从脑肠互动研究凉血通瘀方对脑出血大鼠的神经保护机制

发布时间：2017-12-19 15:28

  本文关键词：从脑肠互动研究凉血通瘀方对脑出血大鼠的神经保护机制　出处：《南京中医药大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

  更多相关文章： 脑出血 脑肠互动 凉血通瘀方 脑保护 CCK-8

【摘要】：目的:建立与临床急性脑出血相近的自体尾动脉注血诱发脑出血大鼠模型。立足于"脑肠互动"学说,从神经组织学、神经病理学、神经分子生物学等领域研究凉血通瘀方治疗脑出血继发性脑损害的神经保护作用机制。方法:1选择SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常组、假手术组、造模组,按照自体尾动脉血注射方法制备脑出血模型。根据行为学评分和脑组织形态学改变观察造模情况。2造模组随机分为模型组、凉血通瘀组、通腑泻热组和凉血散瘀组,每组6只,分别于用药1d、3d、5d后观察相应指标。3观察并记录大鼠行为学评分、测定大鼠脑血肿含量及脑组织水肿含量以观察凉血通瘀方对脑出血大鼠神经功能缺损的影响。4观察大鼠排便情况、检测肠道活力探讨凉血通瘀方对脑出血大鼠肠道功能的影响。5应用免疫组化法检测大鼠脑组织NGF、nNOS表达,应用硝酸还原法测定大鼠脑组织NO含量,应用WST-8法检测大鼠脑组织和血清SOD含量、硫代巴比妥酸法检测大鼠脑组织和血清MDA含量。上述方法探讨凉血通瘀方干预脑出血大鼠神经修复及减轻脑损害的作用机制。6应用免疫组化法检测大鼠脑、肠组织CCK-8蛋白表达,观察凉血通瘀方对脑出血大鼠脑肠肽CCK-8的影响。结果:1脑出血模型建立,造模组与正常组、假手术组比较均出现行为学评分明显升高(P0.01),脑组织形态学染色见类圆形血肿区。假手术组行为学评分为0分,未引起神经功能缺损,脑组织形态学染色未见血肿区。2行为学评分及脑组织血肿含量、含水量测定结果2.1行为学评分:造模各组与正常组、假手术组比较均出现不同程度神经功能缺损(P0.01)。随时间推移,造模各组评分逐渐下降。用药3d、5d凉血通瘀组Logna评分均低于模型组(P0.05)。用药5d凉血通瘀组、通腑泻热组平衡木评分低于模型组(P0.05)。提示凉血通瘀方、通腑泻热方均能改善脑出血大鼠神经功能缺损情况,其中凉血通瘀方的效果更为明显。2.2脑组织血肿含量测定,模型组和用药组在1d血肿含量相似(P0.05);3d后凉血通瘀组血肿含量低于模型组脑(P0.05);5d凉血通瘀组、凉血散瘀组均低于模型组(P0.01,P0.05),其中凉血通瘀组血肿减少更为明显(P0.01)。提示凉血通瘀方、凉血散瘀方均可促进血肿消散,凉血通瘀方效果更为明显。2.3脑组织含水量测定,用药1d造模各组大鼠脑组织含水量均明显高于假手术组(P0.01,P0.05)。3d模型组大鼠含水量明显高于假手术组(PC0.01),各用药组脑含水量均明显低于模型组(P0.01),凉血通瘀组低于凉血散瘀组(P0.05)。5d后各用药组含水量均明显低于模型组(P0.01),凉血通瘀组含水量低于通腑泄热组和凉血散瘀组(P0.05,P0.01)。提示凉血通瘀方、通腑泻热方、凉血散瘀方均能不同程度减轻脑水肿,凉血通瘀方效果最明显。3排便情况观察及肠道功能检测结果3.1排便情况观察,模型组大鼠排便总粒数、黑便粒数均明显少于假手术组(P0.01),提示脑出血后出现排便减少。凉血通瘀组黑便所占百分比明显高于模型组(P0.01),且黑便粒数及所占百分比高于凉血散瘀组(P0.01)。通腑泻热组排便总粒数、黑便粒数及所占百分比均明显高于模型组(P0.01),且明显高于凉血通瘀组和凉血散瘀组(P0.01)。提示凉血通瘀方、熟大黄均能促进排便,改善脑出血后便秘情况,其中熟大黄单方排便作用更为明显。