载SPIO及Ce6脂质体纳米粒子体外成像及对乳腺癌细胞光动力疗法的实验研究
发布时间：2021-02-24 19:43
研究目的本研究主要使用脂质体（liposome）包裹超顺磁性氧化铁（superparamagnetic iron oxide,SPIO）合成Lipo（SPIO）,对其进行体外磁共振成像（magnetic resonance imaging,MRI）,然后再通过包裹二氢卟吩e6（Chlorin e6,Ce6）合成Lipo（SPIO-Ce6）纳米粒子复合物,通过体外细胞实验研究,探讨Lipo（SPIO-Ce6）纳米粒子复合物用于进行光动力疗法（photodynamic therapy,PDT）的可行性。研究方法1.选用大豆磷脂和胆固醇为合成原材料,通过使用薄膜分散法制备合成获得脂质体,在磷脂双分子疏水层包载SPIO与Ce6,制备得到Lipo（SPIO-Ce6）。测定SPIO和Ce6的包封率;电镜下观察复合物形态,动态光散射激光粒度仪测量复合物的粒径分布。使用紫外可见分光光度计测量SPIO及Ce6的包封率。2.通过MRI扫描检测Lipo（SPIO）的T2信号。设置由低到高的不同浓度梯度值的实验组及空白对照组,使用3.0 T磁共振进行扫描并计算其T2弛豫率。3.采用CCK8细胞毒性试验考察Li...
【文章来源】：广州医科大学广东省
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Ce6化学结构式
第一章前言11图1-2脂质体结构示意图1.3.本研究的主要目的、意义及内容本研究通过制备具有良好生物相容性的Lipo(SPIO)，实现MR成像，以期可应用于对肿瘤病灶的无创性及实时性检测，同时，通过包载Ce6合成Lipo(SPIO-Ce6)纳米粒子复合物，研究Ce6的PDT效应对乳腺癌MCF7细胞的杀伤效果。本研究通过结合分子材料学、分子影像学和细胞生物学等多学科，探讨利用纳米粒子复合物用于MR成像及抗肿瘤治疗。分子影像学在国内外有着广泛的基础实验研究，体现其有非常广阔的应用前景。本研究内容包括：（1）光动力疗法材料的制备采用薄膜分散法合成研究所需的脂质体，然后在脂质体内包载SPIO及Ce6，得到纳米粒子Lipo(SPIO)和Lipo(SPIO-Ce6)。通过测定材料的粒径和分布、T2弛豫率验证材料的理化性质及稳定性。（2）光动力疗法材料用于乳腺癌的研究本研究主要对Lipo(SPIO-Ce6)的安全性进行检测，进而研究其在体外光动力疗法的效果。通过CCK-8法评估材料的生物毒性。使用荧光显微镜、流式细胞术检测细胞对材料的摄取及其本身的荧光特性。对细胞进行激光照射后，通过ROS探针检测细胞内ROS产生情况，使用CCK-8法及Calcein-AM/PI活细胞/死细胞双染法检测材料在体外对肿瘤细胞进行PDT的杀伤能力。
第二章制备及理化性质研究15载客体分子后的脂质体粒径增大，主要是因为疏水分子进入脂质层。TEM观察下，空白脂质体呈球形结构，粒径分布均匀；Lipo(SPIO-Ce6)在TEM下可以看到SPIO纳米粒子均匀地分散。包封率测量实验测得该纳米粒子复合物SPIO的包封率为87%，Ce6包封率为60%。80100120140160180020406080100120Intensity(%)Diameter(nm)LipoLipo(SPIO)Lipo(SPIO-Ce6)图2-1动态光散射测定纳米粒子粒径图2-2透射电镜图(A)Liposome与（B）Lipo(SPIO-Ce6)
【参考文献】：
期刊论文
[1]2013—2017年中国城市癌症早诊早治项目基线结果分析[J]. 陈万青,李霓,曹毛毛,任建松,石菊芳,陈宏达,李江,林春青,于欣阳,崔宏,代敏,赫捷. 中国肿瘤. 2020(01)
[2]光动力疗法治疗晚期消化道肿瘤的临床研究[J]. 熊超亮,吴裕文,钟谷平,范惠珍. 中国医学创新. 2019(33)
[3]内镜逆行胰胆管造影介导光动力疗法治疗胆管癌研究进展[J]. 王昆鹏,熊力,张子建,刘锴,黄云鹏,杨鑫,李清龙,陈伟,邹恒,文宇. 中南大学学报(医学版). 2019(11)
[4]光动力疗法在肿瘤治疗中的研究进展[J]. 陈越,郑军,谭潇. 实用医学杂志. 2019(16)
[5]纳米材料在肿瘤治疗领域的研究进展[J]. 李帅,徐文涵,李晓东,刘冲,何金瞳,何泽宇,李天琪,张燕燕,邵海波. 医学研究杂志. 2019(01)
[6]2005-2013年中国女性乳腺癌发病及死亡趋势分析[J]. 何明艳,朱碧琪,钟媛,王雷,杨柳,廖先珍,让蔚清. 中华疾病控制杂志. 2019(01)
