HBx基因在小鼠肝癌发生中的作用机制研究

发布时间：2024-06-28 00:55

　　目的:利用课题组前期构建成功并长期稳定表达HBx的小鼠模型,探讨HBx导致免疫功能正常小鼠肝癌发生中的作用机制。方法:将转染了HBx的肝前体细胞(Hepatic progenitor cells,HPCs)通过肝门静脉注射入小鼠体内,构建能长期在肝脏稳定表达HBx的小鼠模型,分别于术后30d、90d、180d、360d收取小鼠肝脏组织,RT-PCR、Western blot和免疫组化法验证HBx是否成功转入肝脏并能稳定表达;RT-PCR和Western blot检测JAK2/STAT3信号通路和HIPPO信号通路在HBx的影响下相关因子的表达。结果:成功构建能长期稳定表达HBx的小鼠模型并在常规饲养360d后发展成为肝癌,HBx在小鼠肝脏组织内处于稳定高表达状态,不随时间变化;在实验组小鼠转入HBx后,JAK2和STAT3直到肝癌发生仍未出现有统计学意义的改变;而HIPPO信号通路相关因子在30d时即出现MST1和p-YAP1表达上调,YAP1和p-MST1表达下调的改变并维持这种表达状态直至肝癌的发生。结论:HBx是导致小鼠肝癌的发生的原因之一,导致肝癌发生的机制可能与其长期持续影响...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1HBx在肝前体细胞中的表达情况

重庆医科大学硕士研究生学位论文21片切片滴加100μl苏木素染色液，染核5-8min，染色完成后自来水洗掉多余染液，最后1%盐酸乙醇分化数秒，0.6%氨水反蓝，并用自来水反复清洗；（5）伊红染细胞质：切片浸入伊红染液中染色1-3min，染色完毕后自来水洗掉多余染液；（6）脱水封片....

图2小鼠肝癌鉴定

重庆医科大学硕士研究生学位论文22A、B：Westernblot检测三种肝前体细胞中HBx蛋白的表达情况与相对表达量；C：RT-PCR检测三种肝前体细胞HBxmRNA相对表达量。**表示P＜0.01，与14-19细胞、EGFP-14-19细胞组相比较。3.2小鼠肝癌组织鉴定在饲养....

图3HBx在小鼠肝脏中的表达情况

重庆医科大学硕士研究生学位论文23图3HBx在小鼠肝脏中的表达情况Fig3ExpressionofHBxinmouselivertissueA、B：Westernblot检测小鼠肝脏组织中HBx蛋白的表达情况与相对表达量；C：RT-PCR检测小鼠肝脏组织中HBxmRNA相对表达量....

图4HBx对JAK2/STAT3信号通路相关因子的表达影响

重庆医科大学硕士研究生学位论文29图4HBx对JAK2/STAT3信号通路相关因子的表达影响Fig4EffectofHBxontheexpressionofrelatedfactorsinJAK2/STAT3signalingpathway1：NS组；2:EGFP-14-19组；....

本文编号：3996202