基于多糖分子量分布和免疫活性比较的黄芪质量研究

发布时间：2020-12-10 09:38

　　选题依据:黄芪是山西大宗道地药材之一。多糖作为黄芪中的主要免疫活性成分,却因结构可控性难题,未能作为质控指标。近年来随着膜材料、色谱填料技术等发展,超滤法、新一代凝胶色谱法的应用,使得多糖组分可以根据分子量进行系统表征和分离。新技术、新表征方法的应用不仅可避免了多糖结构测定的技术瓶颈,而且从整体上可以精准表征中药材多糖的结构特点。基于TSK凝胶色谱法进行黄芪多糖分子量分布的糖谱表征可鉴别出不同种属、不同基原、不同生长方式下黄芪药材的差异。通过超滤法可截留制备出不同分子量黄芪多糖,为系统免疫活性筛选奠定了基础。因此本研究通过TSK凝胶色谱分离法和超滤截留法,进行不同分子量黄芪多糖糖谱表征和制备,分别进行结构研究（单糖组成、连接位点分析）,同时进行非特异性和特异性免疫活性筛选（体外细胞活性评价和体内动物活性验证）,找出黄芪多糖中活性最强组分,建立黄芪多糖特征糖谱结合细胞免疫活性评价方法进行不同来源黄芪质量比较。研究不仅为阐明黄芪多糖药理功能物质奠定了基础,而且促进了药物研发。目的:将黄芪多糖（APS）按分子量分布情况分离不同组分,解析各组分结构并筛选出免疫活性最强的组分。并通过建立黄芪多糖... 

【文章来源】：山西大学山西省

【文章页数】：107 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

不同浓度葡萄糖标准曲线

基于多糖分子量分布和不同免疫活性比较的黄芪质量研究20图3.1不同浓度葡萄糖标准曲线2）蛋白质含量的测定在595nm处测定的蛋白质标准品标准曲线如图3.2所示。得到蛋白质标品的线性回归方程为A=0.4397C+0.011（相关系数=0.9971）。计算得蛋白质含量为0.42%。图3.2不同浓度蛋白质标品标准曲线3）分子量的测定采用高效凝胶过滤色谱法（HPGFC）测得右旋糖酐对照品的标准曲线如图3.3所示。得到右旋糖酐对照品的线性回归方程为logMw=﹣0.5336tR+14.898（相关系数=0.9901）。并计算提取的黄芪多糖分子量分布情况，其结果如图3.4所示（图3.4的色谱峰上的数据为各切割部分的最高点的相对分子量（Mp））。黄芪多糖样品的HPGFC图谱按图3.4的峰起伏切割成4个部分（或称级分）。第一部分和第二部分的MW大于2MDa（超出线性范围），第三部分的分子量约为10kDa，第四部分的分子量约为300Da。

第三章黄芪多糖中不同分子量多糖组分的分离及结构解析21图3.3右旋糖酐标准对照品保留时间及其相应分子量的对数值的标准曲线图3.4蒸发光散射检测器高效液相色谱（HPLC-ELSD）测定总黄芪多糖（APS）色谱图4）单糖组成的测定用PMP柱前衍生化-高效液相色谱法测定了8种标准单糖混合物色谱图（图3.5A）和样品黄芪单糖特征图谱（图3.5B）。将单糖混合对照品图谱与样品黄芪单糖特征图谱进行对照，得出山西浑源黄芪多糖是由鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和半乳糖醛酸5种单糖组成的。以阿拉伯糖的物质的量为1，求得鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖的物质的量比为0.43:0.23:19.36:0.69:1。其中含有葡萄糖是最多的，其次是阿拉伯糖和半乳糖。>2000KDa10247Da286Da


本文编号：2908478