桃花的质量控制方法研究

发布时间：2018-04-18 00:35

本文选题：桃花 + 芦丁　；参考：《河北医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：桃花来源于蔷薇科植物桃Prunus persica(L.)Batsch或山桃Prunus davidiana(Carr.)Franch.的花。《神农本草经》及《中华本草》等著作中均有记载和论述,但未收载于任何质量标准中,其质量难以有效控制。本研究对11批桃花药材进行了薄层色谱鉴别,对有效成分芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷进行了含量测定,在此基础上对桃花药材进行了高效液相色谱指纹图谱分析,为桃花药材质量标准的制定奠定基础。目的:建立桃花药材的薄层色谱鉴别、含量测定及指纹图谱分析方法,为桃花药材质量控制提供依据。方法:1薄层色谱方法的建立试验了多种提取溶剂及提取方式对目标成分斑点的影响,选择适宜的薄层板吸附剂、展开条件及显色条件等。2含量测定方法的建立考察不同提取条件对桃花药材中芦丁、金丝桃苷和异槲皮苷的影响,选择三种目标有效成分含量测定结果相对较高的提取条件。筛选最佳检测波长,流动相的组成、比例。绘制目标有效成分的标准曲线。验证建立的测定方法的精密度、重复性、稳定性和回收率。采用逐步稀释的方法测定三种目标有效成分的检测限。采用3个不同厂家的色谱柱、两台不同厂家的高效液相色谱仪分别测定3批桃花药材的含量,验证测定方法的耐用性。在选定的液相色谱条件下,测定11批桃花药材中三种目标有效成分的含量。3指纹图谱方法的建立提取条件和色谱条件的选择同含量测定项下。对建立的测定方法进行精密度、重复性和稳定性验证试验。在选定的液相色谱条件下,记录11批次桃花药材的指纹图谱并对其进行相似度评价。结果:1薄层色谱法取桃花药材粉末1.0g,加甲醇10ml,超声处理10min,滤过,取续滤液。以乙酸乙酯-甲酸-水(30:3:2)为展开剂,以硅胶gf254为薄层板吸附剂,点样量为2μl,显色剂为5%三氯化铝乙醇溶液,显色条件为在105℃加热3分钟,置紫外光灯(365nm)下检视。样品色谱与对比药材色谱和对照品色谱在相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。2含量测定方法25倍70%甲醇超声提取30min,滤过,取续滤液。采用waterssunfirec18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:以乙腈为流动相a,0.1%磷酸水溶液为流动相b,先以流动相a-流动相b(14:86)等度洗脱,待异槲皮苷峰洗脱完毕后进行线性梯度洗脱(0~5min,14%a→60%a;5~20min,60%a;20~25min,60%a→14%a);检测波长为353nm;流速1.0ml·min~(-1);柱温为30℃,进样量为20μl。在此色谱条件下,理论板数按异槲皮苷峰计算应不低于5000。芦丁在1.00~201.72μg·mL~(-1)范围内,线性关系良好;金丝桃苷在1.00~200.54μg·mL~(-1)范围内,线性关系良好;异槲皮苷在1.00~201.72μg·mL~(-1)范围内,线性关系良好。精密度良好,相对标准偏差分别为1.9%、1.9%、1.3%。重复性良好,相对标准偏差分别为1.4%、1.8%、1.2%。样品在24h内稳定,相对标准偏差分别为1.9%、1.9%、1.4%。样品中芦丁的平均回收率为101.4%,相对标准偏差为3.8%;金丝桃苷的平均回收率为102.2%,相对标准偏差为2.8%;异槲皮苷的平均回收率为102.7%,相对标准偏差为2.0%。三种目标有效成分的检测限分别为0.10、0.10、0.10μg。色谱柱耐用性和仪器耐用性均较好。所选桃花药材中三种目标有效成分的含量测定结果范围分别为0.053%~0.29%、0.030%~0.082%、0.11%~0.32%。3指纹图谱方法25倍70%甲醇超声提取30min,滤过,取续滤液。采用sunfirec18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈为流动相a,以0.1%磷酸水溶液为流动相b,先以a-b(14:86)等度洗脱,待异槲皮苷峰洗脱完毕后进行线性梯度洗脱(0~20min,14%a→20%a;20~40min,20%a→60%a;40~45min,60%a→14%a),流速为1.0ml·min~(-1),检测波长为353nm,柱温为30℃,进样量为20μl。方法精密度良好,相对保留时间和相对峰面积的相对标准偏差分别为0.08%~1.36%和1.43%~2.72%。重复性良好,相对保留时间和相对峰面积的相对标准偏差分别为0.07%~0.62%和1.45%~2.14%。样品在24 h内稳定性良好,相对保留时间和相对峰面积均无显著差异,其相对标准偏差分别为0.08%~1.36%和1.43%~2.72%。建立了桃花药材的指纹图谱分析方法,并对11批次不同基源、不同产地的桃花药材进行了的指纹图谱检测。运用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2.0版”(国家药典委员会开发)对植物桃花药材和山桃花药材的指纹图谱分别进行了分析比较,并进行了相似度计算和偏差分析。结论:1薄层色谱该方法所得色谱斑点清晰可辨,分离效果良好,方法耐用性较好,可对桃花药材进行有效鉴别。2含量测定建立了高效液相色谱法同时测定桃花药材中芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷的含量,该方法准确度较高,精密度、重复性、稳定性良好,可用于评定桃花药材的质量,为桃花药材的标准制定提供数据支持。3指纹图谱建立了桃花药材的高效液相色谱指纹图谱分析方法,测得植物桃花和山桃花的指纹图谱数据,并对其相似度进行评价,该方法可作为桃花药材质量评定的参考。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R284.1

【参考文献】