在食管癌ECA109细胞中p107/Survivin结合对靶基因表达调控的研究

发布时间：2021-11-17 20:44

　　目的:探讨p107与转录因子Survivin在食管癌ECA109细胞中是否存在结合现象及相互作用,并观察p107与Survivin的结合现象对IKKβ的表达是否具有调控作用。方法:构建CMV-MCS-3flag-Survivin-SV40-Neomycin和CMV-MCS-3flag-p107-SV40-Neomycin载体,用Western-blot方法检测其在食管癌ECA109细胞中表达情况。采用免疫共沉淀技术检测p107蛋白与Survivin蛋白是否存在结合现象,采用细胞核定位实验检测p107蛋白与Survivin蛋白在细胞内的定位,最后采用双荧光素酶报告基因技术检测这种结合现象对IKKβ启动子活性的调控。结果:Western-blot结果显示在食管癌ECA109细胞中转染CMV-MCS-3flag-Survivin-SV40-Neomycin和C MV-MCS-3flag-p107-SV40-Neomycin质粒后,在大小约19.0kD的位置检测出含Flag标签的Survivin蛋白以及16.5kD的位置检测出内源性的Survivin蛋白,大约110.0k D的位置检测出含Fl... 

【文章来源】：新疆医科大学新疆维吾尔自治区

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中英文缩略词对照表
摘要
ABSTRACT
前言
研究内容与方法
    1 实验材料
        1.1 研究对象
        1.2 主要试剂及配制方法
        1.3 质粒转化、抽提所需主要试剂
        1.4 免疫共沉淀所需主要试剂
        1.5 Western-Blotting相关主要试剂及耗材
        1.6 Western-Blotting主要试剂的配制
        1.7 细胞核定位所需主要试剂
        1.8 细胞核定位主要试剂的配制
        1.9 荧光素酶报告基因所需主要试剂
        1.10 本研究所使用的主要仪器
    2 实验内容与方法
        2.1 食管癌ECA109细胞初步检测Survivin与p107结合现象
        2.2 食管癌ECA109细胞中检测Survivin与p107在细胞内的定位
        2.3 食管癌ECA109细胞中Survivin与p107互动对IKKβ启动子调节
    3 质量控制
    4 统计学处理
技术路线图
结果
讨论
结论
致谢
参考文献
综述 p107的最新进展
    参考文献
攻读硕士期间发表的学术论文
导师评阅表


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3501616