针刀联合持续被动运动对兔胫骨平台骨折术后关节功能障碍影响的实验研究

发布时间：2020-10-31 16:41

　　 目的本研究运用外科手术法建立兔胫骨平台骨折内固定术后模型,采用单纯针刀、单纯CPM以及针刀联合CPM干预,并建立模型组与空白组进行对照,观察家兔体重、患膝关节活动度、患膝关节直径(肿胀程度)、患膝关节关节液内炎性因子、膝周韧带组织形态学、纤维化程度以及韧带组织中MMP-13、TIMP-1含量的变化,验证单纯针刀、单纯CPM以及针刀联合CPM干预治疗兔胫骨平台骨折内固定术后关节粘连的有效性,探讨其中的作用机制,为针刀治疗本病提供实验依据。方法将30只6个月月龄健康普通级新西兰大白兔,在造模前运用随机数字表法将30只家兔选出6只为空白组,其余24只置于膝关节被动屈伸适应性训练3d,然后进行造模。造模成功后采用随机数字表法随机分为四组,分别为模型组(即SED组),针刀组,CPM组,针刀+CPM组。造模成功后SDE组无任何干预,针刀组于造模一周后,行针刀松解术治疗,每周1次,治疗4周,共4次,CPM组于造模后第1d开始进行干预,被动运动角度40°~110°,针刀+CPM组结合针刀组和CPM组的治疗方法进行治疗。各组家兔分别于术前及术后第7、14、21、28天进行体重监测、并于术前及术后第1、7、14、21、28天进行膝关节活动度和肿胀程度的测量。并在治疗结束及上述测量完成后,抽取五组家兔右膝关节关节液,然后采用空气栓塞法将其处死,取右膝关节内侧副韧带和外侧副韧带,用剪刀去除韧带周边结缔组织,标本采集后将每份标本剪成合适大小,置于中性固定液中固定,进行HE染色,马松三色染色观察韧带组织的形态结构以及纤维化程度,最后通过免疫组化法检测MMP-13、TIMP-1的表达量。结果1.除开空白组,其余四组家兔均在实验开始后第三周逐渐开始恢复体重,直至实验结束,这四组体重数据之间并无统计学意义,但是与空白组家兔体重具有统计学差异(n=6,p0.01)。与空白组(n=6)相比,造模后被动最大屈曲角、被动最大伸长角、关节活动度明显降低或升高(p0.01);与SED组(n=6)相比,干预14天后,CPM组(n=6)和针刀+CPM组(n=6)被动最大伸长角和关节活动度显著增加,被动最大屈曲角显著降低(p0.05;p0.01);干预第28天,针刀组(n=6)关节活动度较模型组明显改善(p0.05),针刀+CPM组关节活动度较CPM组及针刀组明显增加(p0.05)。与SED组相比(n=6),从干预第14天开始,其他组关节肿胀程度均有显著性升高(p0.01)。与其他组相比,从干预的第21天开始针刀+CPM组(n=6)有显著性差异(p0.01)。干预第28天,各组关节肿胀情况均有显著性差异(p0.01)。2.膝关节液中IL-1β、IL-6以及TNF-α的表达水平在SED组家兔右膝关节中较空白组家兔右膝关节中显著增加(n=6,p0.01)。膝关节液中IL-1β、IL-6以及TNF-α的表达水平在针刀组、CPM组家兔右膝关节中较SED组家兔右膝关节中显著减少(n=6,p0.05)。针刀组与CPM组之间患膝(右膝)关节膝关节液中IL-1β、IL-6以及TNF-α的表达水平未见明显变化。针刀+CPM组明显降低患膝(右膝)关节膝关节液中IL-1β、IL-6以及TNF-α的表达水平,与SED组,CPM组和针刀组相比显著降低(n=6,p0.01)。3.HE染色和马松三色染色观察干预前后内侧副韧带和外侧副韧带的变化。HE染色显示,造模后,兔内外侧副韧带均无干预,韧带纤维粗大、紊乱,韧带细胞肿胀,韧带细胞核变形,间质增宽,纤维化。治疗后上述症状均有不同程度的缓解。马松三色染色显示,兔内侧副韧带和外侧副韧带的弹性纤维(红色)在建模后明显减少,而胶原纤维(蓝色)明显增加。内侧副韧带较外侧副韧带严重。干预后,可以看到弹性纤维有不同程度的增加。4.与空白组(n=6)相比,SED组韧带标本中MMP-13表达水平显著升高,TIMP-1表达水平显著升高(n=6,p0.01)。经针刀和CPM治疗后,针刀组、CPM组以及针刀+CPM组韧带组织中MMP-13和TIMP-1的表达水平明显低于SED组(n=6,p0.01)。针刀组与CPM组之间无显著性差异。针刀+CPM组、空白组和针刀组、CPM组之间在部分韧带组织中蛋白表达量存在显著性差异(n=6,p0.05)。针刀+CPM组与空白组无显著性差异。结论1.针刀联合早期CPM治疗可明显改善造模后家兔的关节活动度以及关节肿胀程度,单纯的两种疗法也有效果,但是不如两种联合使用明显。2.针刀联合早期CPM治疗可明显降低模型家兔右膝关节中的炎症情况,单纯的两种疗法也有效果,但是不如两种联合使用明显。3.针刀联合早期CPM治疗可明显改善韧带组织的形态结构和纤维化程度,而其机制有可能是对周围韧带组织松解,刺激到某条机械刺激通路,以良性调节韧带组织中MMPs和TIMPs的含量,改善了膝周韧带的纤维化,以及调节关节内炎症因子的分泌,从而起到保护关节,恢复关节正常活动的作用。
【学位单位】：湖北中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2020
【中图分类】：R245
【部分图文】：

