耐力运动对老年小鼠心肌T-钙粘蛋白的影响及其心肌保护效应研究

发布时间：2020-11-21 15:43

　　 目的:通过探讨耐力运动对老年小鼠心肌组织T-钙粘蛋白及其配体脂联素和下游相关蛋白分子表达的影响,阐明耐力运动对老龄心肌保护作用的机制及探讨T-钙粘蛋白在其中的价值。方法:本实验分为两部分,第一部分探讨耐力运动对老年小鼠心肌组织T-钙粘蛋白表达及脂联素/T-钙粘蛋白/AMPK级联的影响。将30只17月龄C57雄性老年小鼠随机分为老年运动组及老年对照组,每组各15只。老年运动组进行12周耐力运动,老年对照组采取常规饲养,无运动干预,另取15只2月龄C57雄性小鼠纳入为青年对照组,常规饲养,无运动干预。采用免疫组化法观测老年运动组,老年对照组及青年对照组小鼠心肌组织T-钙粘蛋白及其配体脂联素的分布和阳性表达,采用免疫印迹检测心肌组织T-钙粘蛋白、脂联素的蛋白表达及AMPK磷酸化水平。第二部分探讨耐力运动对老年小鼠心肌的保护作用。采用免疫印迹检测三组小鼠心肌组织促凋亡蛋白分子Bax、Caspase-9,抑凋亡蛋白分子Bcl-2的表达;采用免疫组化观测各组心肌组织抑自噬蛋白p-mTOR的细胞定位和阳性表达,免疫印迹检测促自噬蛋白Beclin-1的表达,抑自噬蛋白mTOR的活化水平;免疫印迹检测各组心肌组织纤维化相关蛋白TGF-β1、CollagenⅠ、CollagenⅢ的表达,天狼猩红染色观察各组心肌纤维化程度。结果:T-钙粘蛋白定位于心肌细胞胞膜及血管内皮,脂联素定位于心肌细胞胞膜、胞浆及血管内皮;免疫组化及免疫印迹结果均显示,老年对照组与青年对照组相比,心肌组织T-钙粘蛋白、其配体脂联素的表达显著下调(P0.05),免疫印迹结果示AMPK活化水平显著下调(P0.05);而经12周耐力运动训练后,老年运动组与老年对照组相比,T-钙粘蛋白、脂联素的表达,AMPK活化水平显著升高(P0.05)。与青年对照组相比,老年对照组的小鼠心肌组织抑凋亡蛋白bcl-2表达显著下调,促凋亡蛋白bax、Caspase-9表达显著上调(P0.05);老年运动组与老年对照组相比,心肌组织抑凋亡蛋白bcl-2表达显著上调,促凋亡蛋白bax、Caspase-9表达显著下调(P0.05)。老年对照组与青年对照组小鼠相比,心肌组织抑自噬蛋白mTOR活化水平显著上调,促自噬蛋白Beclin-1表达显著下调(P0.05);老年运动组与老年对照组相比,心肌组织抑自噬蛋白mTOR活化水平显著下调,促自噬蛋白beclin-1表达显著上调(P0.05)。老年对照组与青年对照组相比,纤维化相关信号蛋白TGF-β1、CollagenⅠ、CollagenⅢ表达显著上调(P0.05),心肌纤维化程度加重,而经过12周耐力运动后,老年运动组与老年对照组小鼠相比,心肌组织纤维化相关信号蛋白TGF-β1、CollagenⅠ、CollagenⅢ表达显著下调(P0.05),纤维化程度减轻。结论:耐力运动可增强老年小鼠心肌T-钙粘蛋白表达,促进其配体脂联素与心肌组织结合,刺激AMPK活化,影响下游凋亡、自噬、纤维化相关信号蛋白的表达从而实现对老龄心肌的保护作用。
【学位单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2020
【中图分类】：R493
【部分图文】：

重庆医科大学硕士研究生学位论文20图1各组心肌组织T-钙粘蛋白免疫组化染色及平均光密度分析Fig.1ImmunohistochemicalstainingandaverageopticaldensityanalysisofT-cadherininmyocardialtissueofeachgroup（注：YC=青年对照组，OC=老年对照组，OE=老年运动组；aP<0.05，与老年对照组相比）青年对照组、老年对照组及进行耐力运动的老年运动组小鼠心肌组织T-钙粘蛋白的免疫印迹检测结果如下图2所示。与青年对照组相比，老年对照组小鼠心肌组织T-钙粘蛋白表达水平显著降低(P＜0.01)；而经12周耐力运动后，老年运动组与老年对照组相比，T-钙粘蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）。图2免疫印迹检测各组心肌组织T-钙粘蛋白表达Fig.2DetectionofT-cadherinexpressioninmyocardiumofeachgroupbyWesternblot（注：YC=青年对照组，OC=老年对照组，OE=老年运动组；aP<0.05，bP<0.01与老年对照组相比）2.1.2各组心肌组织脂联素蛋白表达变化各组小鼠心肌组织脂联素免疫组化染色如图3所示，高倍镜下可观察到脂联素分布在小鼠心肌细胞胞膜、胞浆及血管内皮，对其阳性表达进行半定量分析,与T-钙粘蛋白变化趋势相一致。与青年对照组相比，老年对照组心肌组织脂联素蛋白阳性表达显著下调(P＜0.05)；而经过耐力运动后老年运动组与老年对照组相比，脂联素阳性表达显著上调(P＜0.05)；详见图3。

重庆医科大学硕士研究生学位论文21图3各组心肌组织脂联素免疫组化染色及平均光密度分析Fig.3Immunohistochemicalstainingandaverageopticaldensityanalysisofadiponectininmyocardialtissueofeachgroup（注：YC=青年对照组，OC=老年对照组，OE=老年运动组；aP<0.05与老年对照组相比）下图4所示为各组心肌组织脂联素免疫印迹检测结果。与青年对照组相比，老年对照组小鼠心肌组织脂联素蛋白表达水平显著下调，差异具有统计学意义(P＜0.05)；与老年对照组相比，老年运动组小鼠经12周耐力运动后小鼠心肌组织脂联素蛋白表达水平显著上调（P＜0.05）。图4免疫印迹检测各组心肌组织脂联素蛋白表达

重庆医科大学硕士研究生学位论文21图3各组心肌组织脂联素免疫组化染色及平均光密度分析Fig.3Immunohistochemicalstainingandaverageopticaldensityanalysisofadiponectininmyocardialtissueofeachgroup（注：YC=青年对照组，OC=老年对照组，OE=老年运动组；aP<0.05与老年对照组相比）下图4所示为各组心肌组织脂联素免疫印迹检测结果。与青年对照组相比，老年对照组小鼠心肌组织脂联素蛋白表达水平显著下调，差异具有统计学意义(P＜0.05)；与老年对照组相比，老年运动组小鼠经12周耐力运动后小鼠心肌组织脂联素蛋白表达水平显著上调（P＜0.05）。图4免疫印迹检测各组心肌组织脂联素蛋白表达
【参考文献】

相关期刊论文 前1条

1 潘月顺;仇琪;;不同负荷运动对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及相关蛋白表达的影响[J];中国运动医学杂志;2013年12期

本文编号：2893233