MicroRNA-206靶向c-Met基因抑制甲状腺乳头状癌细胞增殖和迁移的研究
发布时间：2020-12-13 13:42
研究背景及目的:甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）是临床中最常见的内分泌恶性肿瘤,近年来其发病率逐年上升,约有10%-15%的PTC患者常出现远处转移和复发,导致其对标准治疗的效果较差,预后不佳。因此,研究PTC形成和发展的分子机制是十分必要的,对寻找PTC治疗新药,提高PTC患者的预后具有重要意义。微小RNA（microRNA,miRNA,miR）是一类长约22个核苷酸的非编码RNA,参与调节细胞分化、增殖和代谢等基本的生理过程。异常表达的miRNA能够从转录后水平调控各种致癌或抑癌基因的表达,从而调控多种恶性肿瘤的发生和发展,而miR-206在多种癌症中如乳腺癌、肝癌、胃癌等有异常表达,其在甲状腺乳头状癌组织中的表达量较正常组织中低,但miR-206对甲状腺乳头状癌具体生物功能及机制尚未阐明。肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）的受体c-Met与HGF结合后,可导致酪氨酸残基磷酸化并激活PI3K/Akt/mTOR通路,异常激活的c-Met/Akt/mTOR信号通路与甲状腺癌、宫颈癌等多种恶性细胞的增...
【文章来源】：山西医科大学山西省
【文章页数】：47 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
HGF/c-MET信号转导通路示意图[13]
山西医科大学硕士学位论文152结果2.1转染后实验组K1细胞中miR-206的相对表达量升高利用脂质体LipofectamineTM3000介导向K1细胞瞬时转染miR-206mimic后，RT-qPCR检测了空白组、阴性对照组和实验组K1细胞中miR-206的相对表达量，见表2-1；由此可见，实验组miR-206的相对表达量较空白组、阴性对照组均有明显升高，差异具有统计学意义（P均<0.05），见图2-1。结果提示，转染miR-206mimic的实验组细胞中miR-206呈现过表达，表明转染成功。表2-1RT-qPCR法检测转染24h后各组K1细胞中miR-206表达水平组别N2-ΔΔCt(SX)Blank组31.01±0.06miR-NC组31.38±0.05miR-206mimic组315.72±0.39**注：**P<0.01，miR-206mimic组K1细胞中miR-206的相对表达量较Blank组及miR-NC组均升高，差异有统计学意义。图2-1转染24h后各组K1细胞中miR-206表达水平（**P<0.01vsBlank组和miR-NC组；n=3）
2.2 过表达 miR-206 抑制 K1 细胞的增殖能力CCK-8 实验结果显示，对细胞转染 24h、48h、72h 后，在相同时间处，由得出的吸光度值统计分析出各组细胞的增殖率，经组间两两比较可得，空白组与阴性对照组均无明显差异，而转染 miR-206 mimic 的实验组中 K1 细胞的增殖率较空白组、阴性对照组均明显受到抑制，差异有统计学意义（P< 0.05），见图 2-2。对成功转染的细胞进行台盼蓝染色活细胞计数，统计活细胞率，可见实验组 K1 细胞的活细胞率较空白组与阴性对照组均明显降低，差异有统计学意义（P <0.05），见图 2-3。由此说明，miR-206 过表达后，细胞的增殖能力受到抑制。
【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-105靶向负调控KIFC1抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力[J]. 赵继聪,王薇,刘建伟,马建欣,徐德利,郭靖涛. 中国病理生理杂志. 2019(08)
[2]微小RNA-497抑制甲状腺乳头状癌细胞活力、侵袭和迁移[J]. 张莉君,叶颖,张遂亮,庄菊花,夏伟. 中国病理生理杂志. 2018(12)
本文编号：2914634
【文章来源】：山西医科大学山西省
【文章页数】：47 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
HGF/c-MET信号转导通路示意图[13]
山西医科大学硕士学位论文152结果2.1转染后实验组K1细胞中miR-206的相对表达量升高利用脂质体LipofectamineTM3000介导向K1细胞瞬时转染miR-206mimic后，RT-qPCR检测了空白组、阴性对照组和实验组K1细胞中miR-206的相对表达量，见表2-1；由此可见，实验组miR-206的相对表达量较空白组、阴性对照组均有明显升高，差异具有统计学意义（P均<0.05），见图2-1。结果提示，转染miR-206mimic的实验组细胞中miR-206呈现过表达，表明转染成功。表2-1RT-qPCR法检测转染24h后各组K1细胞中miR-206表达水平组别N2-ΔΔCt(SX)Blank组31.01±0.06miR-NC组31.38±0.05miR-206mimic组315.72±0.39**注：**P<0.01，miR-206mimic组K1细胞中miR-206的相对表达量较Blank组及miR-NC组均升高，差异有统计学意义。图2-1转染24h后各组K1细胞中miR-206表达水平（**P<0.01vsBlank组和miR-NC组；n=3）
2.2 过表达 miR-206 抑制 K1 细胞的增殖能力CCK-8 实验结果显示，对细胞转染 24h、48h、72h 后，在相同时间处，由得出的吸光度值统计分析出各组细胞的增殖率，经组间两两比较可得，空白组与阴性对照组均无明显差异，而转染 miR-206 mimic 的实验组中 K1 细胞的增殖率较空白组、阴性对照组均明显受到抑制，差异有统计学意义（P< 0.05），见图 2-2。对成功转染的细胞进行台盼蓝染色活细胞计数，统计活细胞率，可见实验组 K1 细胞的活细胞率较空白组与阴性对照组均明显降低，差异有统计学意义（P <0.05），见图 2-3。由此说明，miR-206 过表达后，细胞的增殖能力受到抑制。
【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-105靶向负调控KIFC1抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力[J]. 赵继聪,王薇,刘建伟,马建欣,徐德利,郭靖涛. 中国病理生理杂志. 2019(08)
[2]微小RNA-497抑制甲状腺乳头状癌细胞活力、侵袭和迁移[J]. 张莉君,叶颖,张遂亮,庄菊花,夏伟. 中国病理生理杂志. 2018(12)
本文编号：2914634
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