湖北中医药大学2020届硕士学位论文6离，即膝关节直径[33]。为了保证实验的准确性，在测量过程中，两个检验员独立地进行数据测量，并对每个肢体重复测量三次。主考人对彼此的分数视而不见。报告的值是两个审查员所测量的六个测量值的平均值。3.2统计方法采用SPSS25.0统计软件进行统计分析，计量资料采用均值±标准差表示。采用单ANOVA分析，若差异具有统计学意义，再进行组间两两比较，采用LSD-t检验。设α=0.05，p<0.05认为差异具有统计学意义。4结果4.1体重众所周知，关节红肿和体重减轻通常出现在关节炎的发病期;体重变化是评估疾病过程和动物压力的参数之一。表1各组家兔干预前后体重变化（单位：kg）组别n（只）0天7天14天21天28天空白组62.97±0.273.05±0.243.11±0.213.16±0.193.23±0.20SED组62.98±0.252.51±0.15*2.32±0.12*2.45±0.17*2.68±0.23*针刀组62.97±0.292.49±0.17*2.45±0.14*△2.61±0.23*△2.88±0.21*CPM组62.98±0.232.50±0.14*2.46±0.12*△2.62±0.21*△2.86±0.21*针刀加CPM组62.98±0.272.48±0.18*2.47±0.13*△2.66±0.19*△2.91±0.15*注：*与同期空白组比较,p<0.01;△与同期空白组比较，p<0.05图1各组家兔干预前后体重变化注：*与同期空白组比较,p<0.01;△与同期SED组比较，p<0.05

针刀联合持续被动运动对兔胫骨平台骨折术后关节功能障碍影响的实验研究9图2各组家兔干预前后关节活动度的变化注：*与同期空白组比较,p<0.01;#与同期SED组比较，p<0.05;△与同期SED组比较，p<0.01;▲与同期针刀+CPM组比较，p<0.05由表2、3、4和图2结果可见，与空白组（n=6）相比，造模后被动最大屈曲角、被动最大伸长角、关节活动度明显降低或升高（p<0.01）。与SED组（n=6）相比，干预14天后，CPM组（n=6）和针刀+CPM组（n=6）被动最大伸长角和关节活动度显著增加，被动最大屈曲角显著降低（P<0.05；p<0.01）。干预第28天，针刀组（n=6）关节活动度较模型组明显改善（p<0.05），针刀+CPM组关节活动度较CPM组及针刀组明显增加（p<0.05）。总而言之，造模后家兔患膝会出现明显的关节屈伸受限，关节活动度明显下降，CPM组、针刀+CPM组在治疗第二周后关节活动度出现明显改善，而针刀组在治疗第四周后才出现明显改善。4.3膝关节直径

湖北中医药大学2020届硕士学位论文10表5除开空白组其余4组家兔干预前后关节肿胀程度变化（单位：cm）组别n（只）1天7天14天21天28天SED组60.3270±0.01200.2058±0.00480.1728±0.00360.1742±0.0021#0.1688±0.0043△针刀组60.3195±0.00590.2093±0.00470.1818±0.0028*0.1747±0.0026#0.1533±0.0047■CPM组60.3232±0.0090.2088±0.00590.1851±0.0035*0.1735±0.0041#0.1442±0.0039▲针刀加CPM组60.3234±0.0140.2063±0.00460.1814±0.0024*0.1644±0.00350.1219±0.0069□注：*与同期SED组比较，p<0.01;#与同期针刀+CPM组比较，p<0.01;△▲■□与同期各组相比，p<0.01图3除开空白组其余四组家兔干预前后关节肿胀程度的变化注：*与同期SED组比较，p<0.01;#与同期针刀+CPM组比较，p<0.01;△▲■□与同期各组相比，p<0.01由表5和图3结果可见，与SED组相比（n=6），从干预第14天开始，其他组关节肿胀程度均有显著性升高（p<0.01）。与其他组相比，从干预的第21天开始针刀+CPM组（n=6）有显著性差异（p<0.01）。干预第28天，各组关节肿胀情况均有显著性差异（p<0.01）。5讨论通过以上实验的结果可知，SED组家兔出现了体重减轻，关节肿胀以及关节活动度降低等现象，均提示其因为手术而导致了关节炎症及粘连的发生，并与我们之前推断情况是一致的，而针刀组、CPM组和针刀+CPM组各家兔经过干预后对应的症状得到明显的缓解。
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本文编号：2864212