氮磷营养盐对腹孔环胺藻（Azadinium poporum）生长及产毒水平的影响

发布时间：2017-09-07 08:23

  本文关键词：氮磷营养盐对腹孔环胺藻（Azadinium poporum）生长及产毒水平的影响

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【摘要】：近年来,有害赤潮在全球近岸海域频繁爆发,其中部分有毒赤潮不仅加剧海水富营养化程度,还会释放多种海洋藻毒素,严重污染近海养殖环境,威胁水产品食用安全。其中氮杂螺环酸(Azaspiracids, AZA)是最新发现的一类海洋藻毒素。自1995年以来因食用沾染氮杂螺环酸的海产品而发生中毒的事件(Azaspiracid shellfish poisoning, AZP)频繁爆发,在世界范围内引起了人们的广泛关注。目前已经确定的氮杂螺环酸及其衍生物成分多达30余种,产氮杂螺环酸的海洋藻种主要包括具刺环胺藻(Azadinium spinosum)、腹孔环胺藻(A.poporum)和肥胖环胺藻(A.obesum)。尽管目前我国还未见氮杂螺环酸中毒事件的报道,但相关研究表明产毒的腹孔环胺藻在我国近海海域广泛分布。由于我国对氮杂螺环酸的研究工作起步较晚，有关环境因素对该产毒藻生长及产毒水平影响的报道甚少。因此,本论文以分离自我国南海海域的两株腹孔环胺藻AZDY06和AZFC22为研究对象,考察了自然海水中氮磷营养盐变化对两株藻生长和产毒水平的影响,实验结果表明：(1)两株腹孔环胺藻(AZDY06和AZFC22)对氮磷营养盐浓度的变化都表现出积极的响应,在一定浓度范围内,随着硝酸盐和磷酸盐浓度的增加,藻株的比增长率和最大藻细胞密度均增大。在批次培养过程中藻株AZFC22的生长周期比藻株AZDY06的生长周期短。两株腹孔环胺藻对氮磷营养盐的需求也表现出一定的差异：相对于藻株AZFC22而言,藻株AZDY06对高浓度硝酸盐的适应能力更强,而对高浓度磷酸盐的适应性较差。(2)两株腹孔环胺藻在添加无机氮(硝酸钠)和有机氮(尿素)的培养基中均能正常生长,且在添加有机氮的培养基中具有相对高的比增长率,但其生长周期明显比添加无机氮的实验组短。表明这两株腹孔环胺藻既可以利用无机氮也可以利用有机氮作为氮源进行分裂增殖,且有机氮尿素更利于甲藻的快速生长。(3)在不同氮磷营养盐浓度下,两株腹孔环胺藻在稳定生长期的单位细胞产毒水平高于指数生长期。且藻株AZFC22产生AZA-2毒素的水平均高于藻株AZDY06。在指数生长期两株腹孔环胺藻主要利用营养盐进行快速的分裂增殖,毒素合成代谢较慢,导致其单位细胞内的毒素含量较低。在稳定生长期藻细胞基本停止了分裂增殖,硝酸盐浓度的变化未见对单位细胞毒素含量产生显著的影响,而磷酸盐浓度的变化明显影响单位细胞毒素含量,在磷限制条件下能刺激两株藻产毒能力升高。通过比较不同浓度的氮磷营养盐条件下两株腹孔环胺藻培养基的单位体积毒素含量发现,在以获取最大量的藻毒素为目的的藻类培养过程中,应综合考虑甲藻的生长状况与产毒水平。本论文的研究结果初步揭示了不同氮磷营养盐对两株腹孔环胺藻生长和产毒水平的影响规律,对于进一步优化腹孔环胺藻的室内培养条件,获取大量氮杂螺环酸毒素,具有重要的意义。
【关键词】：腹孔环胺藻 氮 磷 氮杂螺环酸 液相色谱-串联质谱联用
【学位授予单位】：中国海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：X55
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-11
• 0 前言11-12
• 1 文献综述12-29
• 1.1 氮杂螺环酸的分类与性质12-16
• 1.1.1 氮杂螺环酸的分类12
• 1.1.2 氮杂螺环酸的性质12-16
• 1.2 氮杂螺环酸的来源与分布16-20
• 1.3 氮杂螺环酸的分析方法20-22
• 1.3.1 生物测定法20-21
• 1.3.2 液相色谱-质谱联用分析法(LC-MS)21-22
• 1.4 氮磷营养盐对藻类的生长及产毒的影响研究22-27
• 1.4.1 氮磷营养盐对藻类生长的影响22-25
• 1.4.2 氮磷营养盐对藻类产毒的影响25-27
• 1.5 研究的目的、意义及路线27-29
• 1.5.1 研究的目的与意义27-28
• 1.5.2 技术路线28-29
• 2 氮磷营养盐对腹孔环胺藻生长及产毒水平的影响29-61
• 2.1 实验材料与仪器29-30
• 2.2 实验方法30-35
• 2.2.1 腹孔环胺藻的培养30-31
• 2.2.2 生长曲线的测定与藻细胞收集31-32
• 2.2.3 氮杂螺环酸的提取32-33
• 2.2.4 氮杂螺环酸的LC-MS/MS分析33-34
• 2.2.5 统计分析34-35
• 2.3 实验结果35-51
• 2.3.1 硝酸盐和磷酸盐浓度变化对腹孔环胺藻AZDY06生长的影响35-39
• 2.3.2 硝酸盐和磷酸盐浓度变化对腹孔环胺藻AZFC22生长的影响39-43
• 2.3.3 不同类型的氮源对两株腹孔环胺藻生长的影响43-45
• 2.3.4 两株腹孔环胺藻的产毒组分分析45-46
• 2.3.5 硝酸盐和磷酸盐浓度变化对两株腹孔环胺藻产毒的影响46-51
• 2.4 讨论51-61
• 2.4.1 硝酸盐和磷酸盐浓度变化对两株腹孔环胺藻生长的影响51-53
• 2.4.2 不同氮源对两株腹孔环胺藻生长的影响53-54
• 2.4.3 硝酸盐和磷酸盐浓度变化对两株腹孔环胺藻产毒的影响54-61
• 3 结论、创新及展望61-63
• 3.1 结论61-62
• 3.2 本文创新之处62
• 3.3 展望62-63
• 参考文献63-73
• 致谢73-74
• 个人简历74
• 在学期间发表的学术论文及研究成果74

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1 蒋保周;氮磷营养盐对腹孔环胺藻（Azadinium poporum）生长及产毒水平的影响[D];中国海洋大学;2015年

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本文编号：808448