        3.4.2 Fengycin合成基因
        3.4.3 其他抗生素合成基因
    3.5 菌剂生姜盆栽应用效果
        3.5.1 菌剂对生姜农艺性状的影响
        3.5.2 菌剂对生姜生物量的影响
        3.5.3 菌剂对生姜叶片酶活的影响
        3.5.4 菌剂对生姜叶绿素的影响
        3.5.5 菌剂对细菌菌群多样性的影响
            3.5.5.1 OTU聚类
            3.5.5.2 土壤微生物丰富度与多样性评估
            3.5.5.3 群落结构分析
            3.5.5.4 不同处理间细菌群落结构比较
    3.6 大田试验
        3.6.1 大田生姜幼苗期生长情况
        3.6.2 大田生姜生长期生长情况
        3.6.3 大田生姜成熟期生长情况
        3.6.4 大田生姜农艺性状
        3.6.5 不同处理对生姜根际微生物多样性与群落结构的影响
            3.6.5.1 OTU聚类
            3.6.5.2 土壤微生物丰富度与多样性评估
            3.6.5.3 群落结构分析
            3.6.5.4 不同处理间微生物群落结构比较
    3.7 地衣芽孢杆菌LCDD6 全基因组分析
        3.7.1 地衣芽孢杆菌LCDD6 基因组组分分析
        3.7.2 地衣芽孢杆菌LCDD6 基因功能注释
            3.7.2.1 蛋白编码基因的GO注释
            3.7.2.2 蛋白编码基因的KEGG注释
            3.7.2.3 蛋白编码基因的COG注释
            3.7.2.4 基因组圈图绘制
        3.7.3 地衣芽孢杆菌LCDD6 基因组功能预测分析
            3.7.3.1 基因岛预测
            3.7.3.2 碳水化合物相关酶(CAZy)分析
            3.7.3.3 抗生素抗性(CARD)分析
            3.7.3.4 前噬菌体序列分析
            3.7.3.5 次生代谢产物预测
        3.7.4 地衣芽孢杆菌LCDD6 潜在促生基因分析
            3.7.4.1 与生长素相关的促生基因预测
            3.7.4.2 与溶磷相关的促生基因预测
            3.7.4.3 与铁载体相关的基因预测
    3.8 LCDD6 培养基成分优化结果
        3.8.1 生长曲线测定
        3.8.2 碳源对LCDD6 生长的影响
        3.8.3 氮源对LCDD6 生长的影响
        3.8.4 无机盐对LCDD6 生长的影响
        3.8.5 pH值对LCDD6 生长的影响
4 讨论
5 结论
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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[3]2018年我国生姜市场回顾与2019年行情展望[J]. 刘帅,陈明均,贺坦,任长华.  中国蔬菜. 2019(02)
[4]生姜营养价值及药理作用研究进展[J]. 吴嘉斓,王笑园,王坤立,庞思成,何政宇,倪元颖.  食品工业. 2019(02)
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硕士论文
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[2]芽孢杆菌蛋白酶产生条件、部分酶学性质及其基因的克隆研究[D]. 王海丰.四川大学 2002



本文编号：3438386