小鼠MOE内受AC3调控的SLC家族成员及其作用
发布时间：2022-02-10 12:56
主要嗅觉表皮（main olfactory epithelium,MOE）是哺乳动物的主要嗅觉器官。腺苷酸环化酶3（adenylyl cyclase 3,AC3）是主要嗅觉信号转导通路cAMP信号转导通路的重要成员之一。AC3缺失会影响嗅觉通路的表达。MOE暴露在外界环境中容易受到病原体的侵扰;在体内一些溶质的转运也会影响到MOE的功能。体内大多数溶质是由转运蛋白介导转运的,溶质载体（solute carriers,SLC）超家族是膜转运蛋白家族,在MOE中的溶质转运方面发挥重要作用。小鼠MOE中AC3缺失后是否会影响部分SLC家族成员的表达以及部分SLC家族成员表达发生改变后又会对MOE的功能产生怎样的影响呢?这些问题目前尚未得到解决。为了解决以上问题,本文以野生型(AC3+/+)、敲除型(AC3-/-)和敲入型（hAC3）三种基因型小鼠MOE组织以及NIH3T3细胞为实验材料,利用qRT-PCR、Western blot、IF、Co-IP以及质谱等实验方法进行以下探究:1、通过qRT-PCR实验初步在mRNA水平上对部分SLC家族成员的表...
【文章来源】：河北大学河北省
【文章页数】：91 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
小鼠主要嗅觉表皮（MOE）组织模式图
河北大学硕士学位论文6图1-2腺苷酸环化酶结构图Fig.1-2Structureofadenylylcyclase（引自http://www.baike.com/wiki/cAMP信号传导途径）1.3小鼠主要嗅觉信号通路嗅觉的产生是一系列分子进行信号转导的结果。从1996至2000年，通过敲除Golf、CNGα以及AC3后发现，基因敲除小鼠均丧失了气味探测能力并且气味刺激的电生理反应丧失或者降低[42,46,47]。这些基因都是环磷酸腺苷(cyclicadenosinemonophosphate,cAMP)信号转导途径的成员，因此cAMP信号转导通路被认为是哺乳动物嗅觉神经元进行嗅觉信号转导的主要通路。OR位于神经元纤毛上，可以检测气味分子。嗅觉是由嗅觉感觉神经元表面上的OR之间的相互作用引发的。每个嗅觉感觉神经元都表达单个的受体基因[48,49]。气味分子与OR结合后会激活Golf蛋白[50]，Gα亚基与GTP结合变成活跃状态后激活AC3[38]。AC3能将ATP转换成cAMP[51]，大量增多的cAMP充当第二信使打开了CNG阳离子通道，Na+尤其是Ca2+流入纤毛。然后Ca2+充当第三信使打开了Cl-通道，导致Cl-流出，这是膜去极化的一个过程。这个过程贡献了OSN受体电流的80％至90％，因此膜去极化的放大步骤产生了动作电位，并以神经冲动动作电位的形式传递到嗅球，嗅球再将信息上传到大脑，最终产生了嗅觉。
第一章文献综述9员使用微阵列分析气味诱导时野生型和CNGA2缺陷型小鼠基因表达的差异时发现，SLC8A1在气味诱导的野生型中表达量明显上调，这说明了SLC8A1可能在嗅觉传递过程中具有一定的潜在作用[79]。AC是调节细胞的关键效应因子，有研究表明多巴胺转运蛋白SLC6A3的表达与AC5的活性相关[80-82]。在心脏中AC6的表达可通过增加cAMP来改善心脏功能，在这其中钙离子的平衡非常重要。AC6改善心脏功能的机制就包含了SLC8A1表达的减少，以及肌质网钙离子增多[83]。但目前在MOE中尚没有关于AC3对SLC8A1、SLC6A3以及其他SLC家族成员表达影响的报道。由于SLC家族成员众多，因此功能也是多种多样的，对于SLC家族成员的研究可以为一些疾病的治疗，靶标蛋白的药物设计等做铺垫。嗅觉传递过程中涉及到多种溶质的转运，在小鼠MOE中研究SLC家族成员的功能可以更好的解释一些溶质在嗅觉传递过程中的作用。图1-3转运蛋白分布图Fig.1-3Diagramoftransporterdistribution（引自HedigerMA，2004）
【参考文献】：
期刊论文
[1]质谱技术在蛋白质组学中的应用发展[J]. 吴晓歌,鲁新宇. 医学研究生学报. 2007(10)
本文编号：3618929
【文章来源】：河北大学河北省
【文章页数】：91 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
小鼠主要嗅觉表皮（MOE）组织模式图
河北大学硕士学位论文6图1-2腺苷酸环化酶结构图Fig.1-2Structureofadenylylcyclase（引自http://www.baike.com/wiki/cAMP信号传导途径）1.3小鼠主要嗅觉信号通路嗅觉的产生是一系列分子进行信号转导的结果。从1996至2000年，通过敲除Golf、CNGα以及AC3后发现，基因敲除小鼠均丧失了气味探测能力并且气味刺激的电生理反应丧失或者降低[42,46,47]。这些基因都是环磷酸腺苷(cyclicadenosinemonophosphate,cAMP)信号转导途径的成员，因此cAMP信号转导通路被认为是哺乳动物嗅觉神经元进行嗅觉信号转导的主要通路。OR位于神经元纤毛上，可以检测气味分子。嗅觉是由嗅觉感觉神经元表面上的OR之间的相互作用引发的。每个嗅觉感觉神经元都表达单个的受体基因[48,49]。气味分子与OR结合后会激活Golf蛋白[50]，Gα亚基与GTP结合变成活跃状态后激活AC3[38]。AC3能将ATP转换成cAMP[51]，大量增多的cAMP充当第二信使打开了CNG阳离子通道，Na+尤其是Ca2+流入纤毛。然后Ca2+充当第三信使打开了Cl-通道，导致Cl-流出，这是膜去极化的一个过程。这个过程贡献了OSN受体电流的80％至90％，因此膜去极化的放大步骤产生了动作电位，并以神经冲动动作电位的形式传递到嗅球，嗅球再将信息上传到大脑，最终产生了嗅觉。
第一章文献综述9员使用微阵列分析气味诱导时野生型和CNGA2缺陷型小鼠基因表达的差异时发现，SLC8A1在气味诱导的野生型中表达量明显上调，这说明了SLC8A1可能在嗅觉传递过程中具有一定的潜在作用[79]。AC是调节细胞的关键效应因子，有研究表明多巴胺转运蛋白SLC6A3的表达与AC5的活性相关[80-82]。在心脏中AC6的表达可通过增加cAMP来改善心脏功能，在这其中钙离子的平衡非常重要。AC6改善心脏功能的机制就包含了SLC8A1表达的减少，以及肌质网钙离子增多[83]。但目前在MOE中尚没有关于AC3对SLC8A1、SLC6A3以及其他SLC家族成员表达影响的报道。由于SLC家族成员众多，因此功能也是多种多样的，对于SLC家族成员的研究可以为一些疾病的治疗，靶标蛋白的药物设计等做铺垫。嗅觉传递过程中涉及到多种溶质的转运，在小鼠MOE中研究SLC家族成员的功能可以更好的解释一些溶质在嗅觉传递过程中的作用。图1-3转运蛋白分布图Fig.1-3Diagramoftransporterdistribution（引自HedigerMA，2004）
【参考文献】：
期刊论文
[1]质谱技术在蛋白质组学中的应用发展[J]. 吴晓歌,鲁新宇. 医学研究生学报. 2007(10)
本文编号：3618929
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