miR-155-5P在脓毒症急性肺损伤时调控肺泡巨噬细胞IL-6、MIP-2的表达对中性粒细胞迁移的影响
发布时间：2020-12-17 21:29
目的:探讨脓毒症急性肺损伤（ALI）时miR-155-5P对肺泡巨噬细胞白介素-6（IL-6）、巨噬细胞炎性蛋白2（MIP-2）表达的调控作用及中性粒细胞迁移的影响。方法:培养小鼠肺泡巨噬细胞（MH-S）并将其分为对照组、脓毒症组和miR-155-5P抑制物组,miR-155-5P抑制物组预先通过miR-155-5P antagomir完成转染,采用脂多糖干预脓毒症组和miR-155-5P抑制物组12 h,应用RT-PCR检测3组MH-S细胞miR-155-5P、白介素6 mRNA和MIP-2 mRNA的表达,酶联免疫吸附试验检测细胞悬液中白介素6和MIP-2的浓度;再次将MH-S分为上述3组培养在Transwell板的下室,CFSE荧光染料标记的中性粒细胞培养在上室,脂多糖干预后应用流式细胞术分别检测上室与下室细胞的荧光值,计算中性粒细胞的迁移率。结果:与对照组相比,脓毒症组肺泡巨噬细胞的miR-155-5P表达明显上调（P<0.05）,IL-6mRNA和MIP-2mRNA的表达也明显上调（P<0.05）,同时IL-6、MIP-2的浓度和中性粒细胞迁移率均显著增加（P&l...
【文章来源】：山西医科大学山西省
【文章页数】：42 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
（瑞氏染色，×400）为显微镜下的中性粒细胞
山西医科大学硕士学位论文9图3-3台盼蓝染色后的中性粒细胞（×100）2.3.3CFSE荧光染料标记中性粒细胞CFSE荧光染料可穿透活中性粒细胞的细胞膜，与胞内蛋白共价结合水解后释放绿色荧光，表示标记完成，见图3-4、3-5。图3-4CFSE标记的中性粒细胞（明场）图3-5CFSE标记的中性粒细胞（暗场）2.3.4流式细胞术检测三组中性粒细胞荧光值，计算中性粒细胞迁移率。经流式细胞术分别检测三组Transwell板上室与下室的细胞荧光值，见图3-6，其中mean值为所测荧光值，events为所计细胞数，据公式：迁移率（%）=下室荧光值/（上室荧光值+下室荧光值）×100%，计算出迁移率结果显示：脓毒症组中性粒细胞迁移率（64.36%）显著高于对照组（30.98%，χ2=7.542，P<0.05）和miR-155-5P抑制物组（38.32%，χ2=4.437，P<0.05），miR-155-5P抑制物组中性粒细胞迁移率与对照组相比无统计学意义（χ2=0.399，P=0.528）。见图3-7。
山西医科大学硕士学位论文9图3-3台盼蓝染色后的中性粒细胞（×100）2.3.3CFSE荧光染料标记中性粒细胞CFSE荧光染料可穿透活中性粒细胞的细胞膜，与胞内蛋白共价结合水解后释放绿色荧光，表示标记完成，见图3-4、3-5。图3-4CFSE标记的中性粒细胞（明场）图3-5CFSE标记的中性粒细胞（暗场）2.3.4流式细胞术检测三组中性粒细胞荧光值，计算中性粒细胞迁移率。经流式细胞术分别检测三组Transwell板上室与下室的细胞荧光值，见图3-6，其中mean值为所测荧光值，events为所计细胞数，据公式：迁移率（%）=下室荧光值/（上室荧光值+下室荧光值）×100%，计算出迁移率结果显示：脓毒症组中性粒细胞迁移率（64.36%）显著高于对照组（30.98%，χ2=7.542，P<0.05）和miR-155-5P抑制物组（38.32%，χ2=4.437，P<0.05），miR-155-5P抑制物组中性粒细胞迁移率与对照组相比无统计学意义（χ2=0.399，P=0.528）。见图3-7。
【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-155对脓毒症急性肺损伤肺泡巨噬细胞IL-6、IL-10及MIP-2的影响[J]. 付玉梅,周佳伟,刘凯,侯林义,张文凯. 中华重症医学电子杂志(网络版). 2019(02)
