特发性膜性肾病患者肾组织THSD7A及其血清抗体检测的临床意义

发布时间：2018-04-17 21:12

本文选题：膜性肾病 + 特发性膜性肾病　；参考：《河北医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：目的:膜性肾病(membranous nephropathy,MN)作为肾病综合征的一种常见病理类型,在成人较常见,可分为特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)和继发性膜性肾病(secondary membranous nephropathy,SMN)。目前认为特发性膜性肾病是与足细胞相关的自身免疫性疾病,在一定条件下诱导足细胞损伤和凋亡,从而导致蛋白尿的形成是其主要发病机制。1型血小板反应蛋白7A域(thrombospondin type-1domain-containing 7A,THSD7A)最初认为其表达于胎盘血管内皮细胞。Tomas等发现62例特发性膜性肾病患者有15例患者的血清中存在一种新的不同于人磷脂酶A2受体(PLA2R)的循环抗体,命名为1型血小板反应蛋白7A域(THSD7A),并且证实THSD7A是参与成人IMN发病的第二个抗原。本研究旨在观察THSD7A在IMN患者肾组织内的表达情况,检测IMN患者血标本中THSD7A的表达水平,探讨其在IMN发病中的作用机制。方法:1研究对象选取自2014年10月至2015年6月在我院(定州市人民医院)肾内科住院治疗的肾小球疾病患者60例,其中男性33例,女性27例,平均年龄(42.6±15.8)岁。分组:(1)IMN组40例,其中男性16例,女性24例,平均年龄(41.6±11.2)岁;(2)SMN组10例,男性5例,女性5例,平均年龄(36.1±14.0)岁,其中乙肝病毒相关性膜性肾病(Hepatitis b virus associated with membranous nephropathy,HBV-MN)7例,男性4例,女性3例,平均年龄(43.6±11.1)岁;V型狼疮肾炎(Class V lupus nephritis,LN-V)3例,男性1例,女性2例,平均年龄(38.9±18.2)岁;选取微小病变肾病(Minimal change disease,MCD)10例,男性6例,女性4例,平均年龄(30.2±16.5)岁,作为本研究课题对照组,所有患者临床上均未使用激素及免疫抑制剂治疗,所有入选者均已签署知情同意书,并经医院伦理委员会讨论通过。2收集一般资料包括患者性别、年龄、身高、体重、血压、现病史、既往史等。3收集标本收集肾穿刺当日清晨空腹静脉血5ml,3500 r/min离心10 min(离心半径13.5cm),取上清液保存在-80℃备检。肾组织经甲醛一醋酸一乙醇固定液(FAA)固定24 h,梯度乙醇脱水,二甲苯中透明,浸蜡包埋备用。4肾组织THSD7A的检测入组所有患者肾组织均采用免疫组织化学法进行THSD7A的染色。由北京博奥森生物技术有限公司生产的试剂盒进行检验。根据试剂盒提供的试验操作步骤进行免疫组织化学染色。结果判定:沿肾小球基底膜呈暗棕色颗粒样沉积为阳性。阴性对照:用PBS代替一抗作为阴性对照,只有加入PBS阴性并且加入一抗阳性者才判断为阳性。5血清THSD7A抗体(THSD7A-AB)的检测采用酶联免疫吸附法,试剂盒购自上海西唐生物科技有限公司,依据说明书进行各步骤。6临床生化指标检测采用本院全自动生化分析仪测定血清白蛋白、血肌酐、尿素氮、尿酸、总胆固醇、自身抗体、乙肝五项、24 h尿蛋白量等。7统计学处理数据统计采用SPSS18.0软件进行分析,实验结果计量资料用均数±标准差(sx±)表示,计数资料采用率或构成比表示,正态分布资料多组间均数比较采用方差分析,相关性检验采用直线相关分析,以P0.05为差异有统计学意义。结果:1 MN患者的一般临床资料各组间在年龄、性别构成、收缩压、体重指数、尿蛋白方面的差异无统计学意义(P0.05)。2肾组织中THSD7A的表达THSD7A阳性表现为在肾小球呈暗棕色沿毛细血管袢颗粒样沉积,各组阳性表达部位相同。IMN组THSD7A阳性例数为9例,检测总数为40例,比值为22.5%,明显高于SMN组1例,检测总数为10例(10%,HBV-MN 1例)阳性,差异有统计学意义(P0.05),而MCD组未见表达,见图1。3 IMN患者血清THSD7A-AB的表达该抗体检测结果显示,14例(35%)IMN患者血清抗THSD7A抗体阳性,且滴度较高(平均为108.38ng/ml),2例(20%)SMN患者血清抗THSD7A抗体阳性,平均滴度为19.28ng/ml,微小病变组未检测到该抗体,在血液中THSD7A抗体的阳性率明显高于其余2组,差异有统计学意义(P0.05)。4 IMN患者肾组织THSD7A及其血清抗体水平与临床指标的相关性血清THSD7A-AB阳性患者血清白蛋白较低(P0.05),尿蛋白量较高(P0.05),总胆固醇、Scr两组间比较差异无统计学意义(P0.05),见表2。相关分析表明,IMN患者肾组织THSD7A阳性率与白蛋白、尿蛋白量相关(r=-0.286,P0.001;r=0.564,P0.001),与总胆固醇、Scr无相关性(r=0.564,P=0.352;r=0.235,P=0.187);血清THSD7A-AB滴度与尿蛋白量、总胆固醇呈正相关(r=0.289,P=0.035;r=0.352,P=0.006),与白蛋白负相关(r=0.465,P0.02),与Scr无相关(r=0.785,P=0.452),肾组织THSD7A阳性与血清THSD7A-AB呈正相关(r=0.469,P=0.023)。结论:1证实THSD7A与IMN的发生有关,是后者致病抗原之一。2通过检测MN患者血清THSD7A抗体可以评估病情,了解预后。
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【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R692

【参考文献】