外泌体介导环状RNA调节肺腺癌细胞PC9对吉非替尼耐药的相关研究

发布时间：2021-10-25 16:51

　　吉非替尼的获得性耐药是导致肺癌靶向治疗失败,患者预后差、死亡率高的主要原因之一。目前所能预测吉非替尼耐药的分子标记物匮乏且单一。外泌体作为细胞间传递信号的囊泡,随着研究的不断深入,发现其在肿瘤发生发展、侵袭转移和耐药等方面发挥着重要作用。目的本实验通过对人肺腺癌细胞株（PC9）和人肺腺癌吉非替尼耐药株（PC9R）来源的外泌体进行circ RNA高通量差异表达分析,寻找出新的潜在预测耐药的分子标记物。方法收集PC9和PC9R细胞上清液,并且进行外泌体提取、观察与鉴定;通过高通量测序建立了外泌体中环状RNA（circ RNA）差异表达谱;挑选出差异表达最显著的目标circ RNA;收集吉非替尼敏感的肺腺癌患者及吉非替尼耐药患者外周血,运用实时荧光定量PCR（q RT-PCR）验证外周血外泌体中目标circ RNA表达,再运用数据库、R语言对该circ RNA下游mi RNA和靶基因预测并且进行通路富集分析,进一步探究外泌体circ RNA参与吉非替尼耐药的分子网络。结果1.我们分离出PC9和PC9R细胞上清液中的胞外颗粒。透射电镜下,外泌体外形呈类圆形;粒径检测仪结果显示直径均值在30-1... 

【文章来源】：蚌埠医学院安徽省

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

测序文库构建

外泌体电镜

19图3粒径检测图图4WB分析2.外泌体circRNA表达谱分析我们对PC9细胞和PC9R细胞上清液外泌体进行高通量测序，一共检测到2286个circRNA，接着我们按照显著差异水平标准（logFC＞1或logFC＜-1、P＜0.05）进行过滤，挑选出样本间差异表达的circRNA共有376个，其中35个circRNA表达上调明显，341个circRNA表达下调明显。然后对circRNA在染色体上的分布分析（图5A）和circRNA序列长度分析（图5B），我们发现差异表达的circRNAPC9PC9RPC9PC9R123123TSG101CD9CD63

【参考文献】：
期刊论文
[1]Hippo信号通路与癌症相关研究进展[J]. 张丽娜,占婷.  疑难病杂志. 2018(12)
[2]TRIM24介导肺癌细胞吉非替尼耐药机制探讨[J]. 李海英,王庆苓,包海军,张恒,庄莹.  中国肺癌杂志. 2016(01)
[3]肿瘤细胞来源的Exosomes的研究进展[J]. 杨云山,钟海均,林能明.  中国肿瘤生物治疗杂志. 2014(04)
[4]肺腺癌EGFR-TKI获得性耐药突变T790M的发现[J]. 王洁,白晓燕.  循证医学. 2008(04)
[5]DADS诱导人胃癌细胞分化作用中ERK/AP-1通路的改变[J]. 凌晖,宋颖,曾铁兵,袁静萍,苏琦.  中国药理学通报. 2003(11)

博士论文
[1]Hippo信号关键因子TAZ调控EMT增敏肺癌靶向治疗的研究[D]. 许伟.南京医科大学 2016



本文编号：3457808