[2]中国脓毒症流行病学现状[J]. 江伟,杜斌. 医学研究生学报. 2019(01)
硕士论文
[1]构建中性粒细胞自发凋亡过程lncRNA-miRNA-mRNA内源竞争性RNA网络筛选中性粒细胞自发凋亡过程中关键的lncRNA[D]. 江南.西南医科大学 2019
[2]脓毒症时PD-L1调控中性粒细胞凋亡的作用和机制研究[D]. 郭玉.中国人民解放军海军军医大学 2018
本文编号：2922748
【文章来源】：山西医科大学山西省
【文章页数】：42 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
（瑞氏染色，×400）为显微镜下的中性粒细胞
山西医科大学硕士学位论文9图3-3台盼蓝染色后的中性粒细胞（×100）2.3.3CFSE荧光染料标记中性粒细胞CFSE荧光染料可穿透活中性粒细胞的细胞膜，与胞内蛋白共价结合水解后释放绿色荧光，表示标记完成，见图3-4、3-5。图3-4CFSE标记的中性粒细胞（明场）图3-5CFSE标记的中性粒细胞（暗场）2.3.4流式细胞术检测三组中性粒细胞荧光值，计算中性粒细胞迁移率。经流式细胞术分别检测三组Transwell板上室与下室的细胞荧光值，见图3-6，其中mean值为所测荧光值，events为所计细胞数，据公式：迁移率（%）=下室荧光值/（上室荧光值+下室荧光值）×100%，计算出迁移率结果显示：脓毒症组中性粒细胞迁移率（64.36%）显著高于对照组（30.98%，χ2=7.542，P<0.05）和miR-155-5P抑制物组（38.32%，χ2=4.437，P<0.05），miR-155-5P抑制物组中性粒细胞迁移率与对照组相比无统计学意义（χ2=0.399，P=0.528）。见图3-7。
山西医科大学硕士学位论文9图3-3台盼蓝染色后的中性粒细胞（×100）2.3.3CFSE荧光染料标记中性粒细胞CFSE荧光染料可穿透活中性粒细胞的细胞膜，与胞内蛋白共价结合水解后释放绿色荧光，表示标记完成，见图3-4、3-5。图3-4CFSE标记的中性粒细胞（明场）图3-5CFSE标记的中性粒细胞（暗场）2.3.4流式细胞术检测三组中性粒细胞荧光值，计算中性粒细胞迁移率。经流式细胞术分别检测三组Transwell板上室与下室的细胞荧光值，见图3-6，其中mean值为所测荧光值，events为所计细胞数，据公式：迁移率（%）=下室荧光值/（上室荧光值+下室荧光值）×100%，计算出迁移率结果显示：脓毒症组中性粒细胞迁移率（64.36%）显著高于对照组（30.98%，χ2=7.542，P<0.05）和miR-155-5P抑制物组（38.32%，χ2=4.437，P<0.05），miR-155-5P抑制物组中性粒细胞迁移率与对照组相比无统计学意义（χ2=0.399，P=0.528）。见图3-7。
【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-155对脓毒症急性肺损伤肺泡巨噬细胞IL-6、IL-10及MIP-2的影响[J]. 付玉梅,周佳伟,刘凯,侯林义,张文凯. 中华重症医学电子杂志(网络版). 2019(02)
[2]中国脓毒症流行病学现状[J]. 江伟,杜斌. 医学研究生学报. 2019(01)
硕士论文
[1]构建中性粒细胞自发凋亡过程lncRNA-miRNA-mRNA内源竞争性RNA网络筛选中性粒细胞自发凋亡过程中关键的lncRNA[D]. 江南.西南医科大学 2019
[2]脓毒症时PD-L1调控中性粒细胞凋亡的作用和机制研究[D]. 郭玉.中国人民解放军海军军医大学 2018
本文编号：2922748
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