BMP-4修饰BMSCs复合同种异体骨软骨柱修复兔膝关节软骨缺损

发布时间：2021-05-08 14:16

　　第一章BMSCs体外培养及鉴定目的:建立体外培养、鉴定BMSCs完整体系,为动物体内实验提供细胞来源。方法:1.取普通级雄性新西兰兔股骨及胫骨,全骨髓贴壁法分离原代BMSCs。2.倒置相差显微镜观察细胞形态变化,流式细胞仪检测CD34、CD45、CD29、CD44、CD90表面分子标志物表达率。3.对分离培养细胞进行成骨、脂肪及软骨诱导分化,诱导周期结束后行特异性染色（茜素红、油红O、阿利辛蓝染色）。结果:本实验分离、培养的原代细胞形态均一,呈长梭形,漩涡状、稻穗样分布。高表达CD29、CD44及CD90,低表达CD34、CD45。三系诱导可见脂滴、骨盐、胶原纤维形成,证实所培养细胞为BMSCs。第二章BMP-4对BMSCs体外增殖及成软骨分化影响目的:探明Ad-BMP-4对BMSCs体外增殖及相关成软骨蛋白分泌的影响。方法:1.取P2代细胞,设立病毒梯度组,感染细胞,观察绿色荧光蛋白表达情况,检测绿色荧光蛋白表达量以确定最佳MOI。2.取P2代细胞,设立对照组、空载组、实验组,于铺板第0d、1d、3d、5d、7d行CCK-8法检测细胞增殖。3.取P2代细胞,设立对照组、空载组、实验组... 

【文章来源】：蚌埠医学院安徽省

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一章 BMSCs体外培养及鉴定
    材料和方法
    结果
    讨论
第二章 BMP-4对BMSCs体外增殖及成软骨分化影响
    材料和方法
    结果
    讨论
第三章 Ad-BMP-4-BMSCs复合同种异体骨软骨柱修复关节软骨缺损
    材料和方法
    结果
    讨论
结论
参考文献
致谢
附录 A 英文缩略词表
附录 B 支架材料在软骨组织工程中的应用进展
    参考文献
附录 C 攻读学位期间发表文章


【参考文献】：
期刊论文
[1]新型壳聚糖水凝胶结合软骨细胞修复兔关节软骨缺损的实验研究(英文)[J]. Ming ZHAO,Zhu CHEN,Kang LIU,Yu-qing WAN,Xu-dong LI,Xu-wei LUO,Yi-guang BAI,Ze-long YANG,Gang FENG.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2015(11)
[2]软骨脱细胞基质支架材料的软骨组织工程实验研究[J]. 张晨,景士兵,杨琨,徐燕莉,聂军,王燕妮,文晓泉,高景恒.  中国修复重建外科杂志. 2008(07)
[3]PLGA-[ASP-PEG]三嵌段基质材料对骨髓间充质干细胞黏附增殖及诱导成骨分化的研究[J]. 段智霞,郑启新,郭晓东,白玉,袁泉,陈顺广.  中国骨伤. 2008(04)



本文编号：3175484