基于聚（2-甲基-2-噁唑啉）和聚丙烯酸的混合刷在毛细管电泳在线富集溶菌酶中的应用

发布时间：2022-02-21 12:06

　　溶菌酶又称胞壁质酶,是一种天然的碱性蛋白质。溶菌酶不仅可以水解细菌细胞壁中的肽聚糖,导致细胞壁破裂,菌体溶解,而且能够与病毒蛋白直接结合使病毒失活,因而具有抗菌、抗病毒、消炎等功效。溶菌酶还常被用作模型蛋白,用于研究蛋白质的构象、酶动力学及其与分子免疫间的关系等。目前,常用的溶菌酶检测方法有酶联免疫吸附法（ELISA）、高效液相色谱法（HPLC）、毛细管电泳法（CE）等。CE由于分析速度快、分离效率高、试剂消耗量少等优点广泛用于蛋白质的分离分析中。紫外检测器（UV）是CE最常用的检测方式,然而由于毛细管进样体积小、检测光程短,致使CE-UV的检测灵敏度受到限制。为提高检测灵敏度,在线富集技术应运而生。在线富集技术是通过调节目标分析物所处状态以及仪器参数使分析物得到富集,从而达到提高检测灵敏度的目的,具有操作简便、价格低廉的优点。本论文通过一步加热法制备了一种对溶菌酶具有吸附/释放功能的混合刷涂层毛细管,用于毛细管电泳在线富集溶菌酶以提高检测灵敏度。主要内容如下:首先分别通过阳离子开环聚合和可逆加成-断裂链转移（RAFT）聚合合成聚（2-甲基-2-噁唑啉）（PMOXA）和不同链长的聚丙烯... 

【文章来源】：中国科学技术大学安徽省211工程院校985工程院校

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第1章 绪论
    1.1 引言
    1.2 溶菌酶及其检测方法
        1.2.1 溶菌酶简介
        1.2.2 溶菌酶检测方法
    1.3 毛细管电泳在线富集技术
        1.3.1 样品堆积
        1.3.2 pH调节
        1.3.3 吹扫
        1.3.4 等速电泳
        1.3.5 毛细管涂层法
    1.4 毛细管涂层的制备方法
        1.4.1 非共价键涂层
        1.4.2 共价键涂层
    1.5 刺激响应性聚合物刷
        1.5.1 单组分聚丙烯酸刷及其在蛋白质的可控吸附中的应用
        1.5.2 刺激响应性混合刷及其在蛋白质的可控吸附中的应用
    1.6 甲基丙烯酸缩水甘油酯在材料表面改性的应用
    1.7 本课题研究意义和主要研究内容
第2章 基于聚(2-甲基-2-噁唑啉)和聚丙烯酸的混合刷涂层毛细管
    2.1 引言
    2.2 实验部分
        2.2.1 实验试剂
        2.2.2 实验仪器
        2.2.3 溶液的配制
        2.2.4 PMOXA-r-GMA和PAA-b-PGMA的合成与表征
        2.2.5 PMOXA-r-GMA/PAA-b-PGMA涂层毛细管的制备及其表面组成
        2.2.6 毛细管电渗流(EOF)和ζ电势的测定
        2.2.7 异硫氰酸荧光素标记溶菌酶吸附/脱附实验
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 PMOXA-r-GMA和PAA-b-PGMA的表征
        2.3.2 毛细管涂层的表征
        2.3.3 毛细管的ζ电势
        2.3.4 PMOXA-r-GMA/PAA-b-PGMA涂层毛细管对溶菌酶的吸附/释放
    2.4 本章小结
第3章 毛细管电泳在线富集溶菌酶
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 实验试剂
        3.2.2 实验仪器
        3.2.3 溶液的配制
        3.2.4 PMOXA-r-GMA和PAA-b-PGMA的合成
        3.2.5 PMOXA-r-GMA/PAA-b-PGMA涂层毛细管的制备
        3.2.6 毛细管电泳在线富集溶菌酶
        3.2.7 方法学评价
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 PMOXA-r-GMA/PAA-b-PGMA涂层毛细管富集溶菌酶条件研究
        3.3.2 不同涂层毛细管在线富集溶菌酶
        3.3.3 方法学考察
        3.3.4 PMOXA-r-GMA/PAA-b-PGMA涂层毛细管的稳定性
    3.4 本章小结
第4章 结论
参考文献
致谢
在读期间发表的学术论文



本文编号：3637219