红树莓酵素冻干粉对Ⅰ型糖尿病小鼠肠道菌群及其代谢物影响的研究

发布时间：2021-05-05 21:07

　　红树莓（Rubus ideaus L.）属蔷薇科悬钩子属,富含黄酮、鞣花酸和花青素等活性物质,具有抗氧化、抗肿瘤等功效,具有很高的研究价值。本课题在红树莓果浆中添加马克思克鲁维酵母复合短乳杆菌进行定向发酵,制得红树莓酵素。用不同剂量酵素冻干粉稀释液连续灌胃给予Ⅰ型糖尿病小鼠28 d,通过16S rRNA测序、GC-MS代谢组学分析、肝脏和回肠组织切片分析,得到如下结果。1.利用响应面法对红树莓酵素的酿造工艺进行优化,确定最佳酿造工艺为糖添加量170 g/L,马克思克鲁维酵母+短乳杆菌接种量0.24%+2.7%,瓶装量60 mL。2.酵素冻干粉中富含有多种生物活性物质,其中:蛋白酶活力为（60.96±3.49）U/g,SOD酶活力为（472.50±2.57）U/g,多酚含量为（472.50±2.57）mg/g,活菌总数为lg（5.05±1.26）CFU/g。3.酵素具有降血糖效果,可以降低Ⅰ型糖尿病小鼠空腹血糖值,提高小鼠糖耐量,并恢复重塑Ⅰ型糖尿病小鼠肠道菌群结构,调节代谢物,修复肝脏损伤和恢复肠道上皮和黏膜细胞的作用。4.酵素冻干粉中含有多种生物活性成分和活菌,相比单一短乳杆菌冻干粉... 

【文章来源】：内蒙古大学内蒙古自治区 211工程院校

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
一、绪论
    1.1 肠道菌群的研究进展
        1.1.1 肠道菌群
        1.1.2 肠道菌群的多样性
        1.1.3 肠道菌群多样性的影响因素
            1.1.3.1 宿主的基因型
            1.1.3.2 饮食结构
            1.1.3.3 其他因素
        1.1.4 肠道菌群与Ⅰ型糖尿病之间关系的研究现状
            1.1.4.1 Ⅰ型糖尿病的基本概念
            1.1.4.2 Ⅰ型糖尿病发病机制
            1.1.4.3 肠道菌群与Ⅰ型糖尿病的关系
    1.2 酵素与肠道菌群
        1.2.1 树莓简介
        1.2.2 酵素概述
        1.2.3 酵素对肠道菌群影响的研究现状
    1.3 本课题研究内容和意义
二、材料与方法
    2.1 实验材料与仪器试剂
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 实验动物
        2.1.3 实验试剂
        2.1.4 仪器设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 检测方法
            2.2.1.1 菌落总数测定
            2.2.1.2 超氧化物歧化酶(SOD)测定
            2.2.1.3 蛋白酶活力测定
            2.2.1.4 多酚含量测定
        2.2.2 酵素冻干粉制作工艺流程
        2.2.3 菌种活化
        2.2.4 红树莓果浆预处理
        2.2.5 单因素实验
        2.2.6 响应面法优化红树莓酵素酿造工艺
        2.2.7 冻干保护剂的制备
        2.2.8 动物实验设计
            2.2.8.1 预实验确定灌胃剂量
            2.2.8.2 实验动物造模
            2.2.8.3 实验动物分组
            2.2.8.4 糖耐量实验
            2.2.8.5 样本采集
        2.2.9 小鼠肠道菌群分析
            2.2.9.1 小鼠盲肠内容物中细菌总DNA提取
            2.2.9.2 PCR扩增条件
            2.2.9.3 生物信息学分析
        2.2.10 小鼠代谢物分析
            2.2.10.1 样品处理
            2.2.10.2 GC-MS分析
        2.2.11 组织切片
            2.2.11.1 小鼠肝脏、结肠组织病理切片
            2.2.11.2 HE染色
            2.2.11.3 图像采集和分析
三、结果与分析
    3.1 结果分析
        3.1.1 单因素结果分析
            3.1.1.1 糖添加量对酵素活菌数的影响
            3.1.1.2 复合菌接种量对酵素活菌数的影响
            3.1.1.3 瓶装量对酵素活菌数的影响
        3.1.2 响应面实验结果分析
            3.1.2.1 响应面回归模型的建立与分析
            3.1.2.2 两因素交互作用分析
            3.1.2.3 最佳工艺参数的确定
        3.1.3 酵素冻干粉生物活性测定
        3.1.4 血糖变化值
        3.1.5 糖耐量实验结果
        3.1.6 酵素对Ⅰ型糖尿病小鼠肠道菌群的影响
            3.1.6.1 肠道菌群多样性测序结果
            3.1.6.2 各处理组小鼠肠道菌群的组成分析
        3.1.7 酵素对Ⅰ型糖尿病小鼠代谢物的影响
        3.1.8 肝脏、回肠病理切片HE染色结果分析
四、结论
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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[3]液相色谱-串联质谱法对锡林浩特地区马奶中泛酸含量的测定[J]. 王亚慧,侯海荣,陈明涛,孙春玲,郝苗苗.  农产品加工. 2019(24)
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[8]浓香型白酒中优势乳酸菌和酵母菌间的相互关系[J]. 罗青春,郑佳,赵东,乔宗伟,安明哲,张霞,杨康卓.  应用与环境生物学报. 2019(05)
[9]野生树莓果实总酚含量及抗氧化能力分析[J]. 张志敏,朱祥,刘针杏.  农产品加工. 2018(22)
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硕士论文
[1]绵羊益生菌剂培养条件优化及干制工艺研究[D]. 郭洪侠.内蒙古农业大学 2018
[2]苹果酵素对Ⅱ型糖尿病小鼠模型作用的实验研究[D]. 马巧灵.大理大学 2016
[3]苹果酵素对小鼠肠道微生态的恢复重建作用[D]. 郭乐.大理学院 2015
[4]红树莓果酒酵母优选及中试放大工艺研究[D]. 王家利.内蒙古农业大学 2013
[5]天然微生物酵素发酵机理、代谢过程及生物活性研究[D]. 蒋增良.浙江理工大学 2013



本文编号：3170586