黄连素通过抑制ROS-内质网应激减轻棕榈酸诱导的足细胞凋亡

发布时间：2021-06-14 18:52

　　研究背景足细胞作为终末分化的细胞,是肾小球滤过屏障的重要组成部分,对于维持正常的肾小球滤过功能至关重要。足细胞内脂质异常聚集可引起细胞脂质毒性、损伤和凋亡,在慢性肾脏病（Chronic kidney disease,CKD）的进展中发挥重要的作用。黄连素（Berberine,BBR）作为一种从药用植物（如黄连）中提取的异喹啉生物碱,是临床治疗肠道感染性疾病的常用药物。近年来发现黄连素还可降血脂和延缓CKD的进展。然而黄连素是否可以减轻高脂诱导的足细胞损伤有待于进一步研究。目的本文拟研究黄连素对棕榈酸（Palmitic acid,PA）诱导的足细胞凋亡的影响,并进一步阐明其机制是否与其减轻足细胞内活性氧（Reactive oxygen species,ROS）诱导的内质网应激有关,为黄连素在防治脂质肾毒性提供基础证据。方法分别用PA、内质网应激抑制剂4-苯基丁酸（4-phenyl butyric acid,4-PBA）、BBR及抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine,NAC）作用于小鼠永生性足细胞,用CCK-8试剂盒（Cell Counting Kit 8）检测足细胞... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：43 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

黄连素改善棕榈酸诱导的足细胞死亡率和凋亡Fig3.1BerberinealleviatedPA-inducedpodocytesdeathandapoptosis（A）PA(150μmol/L)和不同浓度黄连素刺激足细胞24h，CCK-8检测细胞死亡率，n=3,P<0.05vs.Controlgroup,#P<0.05vs.PAgroup,ΔP<0.05vs.BBRgroup.&P<0.05vs.

重庆医科大学硕士研究生学位论文17的蛋白质，从而调节BIP的转录水平，增强内质网的功能[21,22]。为了探讨内质网应激是否在PA诱导的足细胞凋亡中发挥作用，我们通过Westernblot检测BIP的表达，我们发现，PA可呈浓度依赖性引起BIP的表达升高(图2A-2B)，各不同剂量组两两比较，差异有统计学意义（P<0.05）。通过细胞免疫荧光检测发现，与对照组相比，PA组中BIP的荧光强度增加。(图2H-2I)。此外，内质网应激相关蛋白PERK、ATF4、CHOP、IRE1α和ATF6在PA刺激下表达增加(图2A,2C-2G)，各不同剂量组两两比较，差异有统计学意义（P<0.05）。表明PA可通过激活内质网应激的三条信号通路引起细胞凋亡。图3.2PA可引起足细胞的内质网应激Fig3.2PAinducedendoplasmicreticulumstressinpodocytes(A)用不同浓度的（PA0μmol/L、50μmol/L、150μmol/L、300μmol/L）刺激足细胞24h，Westernblot检测BIP、PERK、ATF4、CHOP、ATF6和IRE1α的表达。(B-G)对图2A中的

重庆医科大学硕士研究生学位论文19图3.3内质网应激参与了PA诱导的足细胞凋亡Fig3.3ERstresswasinvolvedinPA-inducedapoptosisinpodocytes.（A）PA(150μmol/L)或4-PBA(10μmol/L)作用足细胞24h,Westernblot检测BIP,PERK,ATF4,CHOP,ATF6,IRE1α和Caspase12的表达。(B-H)对图3A中的BIP(B),PERK(C),ATF4(D),CHOP(E),ATF6(F),IRE1α(G),Caspase12(H)进行量化分析，n=3，P<0.05vs.Controlgroup，#P<0.05vs.PAgroup，ΔP<0.05vs.4-PBAgroup。(I)PA(150μmol/L)或4-PBA(10μmol/L)刺激足细胞24h,细胞免疫荧光检测BIP的表达(400×)。(J)对图3I进行量化分析，n=3.，P<0.05


本文编号：3230138