[7]中国城市癌症早诊早治项目进展[J]. 陈万青,李霓,石菊芳,任建松,陈宏达,李江,代敏,赫捷. 中国肿瘤. 2019(01)
[8]光动力疗法治疗痤疮的研究进展[J]. 石慧娟,杨高云. 临床和实验医学杂志. 2018(05)
[9]分子影像学探针的研究现状与展望[J]. 王培军,沈爱军. 中国医学影像技术. 2017(10)
[10]光动力与红、蓝光治疗面部痤疮的临床疗效[J]. 李庆贤,沈宝贤,种树彬,叶艳芬,周婉云. 实用医学杂志. 2016(16)
本文编号：3049857
【文章来源】：广州医科大学广东省
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Ce6化学结构式
第一章前言11图1-2脂质体结构示意图1.3.本研究的主要目的、意义及内容本研究通过制备具有良好生物相容性的Lipo(SPIO)，实现MR成像，以期可应用于对肿瘤病灶的无创性及实时性检测，同时，通过包载Ce6合成Lipo(SPIO-Ce6)纳米粒子复合物，研究Ce6的PDT效应对乳腺癌MCF7细胞的杀伤效果。本研究通过结合分子材料学、分子影像学和细胞生物学等多学科，探讨利用纳米粒子复合物用于MR成像及抗肿瘤治疗。分子影像学在国内外有着广泛的基础实验研究，体现其有非常广阔的应用前景。本研究内容包括：（1）光动力疗法材料的制备采用薄膜分散法合成研究所需的脂质体，然后在脂质体内包载SPIO及Ce6，得到纳米粒子Lipo(SPIO)和Lipo(SPIO-Ce6)。通过测定材料的粒径和分布、T2弛豫率验证材料的理化性质及稳定性。（2）光动力疗法材料用于乳腺癌的研究本研究主要对Lipo(SPIO-Ce6)的安全性进行检测，进而研究其在体外光动力疗法的效果。通过CCK-8法评估材料的生物毒性。使用荧光显微镜、流式细胞术检测细胞对材料的摄取及其本身的荧光特性。对细胞进行激光照射后，通过ROS探针检测细胞内ROS产生情况，使用CCK-8法及Calcein-AM/PI活细胞/死细胞双染法检测材料在体外对肿瘤细胞进行PDT的杀伤能力。
第二章制备及理化性质研究15载客体分子后的脂质体粒径增大，主要是因为疏水分子进入脂质层。TEM观察下，空白脂质体呈球形结构，粒径分布均匀；Lipo(SPIO-Ce6)在TEM下可以看到SPIO纳米粒子均匀地分散。包封率测量实验测得该纳米粒子复合物SPIO的包封率为87%，Ce6包封率为60%。80100120140160180020406080100120Intensity(%)Diameter(nm)LipoLipo(SPIO)Lipo(SPIO-Ce6)图2-1动态光散射测定纳米粒子粒径图2-2透射电镜图(A)Liposome与（B）Lipo(SPIO-Ce6)
【参考文献】：
期刊论文
[1]2013—2017年中国城市癌症早诊早治项目基线结果分析[J]. 陈万青,李霓,曹毛毛,任建松,石菊芳,陈宏达,李江,林春青,于欣阳,崔宏,代敏,赫捷. 中国肿瘤. 2020(01)
[2]光动力疗法治疗晚期消化道肿瘤的临床研究[J]. 熊超亮,吴裕文,钟谷平,范惠珍. 中国医学创新. 2019(33)
[3]内镜逆行胰胆管造影介导光动力疗法治疗胆管癌研究进展[J]. 王昆鹏,熊力,张子建,刘锴,黄云鹏,杨鑫,李清龙,陈伟,邹恒,文宇. 中南大学学报(医学版). 2019(11)
[4]光动力疗法在肿瘤治疗中的研究进展[J]. 陈越,郑军,谭潇. 实用医学杂志. 2019(16)
[5]纳米材料在肿瘤治疗领域的研究进展[J]. 李帅,徐文涵,李晓东,刘冲,何金瞳,何泽宇,李天琪,张燕燕,邵海波. 医学研究杂志. 2019(01)
[6]2005-2013年中国女性乳腺癌发病及死亡趋势分析[J]. 何明艳,朱碧琪,钟媛,王雷,杨柳,廖先珍,让蔚清. 中华疾病控制杂志. 2019(01)
[7]中国城市癌症早诊早治项目进展[J]. 陈万青,李霓,石菊芳,任建松,陈宏达,李江,代敏,赫捷. 中国肿瘤. 2019(01)
[8]光动力疗法治疗痤疮的研究进展[J]. 石慧娟,杨高云. 临床和实验医学杂志. 2018(05)
[9]分子影像学探针的研究现状与展望[J]. 王培军,沈爱军. 中国医学影像技术. 2017(10)
[10]光动力与红、蓝光治疗面部痤疮的临床疗效[J]. 李庆贤,沈宝贤,种树彬,叶艳芬,周婉云. 实用医学杂志. 2016(16)
本文编号：3049857
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