Nrf2调节UC-MSCs衰老和免疫抑制能力机制及其在BPD中的作用研究

发布时间：2021-06-11 17:10

　　背景:支气管肺发育不良（Bronchopulmonary dysplasia,BPD）是新生儿尤其是早产儿最常见的慢性肺部疾病,其发病率和死亡率高,严重威胁婴幼儿尤其是早产儿的生命。虽然围产期和新生儿医学在提高早产儿存活率方面取得重大进展,但在BPD治疗方面进展缓慢。在传统医学领域中,临床干预和治疗手段的创新与探索仍不能从根本上改善严重BPD的预后。因此,迫切需要一种新型有效的干预与治疗方式来解决这一难题。近年来,间充质干细胞（Mesenchymal stem cells,MSCs）移植为BPD的治疗提供了新的治疗策略。脐带间充质干细胞（Umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs）作为一种具有高度自我更新和多向分化潜能的成体干细胞,其低免疫原性和免疫调节特性,使其成为MSCs移植治疗免疫相关疾病的理想来源。虽然早期的临床研究显示了MSCs的安全性,但临床有效性受到争议。因此,探究影响MSCs免疫调节活性的因素是发展其有效治疗策略的关键。体外大量扩增是MSCs在临床应用中必经的一个过程,伴随的复制性衰老可能是影响MSCs临床应用有效性的重要... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：92 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

UC-MSCs表面标志抗原表达和分化能力检测A:显微镜下的形态

重庆医科大学硕士研究生学位论文34图1.2验证UC-MSCs中siRNA转染效率A:RT-qPCR检测UC-MSCs经siRNA处理3天后Nrf2的mRNA表达，**P<0.01。B:WB检测UC-MSCs经siRNA处理3天后Nrf2的蛋白表达。C:相应灰度值分析，***P<0.001。Fig1.2VerifythetransfectionefficiencyofsiRNAinUC-MSCs.A:ThemRNAexpressionofNrf2inUC-MSCsafter3daysofsiRNAtreatmentdetectedbyRT-qPCR,**P<0.01.B:TheproteinexpressionofNrf2inUC-MSCsafter3daysofsiRNAtreatmentdetectedbywesternblot.C:Correspondinggrayvalueanalysis,***P<0.001.2.3敲低Nrf2对UC-MSCs移植新生大鼠BPD模型的治疗作用的影响2.3.1新生大鼠生长状态及生存率常氧组（NOR+PBS，NOR+NC，NOR+siNrf2）中的新生大鼠生长状态良好，皮毛光泽，吃奶好，反应灵敏活跃。（BPD+PBS）模型组和（BPD+NC，BPD+siNrf2）治疗组中新生大鼠体格生长缓慢，反应差，皮毛粗糙暗淡，皮下脂肪不如常氧组丰满。高氧暴露的新生大鼠于7d龄开始表现出离氧不耐受，出现头部震颤，呼吸急促，皮肤发绀，活动量减少等症状，恢复高氧后，头颤、气促及发绀症状逐渐减轻，但仍较常氧组反应差，活动减少，随着高氧暴露时间延长，症状逐渐明显。于7d龄移植治疗术后开始计算生存率，常氧组与高氧组相比，高氧组有极少数新生大鼠死亡，但是各组间的生存率无统计学差异（图1.3），提示UC-MSCs以及Nrf2无改善新生大鼠生存率的作用。高氧组较常氧组体重增长明显减缓（***P<0.001）；与（BPD+PBS）模型组比较，（BPD+NC）治疗组体重增长具有统计学意义（*P<0.05），（BPD+NC）与（BPD+siNrf2）治疗组体重增长无显著差异，提示给予UC-MSCs治疗能够改善高氧诱导的BPD新生大鼠体重增长迟缓，但敲低Nrf2对UC-MSCs改善体重的能力无明显影响（图1.4）。

重庆医科大学硕士研究生学位论文35图1.3不同处理对BPD新生大鼠生存率的影响ns表示无统计学意义Fig1.3Effectsofvarioustreatmentsonthesurvivalrateofneonatalratsnsmeansnosignificant.图1.4不同处理对BPD新生大鼠体重增长的影响ns表示无统计学意义，*P<0.05，***P<0.001Fig1.4Effectsofdifferenttreatmentsonweightgainofneonatalratsnsmeansnosignificant,*P<0.05,***P<0.001.2.3.2肺泡灌洗液（BALF）细胞计数新生大鼠BALF中的细胞总数能在一定程度上反映肺组织炎症细胞浸润情况。（BPD+PBS）模型组较所有常氧组(NOR+PBS；NOR+NC；NOR+siNrf2）新生大鼠BALF中细胞总数明显增加（***P<0.001），（BPD+NC）治疗组较BPD模型组BALF中细胞总数减少（*P<0.05)，而（BPD+siNrf2）治疗组较（BPD+NC）治

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3224945