MiR-152-3p介导TGFA调控甲状腺乳头状癌的机制研究

发布时间：2024-06-27 23:10

　　目的:本研究旨在确定miR-152-3p是否在甲状腺乳头状癌细胞(papillary thyroid carcinoma,PTC)的生长中起到关键作用,并探讨其靶向关系。方法:miR-152-3p的表达水平由实时荧光定量聚合酶链反应(Realtime-PCR)的方法进行检测,研究对象是20对PTC组织和癌旁甲状腺组织。转染miR-152-3p模拟物(mimics)和miR-152-3p抑制物(inhibitor)至PTC细胞株(KTC-1)中,设置阴性对照组(Negative control),PCR检测miR-152-3p各分组的转染效率。通过细胞计数试剂盒CCK-8法,能够检测出PTC细胞株的增殖能力,细胞迁移能力则应用细胞划痕实验中划痕宽度的比值来反映,采用Transwell小室法对各组PTC细胞的侵袭能力进行实验。经靶向预测筛得TGFA(Transforming growth factor-α)为miR-152-3p靶点,双荧光素酶报告基因检测TGFA与mi R-152-3p是否互补结合,行免疫印迹实验(Western blot)和PCR(Polymerase Chain Re...

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
1.前言
2.材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 样本的收集
        2.1.2 试剂及其配置
        2.1.3 主要仪器
    2.2 方法
        2.2.1 细胞培养及转染
        2.2.2 实时聚合酶链式反应(Realtime-PCR)
        2.2.3 细胞增殖能力检测
        2.2.4 细胞划痕实验
        2.2.5 细胞侵袭实验
        2.2.6 免疫印迹实验(Western blot)
        2.2.7 双荧光素酶报告基因检测
        2.2.8 统计学分析
3.结果
    3.1 组织中mi R-152-3p和 TGFA的表达
    3.2 细胞转染效率的检测
    3.3 mi R-152-3p对 KTC-1 细胞增殖的影响
    3.4 mi R-152-3p对 KTC-1 细胞迁移的影响
    3.5 mi R-152-3p对 KTC-1 细胞侵袭的影响
    3.6 TGFA作为mi R-152-3p靶点的分析
    3.7 TGFA对 PTC细胞增殖和侵袭的影响
4.讨论
5.结论
参考文献
综述
    参考文献
附录一
附录二
致谢



本文编号：3996077