ATG7沉默影响卵巢癌SKOV3细胞顺铂化疗敏感性的研究

发布时间：2021-01-08 05:22

　　目的:研究小干扰RNA（siRNA）诱导的自噬相关基因7（ATG7）沉默对卵巢癌SKOV3细胞顺铂（DDP）化疗敏感性的影响。方法:1.MTT法选取顺铂作用于卵巢癌SKOV3细胞系的条件。2.活性氧（ROS）检测试剂盒检测应用不同浓度顺铂时卵巢癌SKOV3细胞系产生的活性氧水平。3.Western blot检测应用不同浓度顺铂时卵巢癌SKOV3细胞系自噬相关蛋白Beclin-1、P62、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ和ATG7的表达水平。4.应用siRNA技术使卵巢癌SKOV3细胞系中ATG7基因沉默,Western blot检测siRNA对卵巢癌SKOV3细胞系中ATG7基因的干扰效果。5.MTT法检测siRNA-ATG7干扰前后顺铂对卵巢癌SKOV3细胞系存活率的影响。6.Annexin V-FITC/PI双染法检测siRNA-ATG7干扰前后顺铂对卵巢癌SKOV3细胞系凋亡率的影响。7.线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1）检测siRNA-ATG7干扰前后顺铂对卵巢癌SKOV3细胞系早期凋亡的影响。8.应用倒置显微镜观察siRNA-ATG7干扰前后顺铂诱导的卵巢癌SKOV3细胞系细胞形态的变... 

【文章来源】：蚌埠医学院安徽省

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

顺铂对SKOV3细胞的增殖的抑制情况

顺铂处理后SKOV3细胞内活性氧水平

Fig.2 Levels of Intracellular reactive oxygen species in SKOV3 cells treated with cisplatin 3.顺铂上调人卵巢癌 SKOV3 细胞系自噬水平 用 Western blot 检测人卵巢癌 SKOV3 细胞经顺铂处理后，自噬相关蛋白 BecIin-1，P62 和 ATG7 的表达水平。如图 3 所示，随着顺铂浓度的增加，Beclin-1 和 ATG7 蛋白的表达水平逐渐升高，而 P62 蛋白的表达水平逐渐降低，LC3-Ⅱ/Ⅰ比值增加，表明自噬水平随着顺铂浓度的增加而增强。结果表明顺铂可以上调人卵巢癌 SKOV3 细胞系自噬水平。


本文编号：2963994