鞣花酸通过抑制小胶质细胞NLRP3炎症小体的激活对LPS诱导的多巴胺神经毒性产生神经保护作用

发布时间：2021-08-25 13:09

　　目的:探讨鞣花酸（Ellagic acid,EA）对脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）诱导的多巴胺（dopamine,DA）能神经元损伤的保护作用及其可能机制。方法:1.在体实验:30只SD大鼠（200-250g）随机分为5组:假手术组、EA（50 mg/kg）组、LPS（10μg）组、LPS+EA（10 mg/kg）组和LPS+EA（50 mg/kg）组,每组6只。采用单侧中脑黑质内注射LPS（10μg）诱导DA能神经元损伤模型。制模后连续7天灌胃给予EA。通过转棒实验分析大鼠行为学改变;免疫组织化学染色检测DA能神经元特征性标记物—酪氨酸羟化酶（TH）的表达;免疫荧光双标法观察小胶质细胞特征性标志物—离子钙结合蛋白1（Iba-1）和NLRP3炎症小体的共定位现象;Western Blot检测TH、Iba-1、NLRP3、caspase-1、pro-caspase-1、TNF-α,IL-1β和IL-18的蛋白表达。2.离体实验:（1）为了观察EA对DA能神经元有无直接保护作用,将MN9D细胞（DA能神经元细胞株）随机分为5组:空白组、EA（1μM）组、6-OHDA... 

【文章来源】：遵义医科大学贵州省

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

EA保护LPS诱导的DA能神经元损伤

遵义医科大学硕士学位论文何雪梅19BCD图2EA抑制LPS诱导的小胶质细胞和NLRP3炎症小体激活。（A）NLRP3和小胶质细胞免疫荧光双染；（B）大鼠中脑Iba-1的蛋白表达；（C）大鼠中脑NLRP3炎性小体信号通路的蛋白表达；（4）大鼠中脑炎症介质TNF-α、IL-1β和IL-18的蛋白表达。（x±SEM,n=6）*p<0.05，与假手术组比较；#p<0.05，与LPS组比较。Fig2.EAamelioratedLPS-elicitedactivationofmicrogliaandNLRP3inflammasomesignalinginvivo.(A)Double-immunofluorescenceofNLRP3andOX-42.(B)TheproteinexpressionofIba-1inratmidbrain.(C)TheproteinexpressionsofNLRP3,caspase-1andpro-caspase-1inratmidbrain.(D)TheproteinexpressionsofTNF-α,IL-1βandIL-18inratmidbrain.Datawerethemean±SEMfrom6ratsandexpressedasapercentageoftheshamgroup.*p<0.05comparedwithshamgroup;#p<0.05comparedwithLPSgroup.

遵义医科大学硕士学位论文何雪梅21BC图3EA对DA能神经元无直接保护作用。（A）MTT法检测细胞存活；（B）TH阳性神经元染色和计数；（C）TH蛋白质表达。（x±SEM）*p<0.05，与空白组比较；#p<0.05，与6-OHDA组比较。

【参考文献】：
期刊论文
[1]线粒体在NLRP3炎性小体活化中的作用[J]. 庄一波,张爱华.  中华肾脏病杂志. 2014 (03)
[2]神经炎症与神经退行性疾病的关系[J]. 邱奥望,刘展,郭军,彭聿平.  生理科学进展. 2011(05)



本文编号：3362174