二氢杨梅素通过激活神经细胞自噬对阿尔茨海默病的作用研究

发布时间：2021-11-05 06:23

　　目的:阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）是一种与年龄密切相关的神经退行性疾病。自噬紊乱可能是诱发AD的重要原因之一,本文旨在研究二氢杨梅素（Dihydromyricetin,DHM）能否通过影响自噬对阿尔茨海默病小鼠模型及细胞模型发挥保护作用,并探讨潜在的作用机制。方法:在动物实验中,选取7月龄的APP/PS1转基因痴呆模型小鼠随机分为AD对照组和DHM治疗组,7月龄野生型C57BL/6J小鼠作为WT正常对照组,每组均为10只。DHM治疗组小鼠按照1mg/（kg·d）的剂量腹腔注射DHM,AD对照组和WT正常对照组小鼠注射等量经生理盐水稀释的DMSO溶液,连续按时给药28 d。在细胞实验中,选取人的神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞,以及稳转APP基因的APP-SH-SY5Y细胞作为细胞模型,以40μmol/L浓度的DHM处理24 h后的APP-SH-SY5Y细胞为DHM-APP组,同浓度的DMSO稀释液处理24 h的SH-SY5Y细胞为CON组,APP-SH-SY5Y细胞为APP组。采用Morris水迷宫实验（Morris Water Maze,MWM）检... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

Morris水迷宫实验检测DHM对AD小鼠的作用

重庆医科大学硕士研究生学位论文25图3：DHM对AD小鼠脑内自噬相关蛋白的作用。Fig.3：EffectofDHMonautophagy-relatedproteinsinthebrainofADmice.2.4DHM对APP/PS1双转基因小鼠脑组织超微结构的影响TEM观察显示，AD组小鼠脑内神经细胞出现明显水肿，高尔基体、线粒体等细胞器明显肿胀(图4，B)，并在多处发现深染的晚期自噬小体的存在(图4，E)。DHM组小鼠脑内神经细胞及细胞器的水肿现象明显减弱(图4，C)，并发现了正常自噬溶酶体的存在(图4，F)。以上结果表明，AD小鼠脑内自噬小体与溶酶体的结合可能受阻，DHM可显著恢复AD小鼠自噬流的紊乱性。图4：DHM对AD小鼠脑内超微结构的作用。Fig.4：TheeffectofDHMontheultrastructureofADmousebrain.A,B,C:10000X,100kV.D,E,F:40000X,100kV.比例尺：A,B,C=2μm，D,E,F=250nm.

重庆医科大学硕士研究生学位论文262.5DHM对APP-SH-SY5Y细胞模型的自噬相关蛋白的影响WB检测发现（图5），与CON组相比，APP组自噬调控基因Beclin1、自噬特异性标记分子LC3-Ⅱ/Ⅰ表达均无明显变化(P>0.05)，自噬体与溶酶体融合标志蛋白Rab7b表达也未发生明显变化(P>0.05)，自噬底物相关蛋白p62(P<0.01)、溶酶体相关膜蛋白LAMP1(P<0.001)表达明显升高。与APP组相比，DHM-APP组Beclin1表达增高(P<0.01)，LC3-Ⅱ/Ⅰ表达无明显变化(P>0.05)，Rab7表达升高(P<0.00)，p62(P<0.001)、LAMP1(P<0.01)表达明显降低。以上结果表明，APP组细胞的自噬流自噬溶酶体降解功能受损，DHM干预后自噬流中期自噬体和溶酶体的融合增多，自噬溶酶体的降解功能得到了显著改善。图5：DHM对APP细胞内自噬相关蛋白的作用。Fig.3：EffectofDHMonautophagy-relatedproteinsintheAPPcell.


本文编号：3477251