通络治痹汤对兔膝骨关节炎模型关节软骨及血清IL-1β、TNF-α含量影响的实验研究
本文关键词：通络治痹汤对兔膝骨关节炎模型关节软骨及血清IL-1β、TNF-α含量影响的实验研究 出处：《南京中医药大学》2017年硕士论文 论文类型：学位论文
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【摘要】：目的:通过对兔膝骨关节炎模型的动物实验研究,证实"通络治痹汤"对于KOA的治疗效果及其对KOA的作用机制,为临床应用通络治痹汤治疗膝骨关节炎提供数据支持。方法:选取40只健康新西兰兔,随机分为通络治痹汤组、藤黄健骨丸组、模型组、空白组,每组10只。除空白组外,其余各组采用改良Hulth法制备兔膝骨关节炎模型后,通络治痹汤组以通络治痹汤颗粒冲剂灌胃,藤黄健骨丸组以藤黄健骨丸溶解液灌胃,空白组、模型组以生理盐水灌胃,中药剂量的确定按陈奇《中药药理研究方法学(第二版)》中的方法,药物组分剂量按成人临床日用量5倍给药,以成人体重以60 kg为标准,兔每日每公斤体重剂量为:(120ml/60kg)×兔体重(kg)计算。每天1次,持续灌胃8周。8周后于实验动物取材,标本处理后采用HE染色后光镜下观察软骨细胞结构及形态的变化,并行软骨Mankin's评分。对于血清用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血清中IL-1β、TNF-α含量的变化。结果:1.空白组关节软骨表面及关节边缘光整,颜色鲜活,无骨赘增生及软骨损坏;光镜下软骨细胞排列整齐,四层结构明显。模型组关节软骨损坏明显,软骨色泽变白,局部可见片状软骨脱落,关节边缘骨赘增生明显;光镜下软骨细胞减少,有细胞簇集现象,潮线紊乱消失。而通络治痹汤组与藤黄组无明显差别,软骨破坏程度及光镜下层次结构较模型组优,比空白组差。2.软骨Mankin's评分结果:通络治痹汤组及藤黄健骨丸组的评分积分明显低于模型组(P0.05);通络治痹汤组、藤黄健骨丸组及模型组与空白组比较,前三者评分积分高(P0.05)。3.ELISA法检测:①IL-1β含量:通络治痹汤组及藤黄健骨丸组血清中IL-1β含量明显低于模型组(*P0.05);通络治痹汤组、藤黄健骨丸组及模型组高于空白对照组(#P0.05)。②TNF-α含量:模型组血清TNF-α含量明显高于通络治痹汤组、藤黄健骨丸组及空白对照组(*P0.05),差异有统计学意义;其中通络治痹汤组及藤黄健骨丸组血清TNF-α含量高于空白对照组(#P0.05)。结论:1.改良Hulth法能成功模拟膝骨关节炎模型。2.炎性因子IL-1β及TNF-α通过诱导关节软骨细胞的损害而致膝骨关节炎发病。3.通络治痹汤能显著降低兔膝骨关节炎模型血清IL-1β及TNF-α含量,通过抑制IL-1β和TNF-α含量,延缓KOA病情进展,发挥其对KOA的治疗作用。
[Abstract]:Objective: to confirm the therapeutic effect of Tongluo Zhibi decoction on KOA and the mechanism of its effect on KOA by experimental study on rabbit knee osteoarthritis model. Methods: 40 healthy New Zealand rabbits were randomly divided into Tongluo Zhibi decoction group, Fuhuang Jiangu pill group, model group and blank group. Except the blank group, the other groups were treated with modified Hulth method to establish rabbit knee osteoarthritis model, Tongluo Zhibi decoction group was treated with Tongluo Zhibi decoction granule. Lianghuang Jiangu pills group was treated with the dissolving liquid of Fuhuang Jiangu pill, the blank group and the model group were perfused with normal saline. The dosage of traditional Chinese medicine was determined according to Chen Qi's method of Pharmacological Research of traditional Chinese Medicine (second Edition). The drug component dose was given 5 times as much as the clinical daily dose of adults, and the adult body weight was 60 kg. The weight dose per kilogram of rabbits was 120 ml / 60 kg / day 脳 1 / kg / kg / kg / day. Once a day for 8 weeks, the samples were taken from the experimental animals. The structure and morphology of chondrocytes were observed by HE staining under light microscope. The IL-1 尾 in serum was detected by Elisa (enzyme linked immunosorbent assay (Elisa)). The change of TNF- 伪 content. Results: 1. In the blank group, the articular cartilage surface and articular edge were smooth, fresh color, no osteophyte proliferation and cartilage damage; Under the light microscope, the chondrocytes were arranged neatly and the four-layer structure was obvious. In the model group, the articular cartilage was damaged obviously, the cartilage color became white, the flake cartilage fell off, and the osteophyte proliferation on the edge of the joint was obvious. Under light microscope, there were fewer chondrocytes, cell cluster, and tidal line disorder disappeared. There was no significant difference between Tongluozhubi decoction group and Fuyangyangyanggroup. The degree of cartilage destruction and the hierarchical structure under light microscope were better than that in the model group. Compared with blank group, the Mankin's score of cartilage: the score of Tongluo Zhibi decoction group and Fuhuang Jiangu pill group was significantly lower than that of model group (P 0.05). Tongluo Zhibi decoction group, Fuhuang Jiangu pill group and model group were compared with the blank group. The content of IL-1 尾 in serum of Tongluo Zhibi decoction group and Fuhuangjianggu pill group was significantly lower than that of model group (3.) the content of IL-1 尾 in serum of Tongluo Zhibi decoction group and Fuhuang Jiangu pill group was significantly lower than that of model group (. P0.05; The content of TNF- 伪 in Tongluo Zhibi decoction group, Fuhuang Jiangu pill group and model group was higher than that in the blank control group. The serum TNF- 伪 content in model group was significantly higher than that in Tongluozhi decoction group. The difference was statistically significant between the Fuhuang Jiangu pill group and the blank control group. The serum TNF- 伪 content in Tongluo Zhibi decoction group and Fuhuang Jiangu pill group was higher than that in the blank control group (#P0.05). ... conclusion:. 1. The modified Hulth method can successfully simulate the knee osteoarthritis model .2.The inflammatory factors IL-1 尾 and TNF- 伪 can induce the damage of articular chondrocytes and induce the pathogenesis of knee osteoarthritis. 3. Tongluo Zhibi decoction. The serum levels of IL-1 尾 and TNF- 伪 were significantly decreased in rabbit knee osteoarthritis model. By inhibiting the contents of IL-1 尾 and TNF- 伪, the progression of KOA was delayed and its therapeutic effect on KOA was given full play.
【学位授予单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5;R-332
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，本文编号：1386483
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