新疆沙冬青AnEREBP转录因子克隆及表达调控分析

发布时间：2024-02-22 12:57

　　恶劣的环境严重影响植物的正常生长和发育进程,为了适应不利的环境变化,许多植物进化出了复杂的调控机制,如改变植物激素的合成,通过信号转导调控基因表达来提高植物的抗逆性。AP2/ERF超家族是一类植物特有的转录因子家族,是多种胁迫反应的关键调节因子。为了探究AP2/ERF家族成员在新疆沙冬青抵抗逆境过程中的重要作用以及调控机制,本研究以新疆沙冬青为材料,通过基因克隆及课题组前期RNA-Seq获得3个AP2/ERF基因序列,命名为AnEREBP1(MH260902.1)、AnEREBP2(MH260903.1)及AnEREBP3(JQ360514.1);同时,利用生物信息学、实时荧光定量(qRT-PCR)及凝胶迁移率(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)等分析对这3个基因的潜在功能进行了系统地分析,试验主要结论如下:1.通过cDNA末端快速扩增技术(Rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术以及染色体步移技术对新疆沙冬青AnEREBP3基因的全长和启动子进行克隆,通过简并引物克隆得到同源区段383 bp,进...

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图2-1序列拼接示意图

沈阳农业大学硕士学位论文19图2-1序列拼接示意图Fig.2-1SequenceMosaicdiagram2.2.7启动子克隆2.2.7.1新疆沙冬青叶片DNA提取利用植物DNA提取试剂盒按照说明书提取新疆沙冬青DNA。2.2.7.2引物设计利用在线引物设计软件Primer-BL....

图2-2基因同源区扩增电泳结果

沈阳农业大学硕士学位论文21图2-2基因同源区扩增电泳结果Fig.2-2Electrophoresisresultsofhomologousamplificationofthegene注：M:D2000Marker;1:AnEREBP3基因同源区扩增片段2.3.1.2TA克隆菌落....

图2-3菌落PCRFig.2-3ColonyPCR

沈阳农业大学硕士学位论文21图2-2基因同源区扩增电泳结果Fig.2-2Electrophoresisresultsofhomologousamplificationofthegene注：M:D2000Marker;1:AnEREBP3基因同源区扩增片段2.3.1.2TA克隆菌落....

图2-4同源区测序结果

沈阳农业大学硕士学位论文21图2-2基因同源区扩增电泳结果Fig.2-2Electrophoresisresultsofhomologousamplificationofthegene注：M:D2000Marker;1:AnEREBP3基因同源区扩增片段2.3.1.2TA克隆菌落....

本文编号：3906786