3.2肠道活力检测,各时间点正常组与假手术组肠段收缩频次、振幅及肠道活力值均明显高于模型组(P0.01),提示脑出血后肠道活力下降。模型组和各用药组肠道活力值在3d、5d后逐渐增加,凉血通瘀组肠道活力值增高明显,通腑泻热组次之,两组肠道活力值均高于模型组和凉血散瘀组(P0.05,P0.01)。提示凉血通瘀方、熟大黄均能增加肠道活力、促进肠道蠕动。4脑损伤修复及脑保护相关指标(NGF、nNOS、NO、SOD、MDA)检测结果4.1脑组织NGF表达,不同时间点凉血通瘀组NGF表达高于模型组、凉血散瘀组(P0.05,P0.01),且在用药3d高于通腑泻热组(P0.05)。提示凉血通瘀方可增强脑组织NGF表达。4.2脑组织nNOS表达,各时间点模型组nNOS含量表达高于假手术组(P0.05)。3d凉血通瘀组nNOS含量表达低于模型组(P0.05)。5d凉血通瘀组、通腑泻热组和凉血散瘀组nNOS含量表达均低于模型组(P0.01,P0.05)。大鼠脑组织NO含量比较,用药3d模型组明显高于假手术组(P0.01);凉血通瘀组、通腑泻热组、凉血散瘀组明显低于模型组(P0.01)。用药5d凉血通瘀组、通腑泻热组明显低于模型组(P0.01,P0.05),其中凉血通瘀组NO含量最低(P0.05)。上述结果提示各用药组均可减轻nNOS表达、减少NO含量,凉血通瘀方效果最明显。4.3大鼠脑组织SOD活力比较,用药1d、3d凉血通瘀组、通腑泻热组SOD活力均高于模型组(P0.05,P0.01)。5d凉血通瘀组高于模型组(P0.05)。大鼠血清SOD酶活力比较,用药3d凉血通瘀组高于模型组和凉血散瘀组(P0.05,P0.01)。提示凉血通瘀方、通腑泻热方均可增强SOD活力,凉血通瘀方效果更为明显。4.4大鼠脑组织MDA含量比较,凉血通瘀组在用药1d、3d、5d均低于模型组(P0.05)。通腑泻热组在用药1d、3d低于模型组(P0.05,P0.01)。凉血散瘀组在3d明显低于模型组(P0.05)。大鼠血清MDA含量比较:用药3d凉血通瘀组、通腑泻热组均低于模型组(P0.01);5d各用药组血清MDA含量均低于模型组(P0.05)。提示各用药组均可减少过氧化物MDA含量,凉血通瘀方效果最为明显。5脑组织、肠组织CCK-8表达结果5.1脑组织CCK-8表达,用药1d通腑泻热组、凉血散瘀组CCK-8表达高于假手术组、模型组(P0.01,P0.05),其中通腑泻热组表达最高,提示在1d通腑泻热方可明显促进血肿周围CCK-8蛋白表达。用药3d凉血通瘀组CCK-8表达最高(P0.05)。在5d各用药组CCK-8表达均明显高于模型组(P0.01),其中凉血通瘀组最高(P0.05)。5.2肠组织CCK-8表达,1d凉血通瘀组高于假手术组、模型组、凉血散瘀组(P0.05,P0.01)。3d凉血通瘀组最高,通腑泻热组次之,均高于假手术组、模型组和凉血散瘀组(P0.05,P0.01)。结论:1脑出血大鼠自体尾动脉血注入法造模成功。2凉血通瘀方、通腑泻热方均能改善脑出血大鼠神经功能缺损情况,其中凉血通瘀方的效果更为明显。3凉血通瘀方和通腑泻热方均可促进排便,增加脑出血大鼠肠道活力值,大黄制剂(通腑泻热组)具有更显著的通便作用,二者皆可改善脑出血大鼠肠道功能障碍,增加肠道蠕动。4凉血通瘀方、通腑泻热方、凉血散瘀方皆可不同程度降低继发性脑损害相关指标nNOS表达,减轻NO对脑组织的神经毒性作用。同时,均可不同程度加强SOD酶活力表达,使其有效发挥清除自由基、抗氧化作用;并减少脂质过氧化物MDA产生,减轻有害物质的沉积从而达到促进脑组织修复、发挥脑保护作用,其中凉血通瘀方效果更为明显。5凉血通瘀方和通腑泻热方均可干预脑出血大鼠脑组织、肠组织CCK-8表达,其中凉血通瘀方效果更为明显。
【学位授予单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 顺顺;;5大招数，手脚气血通[J];家庭生活指南;2007年03期

