基于异噁唑类及次生代谢成分的鹅膏属鹅膏组物种系统发育研究

发布时间:2022-02-19 01:39
  在我国,由误食野生蘑菇而导致的中毒事件在食物中毒事件中占有很大比例。近年来,因误食野生蘑菇而致神经中毒事件更是频繁发生。鹅膏属中导致神经中毒的真菌是含有异噁唑类衍生物的鹅膏属鹅膏组物种。国内对于这类真菌毒素的研究还未见报道,关于这类真菌的研究主要在分类学上。鹅膏属鹅膏组物种的次生代谢指纹图谱以及其与基于ITS构建的系统发育树关系的研究在国际上也处于空白状态。因此,开展含异噁唑类衍生物有毒蘑菇的毒素成分检测、基于毒素和相关代谢成分的指纹图谱构建及基于ITS构建的系统发育树的关系研究,对于全面了解我国的这类神经性毒蘑菇资源及其毒素成分具有重要的科学意义和应用价值。本文开展了异噁唑类衍生物的提取和检测优化、物种中鹅膏蕈氨酸含量检测以及基于ITS构建的系统发育树与基于次生代谢产物构建的系统发育树进行比较研究。研究结果如下:1、异噁唑类衍生物的提取和检测优化:通过HPLC图对比可知采用辅助超声提取得到的提取液次生代谢产物含量更高,且所需时间更短。选取三对流动相用于检测,通过HPLC图比较,综合分离程度和峰的数量认为甲酸水溶液和甲酸乙腈溶液作为流动相最适合用于异噁唑类衍生物检测及指纹图谱的构建。2... 

【文章来源】:湖南师范大学湖南省211工程院校

【文章页数】:82 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
1 前言
    1.1 异噁唑类衍生物的种类及性质
    1.2 异噁唑类衍生物的提取及分离纯化
    1.3 异噁唑类衍生物的检测
    1.4 鹅膏属的分子系统发育研究进展
    1.5 次生代谢物质的指纹图谱研究进展
    1.6 本论文的研究目的及意义
2 鹅膏属鹅膏组物种基于ITS序列的系统发育分析
    2.1 实验材料
    2.2 实验试剂
    2.3 实验仪器
    2.4 试验方法
        2.4.1 DNA提取
        2.4.2 PCR扩增
        2.4.3 克隆测序
        2.4.4 基于ITS构建的系统发育树
    2.5 实验结果与分析
3 异噁唑类衍生物及次生代谢产物的提取及检测优化
    3.1 异噁唑类衍生物及次生代谢产物的提取优化
        3.1.1 实验材料
        3.1.2 实验试剂
        3.1.3 实验仪器
        3.1.4 实验方法
        3.1.5 实验结果与分析
    3.2 异噁唑类衍生物及次生代谢产物检测方法的优化
        3.2.1 实验材料
        3.2.2 实验试剂
        3.2.3 实验仪器
        3.2.4 实验方法
        3.2.5 实验结果与分析
4 基于异噁唑类衍生物及次生代谢产物的系统发育分析
    4.1 实验材料
    4.2 毒素标样
    4.3 实验试剂
    4.4 实验仪器
    4.5 实验方法
        4.5.1 材料提取方法
        4.5.2 异噁唑类衍生物及次生代谢产物检测方法
        4.5.3 标准样品以及回归方程的建立
        4.5.4 基于异噁唑及次生代谢产物的系统发育聚类分析方法
    4.6 实验结果与分析
        4.6.1 鹅膏菌中鹅膏蕈氨酸的含量
        4.6.2 鹅膏菌中异噁磋类衍生物及次生代谢产物的系统发育分析
5 结论与展望
    5.1 对于异噁唑类衍生物提取和检测条件优化
    5.2 鹅膏菌的鹅膏蕈氨酸毒素含量
    5.3 基于次生代谢产物的聚类与分子构建的系统发育树的比较
    5.4 展望
参考文献
附录
致谢


【参考文献】:
期刊论文
[1]中药指纹图谱技术的研究进展及应用[J]. 刘东方,赵丽娜,李银峰,靳朝东.  中草药. 2016(22)
[2]中国毒蘑菇名录[J]. 图力古尔,包海鹰,李玉.  菌物学报. 2014(03)
[3]Applications of HPLC/MS in the analysis of traditional Chinese medicines[J]. Miao Li,Xiao-Fang Hou,Jie Zhang,Si-Cen Wang,Qiang Fu,Lang-Chong He School of Medicine,Xi’an Jiaotong University,Xi’an 710061,China.  Journal of Pharmaceutical Analysis. 2011(02)
[4]2004-2009年全国毒蕈中毒突发公共卫生事件分析[J]. 牛姬飞,涂文校,倪大新.  疾病监测. 2011(03)
[5]中药指纹图谱的研究进展[J]. 邵建强.  中草药. 2009(06)
[6]中国毒菌物种多样性及其毒素[J]. 卯晓岚.  菌物学报. 2006(03)
[7]中国鹅膏菌属(担子菌)的物种多样性(英文)[J]. 杨祝良.  云南植物研究. 2000(02)
[8]鹅膏菌属真菌RAPD分析及亲缘关系的研究[J]. 陈作红,张志光,张天晓.  菌物系统. 2000(01)
[9]湖南莽山鹅膏菌属真菌资源、分类及其生态特征[J]. 陈作红,张志光,张平,张天晓,张在海,肖清宇.  中国食用菌. 1997(06)
[10]西藏鹅膏菌属的分类研究[J]. 卯晓岚.  真菌学报. 1990(03)

博士论文
[1]致命鹅膏菌(Amanita exitialis)主要肽类毒素检测分析、分离鉴定及功能研究[D]. 胡劲松.湖南师范大学 2013



本文编号:3631952

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