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岩藻聚糖硫酸酯通过死亡受体途径与线粒体途径诱导HT-29细胞凋亡的研究

发布时间:2021-09-25 20:06
  岩藻聚糖硫酸酯作为褐藻所固有的细胞间多糖,是一种水溶性的杂聚多糖,又被称为褐藻糖胶。研究表明,岩藻聚糖硫酸酯通过诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期和抑制细胞迁移等多条途径抑制肿瘤细胞增殖,但是其作用靶点研究较少。因此,为解决上述抑制肿瘤的机制以及作用靶点的问题,本课题通过设计系列实验首先从细胞凋亡、细胞周期和细胞迁移等方面对岩藻聚糖硫酸酯抑制肿瘤细胞增殖活性的机制进行了初步地探究,接着从蛋白水平和基因水平进一步证明了岩藻聚糖硫酸酯抑制肿瘤的通路靶点以及信号通路。具体包括以下几个方面:(1)岩藻聚糖硫酸酯抑制肿瘤细胞增殖活性的研究通过MTT法探究多种来源的岩藻聚糖硫酸酯对不同细胞增殖活性的影响,研究结果表明800 μg/mL时实验室提取的岩藻聚糖硫酸酯对HT-29细胞增殖活性的抑制作用最明显,抑制率约为60%;探究岩藻聚糖硫酸酯对细胞迁移、周期以及凋亡等方面的影响时,结果表明800 μg/mL时,岩藻聚糖硫酸酯诱导细胞凋亡的效果最为显著,约有80%的细胞处于凋亡晚期:阻滞细胞G0/G1期次之,阻滞率约为50%;抑制细胞迁移的效果并不显著,抑制率仅有30%,这表明岩藻聚糖硫酸酯主要通过诱导细胞凋亡... 

【文章来源】:山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:70 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

岩藻聚糖硫酸酯通过死亡受体途径与线粒体途径诱导HT-29细胞凋亡的研究


图2-2不同浓度岩藻聚糖硫酸酯对HT-29细胞迁移活性的影响??(A)不同浓度岩藻聚糖硫酸酯下HT-29细胞迁移的结果图(l〇〇x)?(B)小室下层??细胞数量统计结果图

聚糖,细胞周期,硫酸,浓度


3.3岩藻聚糖硫酸酯阻滞HT-29细胞周期结果??通过流式细胞术检测岩藻聚糖硫酸酯对HT-29细胞周期的影响,结果如图??2-3所示,与对照组相比,实验组加入岩藻聚糖硫酸酯后能够阻滞细胞周期,随??着岩藻聚糖硫酸酯的浓度增大,细胞G0/G1期受到明显的阻滞,在80〇ng/mL时??细胞阻滞率约为50%。??(A>?"I?a?-i?_??^?5j?sir??O?90?lOO?ISO?200?3*0??O?Mg/mL?200?MQ/mL??a?rg??8?"?B?〇£?〇^ ̄?I?n?〇???^?_?Hi?MP〇3?〇?■?0〇?丨??;:l??——f?■?i?fx'i?'y?i?**?1??〇?so?toe?im>?aao??〇?so?too???〇?mo?2〇o??400?pg/mL?8〇f)Mg/m?_??(B)??■■I?C0/Q1??1^?s??i〇〇-i?warn?G2/M??.:I|I?M?ill?Li??0?200?400?800??Concentration(|jg/mL)??图2-3不同浓度岩藻聚糖硫酸酯对HT-29细胞周期的影响??25??

分布图,聚糖,硫酸,细胞凋亡


(A)不同浓度岩藻聚糖硫酸酯下HT-29细胞的周期分布图(B)各细胞周期细胞??数量统计结果图Zp<0.1VS对照组,p<0.05VS对照组,…p<0.01VS对照组。??3.4岩藻聚糖硫酸酯诱导HT-29细胞调亡验证??通过Annexin?V-FITC双染法检测岩藻聚糖硫酸酯诱导HT-29细胞凋亡,如??图2-4所示,与对照组相比,实验组在800呢/mL时有80%的细胞处于凋亡晚??期,且随着岩藻聚糖硫酸酯浓度的增大,趋向于凋亡晚期的细胞明显增多,由此??可以证明岩藻聚糖硫酸酯能够显著诱导细胞凋亡。??(A>??????.3.69?0.0100?:?Q1?Q???5.05?34.S??:謝:—^??j'?_,時,?-??*??'?-?-??.??????.?丨??…?.*■?a.**:.??°^/mL?200?Mg/mL?? ̄i??—????Q1?Q2?in*! ̄?—???irf*?sa1?i*-?|?■?*?— ̄—?—■???■_?雷??—? ̄?■■_■■■???i丨■?_?_?_■!??ftl-H???*?I**?IQ*??**??400?pg/mL?800?ng/mL??(B)?mm?qi?mm?Q2??mm?Q3?〇4??lOQni?一???*r*r??BO-??^?e〇-?7?sr?***??§>4?i?I?t??■i?10V?m?*?m??MUUL??0?200?400?800??Con?centration(|ig/mL)??图2-4不同浓度岩藻聚糖硫酸酯对HT-29细胞凋亡的影响??

【参考文献】:
期刊论文
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[5]不同相对分子质量岩藻聚糖硫酸酯抗血栓活性比较及机制探讨[J]. 陈安进,赵雪,张芳.  中国药学杂志. 2012(06)



本文编号:3410359

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