2 顺顺;;5大招数 手脚气血通[J];中华养生保健;2009年04期

3 蔡恒,王伯章;活血通脑汤治疗脑震荡的疗效观察[J];广东医学院学报;1997年03期

4 王秀芬;高增升;;芪血通络片治疗脑梗死50例疗效观察[J];中国中医急症;2005年11期

5 刘杨;;生血通便颗粒治疗津血亏虚型便秘的疗效与机制研究[J];中医药导报;2009年03期

6 黄艳;赵凤鸣;吴勉华;周学平;杨妍华;王昀;梁晓雯;王明艳;;凉血通淤方对过氧化氢致血管内皮细胞损伤的保护作用[J];时珍国医国药;2010年12期

7 阳焕军;;血通注射液治疗急性脑梗死疗效观察[J];实用医技杂志;2007年16期

8 于邦国;自拟养血通闭汤治疗闭经18例[J];中国中医药科技;1999年03期

9 姚克裘，，周曾绮，陈敏先;血通胶囊对老年高脂血症影响的临床研究[J];上海中医药杂志;1995年01期

10 刘焕荣;;刺血通经健脑法治疗脑性瘫痪210例临床观察[J];中医杂志;2000年10期

中国重要会议论文全文数据库 前3条

1 瞿显友;;土家族习用药材血通的整理研究[A];2002全国土家族苗族医药学术会议论文专辑[C];2002年

2 陈辉;罗钢;白雪;杨思进;;蛭龙活血通瘀胶囊对金黄地鼠阿司匹林抵抗的干预[A];2011年中华中医药学会心病分会学术年会暨北京中医药学会心血管病专业委员会年会论文集[C];2011年

3 陶源;邹永根;彭忠毅;杨杰翔;罗成;;蛭龙活血通淤胶囊对断指再植术后患指血液流变学的影响[A];中华医学会第10届全国显微外科学术会议暨世界首例断肢再植成功50周年庆典论文集[C];2013年

中国重要报纸全文数据库 前1条

1 沈金凤;春梳头气血通[N];中国医药报;2004年

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 林庆宾;活血通督汤促进兔脊髓缺血再灌注损伤修复的作用及机制[D];福建中医药大学;2016年

中国硕士学位论文全文数据库 前8条

1 张纪浩;活血通督汤对脊髓缺血再灌注损伤微环境炎症反应的作用机制研究[D];福建中医药大学;2015年

2 唐龙;蛭龙活血通瘀胶囊对断指再植术后血管危象防治的剂量及安全性临床研究[D];西南医科大学;2016年

3 刘云芳;从脑肠互动研究凉血通瘀方对脑出血大鼠的神经保护机制[D];南京中医药大学;2017年

4 罗钢;蛭龙活血通瘀胶囊治疗急性脑梗塞的临床及实验研究[D];泸州医学院;2008年

5 吴英;蛭龙活血通瘀胶囊对局灶性脑缺血大鼠微血管保护的实验研究[D];泸州医学院;2013年

6 陈晓琴;蛭龙活血通瘀胶囊对血管性痴呆大鼠的干预[D];泸州医学院;2010年

7 姚蓝;血通灵冲剂抗肿瘤侵袭转移相关机制研究[D];沈阳药科大学;2008年

8 廖瑶;蛭龙活血通瘀胶囊对心肌梗死模型大鼠心肌重塑的影响[D];泸州医学院;2014年

本文编号：1308477